Drug Testing and Analysis

Bài báo này tóm tắt các tác động tiêu cực đến sức khỏe có khả năng xảy ra nhất do việc sử dụng cần sa thường xuyên kéo dài qua nhiều năm, như được chỉ ra bởi các nghiên cứu dịch tễ học đã xác lập mối quan hệ giữa việc sử dụng cần sa và các kết quả bất lợi; loại trừ nguyên nhân đảo ngược; và kiểm soát các giải thích thay thế có thể xảy ra. Chúng tôi cũng đã tập trung vào các kết quả bất lợi mà có đủ bằng chứng về tính sinh học thuyết phục. Sự tập trung đặt vào những tác động tiêu cực đến sức khỏe có ý nghĩa công cộng tiềm năng lớn nhất – những tác động có khả năng xảy ra và ảnh hưởng đến một phần lớn người dùng cần sa thường xuyên. Những tác động tiêu cực có khả năng xảy ra nhất của việc sử dụng thường xuyên bao gồm hội chứng nghiện, chức năng hô hấp bị suy yếu, bệnh tim mạch, tác động bất lợi đến sự phát triển tâm lý-sóc của thanh thiếu niên và sức khỏe tâm thần, cũng như suy giảm nhận thức còn lại. Bản quyền © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.

Một số lượng lớn các dẫn xuất cathinone đã cho thấy một loạt các đặc tính sinh học hoạt động, thu hút được sự quan tâm lớn từ các cộng đồng liên quan đến nghiên cứu dược phẩm. Một số dẫn xuất trong số này đã trở nên phổ biến như những ‘chất cao hợp pháp’ giải trí do sự sẵn có của chúng trên Internet và các cửa hàng trên đường phố. Một nghiên cứu trước đó đã mô tả phân tích định tính 24 sản phẩm ‘cao hợp pháp’ Energy‐1 (NRG‐1) và NRG‐2 thu được từ 18 trang web sau khi lệnh cấm mephedrone và các dẫn xuất của nó có hiệu lực vào tháng 4 năm 2010. Hầu hết các sản phẩm này chứa một hỗn hợp các cathinone chỉ mang một nhãn mới. Tại đây, ba sản phẩm cathinone bổ sung đã được phát hiện; hai từ một mẫu NRG‐1 và một từ một mẫu NRG‐3. Báo cáo này mô tả sự nhận diện của chúng. Mẫu NRG‐1 số 1 bao gồm một hỗn hợp 4 cathinone, cụ thể là 4‐fluoromethcathinone (1), 1‐(3,4‐methylenedioxyphenyl)‐2‐(methylamino)pentan‐1‐one (pentylone, 2), 3,4‐methylenedioxy‐α‐pyrrolidinobutyrophenone (MDPBP, 3) và 3,4‐methylenedioxypyrovalerone (MDPV, 4). Mẫu được gán nhãn NRG‐3 (đơn gán nhầm với cấu trúc hóa học của mephedrone) bao gồm một hỗn hợp của 4‐methyl‐α‐pyrrolidinopropiophenone (MPPP, 5) và (2), trong khi mẫu NRG‐1 còn lại số 2 (cũng bị gán nhầm với cấu trúc hóa học của mephedrone) bao gồm một hỗn hợp của (2) và (3). Các phân tích định tính đã được thực hiện bằng GC‐(EI/CI)‐MS, quang phổ NMR và xác nhận bằng cách chuẩn bị các tiêu chuẩn. Việc chuẩn bị các tiền chất brom hóa chứa nhân 3,4‐methylenedioxyphenyl đã cho thấy sự α,α‐dibrom hóa mở rộng: các dữ liệu phổ khối và NMR của các hợp chất trung gian này cũng được trình bày và thảo luận. Bản quyền © 2010 John Wiley & Sons, Ltd.

Cannabinoid tổng hợp là các hợp chất tâm thần thường bị xác định là thành phần hoạt động của các hỗn hợp hút thuốc dễ dàng có sẵn qua Internet ở một số quốc gia. Những hỗn hợp thảo dược này đã trở nên cực kỳ phổ biến như một sự thay thế hợp pháp cho các sản phẩm dựa trên cần sa và khó phát hiện bằng các xét nghiệm ma túy thông thường.

Tại đây, chúng tôi báo cáo về quá trình chuyển hóa in vitro và in vivo của AM‐2201, 1‐[(5‐fluoropentyl)‐1H‐indol‐3‐yl]‐(naphthalen‐1‐yl)methanone, và UR‐144 (KM‐X1), (1‐pentylindol‐3‐yl)‐(2,2,3,3‐tetramethylcyclopropyl)methanone được phân lập bằng phương pháp sắc ký lỏng chuẩn bị từ các hỗn hợp hút thuốc bán ở Nga. Sau khi ủ với các vi thể gan người (HLM) cũng như với các isoenzyme cytochrome 3A4 và 2B6, các con đường chuyển hóa đã được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng – triple quadrupole và khối phổ độ phân giải cao với ion hóa phun điện trong chế độ dương. Đã phát hiện ra rằng các phản ứng in vitro bao gồm mono‐ và dihydroxyl hóa, mất chuỗi bên N‐alkyl và sự hình thành các metabolite dihydrodiol trong trường hợp AM‐2201. HLM được cho là vượt trội hơn hai isoenzyme còn lại trong việc tạo ra các metabolite cannabinoid. Cuối cùng, các mẫu nước tiểu pháp y đã được phân tích để xác thực dữ liệu in vitro và đã chỉ ra rằng đối với cả hai cannabimimetics, các mục tiêu sàng lọc được đề xuất là các metabolite monohydroxyl hóa. Bản quyền © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.

Được gọi là ‘gia vị’, một số thuốc mới, được quảng cáo là hỗn hợp thảo dược, đã xuất hiện trên thị trường trong vài năm qua, trong đó các cannabinoid tổng hợp JWH‐018 và đồng phân C₈ của CP 47,497 đã được xác định là các thành phần hoạt chất chính. Do những tác dụng tương tự như cannabis đã được báo cáo, nhiều quốc gia châu Âu đã cấm những chất này. Tổ chức Chống Doping Thế Giới cũng đã ngăn cấm rõ ràng các cannabinoid tổng hợp trong thể thao chuyên nghiệp khi thi đấu. Vì mẫu nước tiểu đã là mẫu kiểm soát doping ưa chuộng, việc làm rõ các con đường chuyển hóa của những chất này là đặc biệt quan trọng để áp dụng chúng trong các chương trình kiểm tra thuốc thể thao. Trong một báo cáo gần đây, một nghiên cứu về chuyển hóa pha-I của JWH‐018 trong điều kiện in vitro đã được trình bày cho thấy chủ yếu là các chuyển hóa hydroxyl hóa và N‐dealkyl hóa. Do những phát hiện này, một mẫu nước tiểu của một người đàn ông khỏe mạnh khai báo đã hút một sản phẩm ‘gia vị’ đã được sàng lọc để tìm các chuyển hóa pha-I và pha-II tiềm năng bằng phương pháp khối phổ độ phân giải cao/độ chính xác cao trong báo cáo hiện tại. Phần lớn các chuyển hóa pha-I được quan sát trong các nghiên cứu in vitro trước đó của JWH‐018 đã được phát hiện trong mẫu nước tiểu này và hơn nữa, hầu hết các monoglucuronide tương ứng của chúng. Do không phát hiện được JWH‐018 nguyên vẹn, chuyển hóa monohydroxyl hóa, là chuyển hóa phong phú nhất, đã được chọn làm phân tích mục tiêu cho mục đích kiểm tra thuốc thể thao; một phương pháp phát hiện sau đó đã được phát triển và xác thực theo các giao thức sàng lọc thông thường dựa trên thủy phân enzym, chiết xuất lỏng-lỏng và phân tích khối phổ khối lỏng/electrospray mối ghép. Phương pháp này đã được áp dụng cho khoảng 7500 mẫu nước tiểu kiểm soát doping với hai phát hiện JWH‐018 và chứng minh khả năng nhận diện nhạy bén và chọn lọc JWH‐018 cùng các chuyển hóa của nó trong nước tiểu của con người. Bản quyền © 2010 John Wiley & Sons, Ltd.

Dịch tễ học dựa trên nước thải (SBE) sử dụng phân tích nước thải để phát hiện và định lượng việc sử dụng ma túy trong một cộng đồng. Mặc dù SBE đã được áp dụng nhiều lần để ước lượng các loại ma túy bất hợp pháp cổ điển, chỉ có một vài nghiên cứu điều tra các chất gây nghiện mới (NPS). Các hợp chất này bắt chước các tác động của ma túy bất hợp pháp bằng cách giới thiệu những sửa đổi nhẹ đối với cấu trúc hóa học của các loại ma túy bị kiểm soát. Chúng tôi mô tả quy trình tối ưu hóa, xác nhận và ứng dụng một phương pháp phân tích sử dụng sắc ký lỏng ghép với phân tích khối lượng bằng phun điện tích dương (LC-ESI-MS/MS) để xác định bảy NPS trong nước thải: methoxetamine (MXE), butylone, ethylone, methylone, methiopropamine (MPA), 4-methoxymethamphetamine (PMMA) và 4-methoxyamphetamine (PMA). Quy trình chuẩn bị mẫu được thực hiện bằng cách sử dụng chiết xuất pha rắn (SPE) với các cartidge Oasis MCX. Việc phân tách LC được thực hiện trên một cột HILIC (150 x 3 mm, 5 µm) đảm bảo phân giải tốt cho các phân tích với thời gian chạy tổng cộng là 19 phút. Giới hạn định lượng thấp nhất (LLOQ) nằm trong khoảng từ 0,5 đến 5 ng/L cho tất cả các hợp chất. Phương pháp này đã được xác nhận bằng cách đánh giá các thông số sau: độ nhạy, độ chọn lọc, tính tuyến tính, độ chính xác, độ chính xác, tỷ lệ hồi phục và ảnh hưởng của ma trận. Phương pháp đã được áp dụng trên các mẫu nước thải thu thập từ các nhà máy xử lý nước thải ở Bỉ và Thụy Sĩ, nơi tất cả các hợp chất được điều tra đều được phát hiện, ngoại trừ MPA và PMA. Hơn nữa, sự hiện diện nhất quán của MXE đã được quan sát thấy trong hầu hết các mẫu nước thải với mức cao hơn LLOQ. Bản quyền © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.

Các chất hướng thần mới (NPS) là thách thức cho các nhà độc chất pháp y và lâm sàng, cũng như các nhà lập pháp. Chúng tôi trình bày phát hiện của mình từ các trường hợp mà các NPS đã được phát hiện trong vật liệu sinh học. Trong khoảng thời gian ba năm từ 2012–2014, chúng tôi đã phát hiện NPS trong 112 trường hợp (trong tổng số 1058 đã phân tích), với 75 trường hợp chỉ riêng năm 2014. Mức độ phổ biến của tất cả các NPS (15,1–17,6%) tương tự như amphetamine chỉ phát hiện được trong 15,1–16,5% trường hợp. Các loại thuốc mới được phát hiện thuộc các lớp sau: cathinones (88%), cannabinoid tổng hợp (5%), phenethylamines (3%), piperazines và piperidines (3%), arylalkylamines (1%) và khác (1%). Các loại thuốc được phát hiện (theo thứ tự giảm dần tần suất): 3‐MMC (50), α‐pyrrolidinopentiophenone (α‐PVP) (23), pentedrone (16), 3',4'‐methylenedioxy‐α‐pyrrolidinobutyrophenone (MDPBP) (12), cannabinoid tổng hợp UR‐144 (7), ethcathinone (5), mephedrone (5), methylenedioxypyrovalerone (MDPV) (4), 4‐methylethcathinone (4‐MEC) (3), buphedrone (3), desoxypipradrol (2‐DPMP) (3), methylone (2) và 2C‐B (2). Trong các trường hợp đơn lẻ, phát hiện 2‐methylmethcathinone (2‐MMC), 2C‐P, eutylone, 25I‐NBOMe, meta‐chlorophenylpiperazine (mCPP), ephedrone, methiopropamine (MPA) và 5‐(2‐aminopropyl)benzofuran (5‐APB). Một NPS là tác nhân duy nhất trong 35% tổng số trường hợp và hai hoặc nhiều NPS có mặt trong 19% các trường hợp. NPS (một hoặc nhiều chất) cùng với các thuốc truyền thống khác (như amphetamine, cannabinoid, cocaine và benzodiazepines) đã được phát hiện trong hầu hết (65%) các trường hợp. NPS thường xuyên được phát hiện trong máu của tài xế lái xe là thách thức cho các nhà độc chất do thiếu dữ liệu về ảnh hưởng của chúng đến hiệu suất tâm lý vận động. Một đánh giá về nồng độ đã cho thấy một dãy giá trị rộng trong các loại trường hợp khác nhau, đặc biệt là lái xe dưới ảnh hưởng của ma túy (DUID) và ngộ độc. Bản quyền © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.

Bài báo này báo cáo về việc xác định và đặc trưng hóa hóa học đầy đủ của isotonitazene (N,N‐diethyl‐2‐[5‐nitro‐2‐({4‐[(propan‐2‐yl)oxy]phenyl}methyl)‐1H‐benzimidazol‐1‐yl]ethan‐1‐amine), một opioid NPS có tác dụng mạnh và là thành viên đầu tiên của lớp hợp chất benzimidazole có mặt trên các thị trường trực tuyến. Thú vị thay, hợp chất này đã được bán dưới tên etonitazene, một đồng phân cấu trúc. Việc xác định isotonitazene được thực hiện bằng phương pháp sắc ký khí khối phổ (GC–MS) và sắc ký lỏng khối phổ thời gian bay (LC‐QTOF‐MS), trong đó xác định giá trị khối lượng chính xác m/z là 411.2398. Tất cả dữ liệu sắc ký cho thấy sự hiện diện của một hợp chất đơn lẻ, tinh khiết cao. Sự xác nhận của đồng phân benzimidazole ở vị trí cụ thể được thực hiện sử dụng phổ NMR ¹H và ¹³C, sau đó việc đặc trưng hóa hóa học đã được hoàn tất bằng cách ghi lại quang phổ biến đổi Fourier (FT‐IR). Một thử nghiệm báo cáo dựa trên tế bào sống để đánh giá hoạt động sinh học in vitro tại thụ thể μ‐opioid (MOR) đã chỉ ra rằng isotonitazene có hoạt tính cao (EC₅₀ là 11.1 nM) và hiệu quả (E_max 180% so với hydromorphone), do đó xác nhận rằng chất này là một opioid mạnh. Isotonitazene chưa được phát hiện trước đây, dù ở dạng bột hay trong dịch sinh học. Độ mạnh và hiệu quả cao của isotonitazene, kết hợp với việc hợp chất này được bán không pha loãng, đại diện cho một mối nguy hiểm ngay lập tức cho bất kỳ ai có ý định sử dụng bột này.

N‐[(1S)‐1‐(aminocarbonyl)‐2‐methylpropyl]‐1‐(cyclohexylmethyl)‐1H‐indazole‐3‐carboxamide (AB‐CHMINACA) là một cannabinoid tổng hợp mới được giới thiệu. Tính đến hiện tại, không có thông tin nào về sự chuyển hóa của AB‐CHMINACA ở người in vitro hoặc in vivo. Do đó, các nghiên cứu theo dõi sinh học để kiểm tra mức tiêu thụ AB‐CHMINACA thiếu thông tin về các dấu hiệu sinh học tiềm năng (ví dụ: các sản phẩm chuyển hóa) cần nhắm đến. Để lấp đầy khoảng trống này, chúng tôi đã điều tra sự chuyển hóa in vitro của AB‐CHMINACA bằng cách sử dụng vi hạt gan người (HLMs). Sự hình thành các sản phẩm chuyển hóa của AB‐CHMINACA đã được theo dõi bằng sắc ký lỏng kết hợp với phổ khối thời gian bay. Hai mươi sáu sản phẩm chuyển hóa của AB‐CHMINACA đã được phát hiện, bao gồm bảy sản phẩm mono-hydroxyl hóa và sáu sản phẩm di-hydroxyl hóa, cùng một sản phẩm chuyển hóa từ quá trình N-dealkylation của AB‐CHMINACA, tất cả đều được sản xuất bởi các enzyme cytochrome P450 (CYP). Hai sản phẩm chuyển hóa có nhóm carboxyl, có thể được sản xuất bởi các enzyme amidase, và năm sản phẩm chuyển hóa glucuronide cũng được hình thành. Năm sản phẩm chuyển hóa mono-hydroxyl hóa và một sản phẩm chuyển hóa carboxyl có khả năng là các sản phẩm chuyển hóa chính được phát hiện. Sự tham gia của từng CYP trong việc hình thành các sản phẩm chuyển hóa của AB‐CHMINACA đã được kiểm tra bằng cách sử dụng một bảng rộng bảy CYP tái tổ hợp người (rCYPs). Tất cả các sản phẩm chuyển hóa hydroxyl hóa của AB‐CHMINACA được tạo ra bởi HLMs cũng đều được tạo ra bởi các rCYPs đã thử nghiệm, trong đó rCYP3A4 là enzyme hoạt động mạnh nhất. Hầu hết các sản phẩm chuyển hóa in vitro của AB‐CHMINACA cũng có mặt trong nước tiểu của một người dùng AB‐CHMINACA, do đó cho thấy tính đáng tin cậy của các kết quả thu được thông qua các thí nghiệm chuyển hóa in vitro nhằm dự đoán chuyển hóa in vivo của AB‐CHMINACA. Các sản phẩm chuyển hóa của AB‐CHMINACA cần nhắm đến trong các nghiên cứu theo dõi sinh học sử dụng mẫu nước tiểu giờ đây đã được xác định một cách đáng tin cậy và có thể được sử dụng cho phân tích thường xuyên. Bản quyền © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.

Lái xe dưới ảnh hưởng của ma túy (DUID) là một vấn đề toàn cầu. Một số quốc gia đã áp dụng các quy định về DUID, chứng tỏ tác dụng răn đe và ảnh hưởng của chúng đến an toàn giao thông. Tuy nhiên, việc sử dụng các chất tâm lý mới (NPS) và thuốc kê đơn chưa được biết đến, vì các bài kiểm tra sàng lọc tại hiện trường hiện tại vẫn chưa được điều chỉnh cho các hợp chất này. Trong nghiên cứu này, 558 mẫu máu được thu thập trong các kiểm tra tại hiện trường ở Bỉ (từ tháng 1 đến tháng 8 năm 2015) sau khi có kết quả dương tính từ bài kiểm tra Drugwipe 5S® và 199 mẫu dịch miệng (OF) lấy từ các miếng kiểm tra có kết quả âm tính đã được phân tích. Tỷ lệ dương tính với NPS trong máu là 7%, trong khi tỷ lệ này đạt 11% trong OF. Các NPS được phát hiện bao gồm: diphenidine, ketamine, 4‐fluoroamphetamine, 2‐amino‐indane, methoxetamine, α‐PVP, methiopropamine, sự kết hợp của 5‐MAPB/5‐EAPB, TH‐PVP, mephedrone, methedrone, 4‐methylethylcathinone, 5‐MeO‐DALT, 4‐Acetoxy‐DiPT, AB Fubinaca, FUB‐JWH018, JWH020, trifluoromethylphenylpiperazine và ethylphenidate. Hơn nữa, 17% mẫu máu (và 5% OF) chứa một loại thuốc giảm đau, 10% (0.5%) là benzodiazepine/thuốc gây ngủ, 5% (2%) là thuốc chống trầm cảm, 2% (3%) là thuốc chống loạn thần, 2% là thuốc chống động kinh, và 1% là methylphenidate. Sự hiện diện của NPS trong nhóm dân số trẻ (chủ yếu là nam giới) lái xe dưới ảnh hưởng của thuốc đã được chứng minh. Hơn nữa, một mức độ cao của việc sử dụng đa loại thuốc bao gồm sự kết hợp của NPS, thuốc hợp pháp và thuốc bị lạm dụng đã được ghi nhận. Cần thiết lập nghiên cứu thêm về phát triển các kỹ thuật phát hiện NPS tại chỗ. Trong khi đó, cần thực hiện nghiên cứu về tác động của việc sử dụng đa chất lên khả năng lái xe và các dấu hiệu vật lý/ tâm lý sau khi sử dụng NPS nhằm cải thiện khả năng phát hiện DUID tại chỗ của cảnh sát, để họ có thể tiến hành lấy mẫu máu cho một sàng lọc chưa biết.

3‐[(Adamantan‐1‐yl)carbonyl]‐1‐pentylindole (AB‐001), một chất tổng hợp giống cannabis, đã được phát hiện trong các sản phẩm của cửa hàng đầu ở Ireland vào năm 2010. Các cơ quan của Đức cũng đã báo cáo về nó tới Trung tâm Giám sát Châu Âu về Ma túy và Nghiện (EMCDDA) thông qua Hệ thống Cảnh báo Sớm (EWS) vào năm 2011. Vì các hợp chất giống cannabis có nguồn gốc từ indole, như JWH‐018, JWH‐073, và JWH‐250, trải qua quá trình chuyển hóa rộng rãi, nên người ta kỳ vọng rằng AB‐001 cũng sẽ có hành vi tương tự. Để bao gồm nó trong các quy trình sàng lọc độc tính của chúng tôi, chúng tôi đã xác định các chất chuyển hóa trong nước tiểu của con người sau khi uống. Các chất chuyển hóa chính được tìm thấy là sản phẩm mono-hydroxy hóa adamantane và sản phẩm mono-hydroxy hóa adamantane/N-dealkyl hóa. Không có hợp chất cha nào được tìm thấy trong nước tiểu, và các chất chuyển hóa có thể phát hiện được trong vòng tối đa 160 giờ sau khi sử dụng. Bản quyền © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.