Canadian Science Publishing

Nghiên cứu sự phân hủy lipid trong cá đông lạnh đã dẫn đến việc phát triển một phương pháp đơn giản và nhanh chóng để chiết xuất và tinh chế lipid từ các vật liệu sinh học. Toàn bộ quy trình có thể được thực hiện trong khoảng 10 phút; nó hiệu quả, có thể tái lập và không có sự thao tác gây hại. Mô ướt được đồng nhất hóa với hỗn hợp chloroform và methanol theo tỷ lệ sao cho hệ thống tan được hình thành với nước trong mô. Sau khi pha loãng với chloroform và nước, dịch đồng nhất được phân tách thành hai lớp, lớp chloroform chứa toàn bộ lipid và lớp methanol chứa tất cả các hợp chất không phải là lipid. Một chiết xuất lipid tinh khiết được thu nhận chỉ đơn giản bằng cách tách lớp chloroform. Phương pháp này đã được áp dụng cho cơ cá và có thể dễ dàng thích nghi để sử dụng với các mô khác.

Các nghiên cứu về phân hủy lipid trong cá đông lạnh đã dẫn đến việc phát triển một phương pháp đơn giản và nhanh chóng để chiết xuất và tinh lọc lipid từ các vật liệu sinh học. Toàn bộ quy trình có thể được thực hiện trong khoảng 10 phút; nó hiệu quả, có thể tái sản xuất và không gây ra các thao tác gây hại. Mô ướt được đồng hóa với hỗn hợp chloroform và methanol theo tỷ lệ đảm bảo hệ thống tạo thành hòa tan với nước trong mô. Việc pha loãng với chloroform và nước tách đồng hóa thành hai lớp, lớp chloroform chứa tất cả các lipid và lớp methanolic chứa tất cả các phi lipid. Một chiết xuất lipid tinh khiết được thu được chỉ bằng cách cô lập lớp chloroform. Phương pháp này đã được áp dụng cho cơ cá và có thể dễ dàng điều chỉnh để sử dụng với các mô khác.

Quy trình quang phổ được đề xuất bởi Schwert và Takenaka để định lượng chymotrypsin và trypsin đã được điều chỉnh và mở rộng để bao gồm ứng dụng cho N-benzoyl-L-tyrosine ethyl ester và α-p-toluenesulphonyl-L-arginine methyl ester. Mức độ độ nhạy và độ chuyên biệt cao hơn mà chúng tôi đạt được cho phép xác định dấu vết chymotrypsin trong sự hiện diện của một lượng lớn trypsin và ngược lại. Một quy trình quang phổ tương tự để định lượng thrombin cũng được mô tả.

Đặc trưng của các động mạch là chúng không tuân theo định luật Hooke, mà kháng lại sự kéo giãn mạnh mẽ hơn khi chúng bị kéo dài hơn. Dường như điều này có thể là do sự kết hợp của các sợi elastin trong lớp đàn hồi, với các sợi collagen ít co giãn hơn trong lớp cơ và lớp ngoài, ngày càng nhiều sợi này đạt đến 'chiều dài không bị kéo dài' khi việc kéo giãn tăng lên. Điều này đã được xác minh trên các động mạch đùi của người, từ giải phẫu bệnh, bằng cách so sánh các 'đường hình đàn hồi' (căng thẳng so với chu vi) trước và sau khi tiêu hóa khác nhau của collagen bằng axit formic, và tiêu hóa elastin bằng trypsin thô (chứa elastase). Điều này chứng minh rằng khả năng kháng lại sự kéo giãn ở áp suất thấp chủ yếu do các sợi elastin, còn ở áp suất sinh lý do cả collagen và elastin, nhưng chủ yếu là do collagen, và ở áp suất cao hầu như hoàn toàn do các sợi collagen. Trong các nghiên cứu trong tương lai về ảnh hưởng của tuổi tác đối với độ đàn hồi của động mạch đùi, độ dốc ban đầu của đường đồ đàn hồi có thể được coi như một chỉ số của trạng thái, hoặc số lượng, của các sợi elastin, và độ dốc cuối cùng như một chỉ số của trạng thái, hoặc số lượng, của các sợi collagen.

Các lực tầm xa khác nhau có hiệu quả giữa các phân tử trong trạng thái điện tử cơ bản của chúng được khảo sát. Các bậc độ lớn được đưa ra cho những lực có thể xảy ra trong tương tác của chuỗi lipid và protein. Kết quả cho thấy lực tĩnh điện có thể chịu trách nhiệm giữ và kết hợp các thành phần protein và lipid lại với nhau, nhưng các lực phân tán London – Van der Waals có thể là quan trọng nhất trong việc duy trì các chuỗi lipid trong micelle hoặc lớp đôi. Sự chú ý đặc biệt được dành cho các lực phân tán và các điều kiện mà dưới đó các lực này có thể cộng hưởng tại chỗ; có thể tính toán các giá trị chính xác của năng lượng phân tán tương tác giữa các chuỗi hydrocarbon bão hòa tại khoảng cách ngắn (một vài angstrom). Một biểu thức tổng quát được đưa ra cho năng lượng phân tán giữa hai chuỗi song song và đối kháng được xây dựng từ các đơn vị giống nhau, và các giá trị số được đưa ra cho trường hợp các chuỗi hydrocarbon gần nhau. Năng lượng hấp dẫn tổng thể rất nhạy cảm với khoảng cách giữa các phân tử. Vai trò của "tính đặc hiệu theo khoảng cách" trong các tương tác liên quan đến các chuỗi axit béo không bão hòa và sự đóng góp của nó vào độ ổn định của lipoprotein được xem xét ngắn gọn.

Một steroid mới trong máu, 11-ketotestosterone, đã được phân lập từ cá hồi sockeye đực sau sinh sản. Steroid này đã được xác định bằng phương pháp sắc ký, quang phổ hồng ngoại, sự chuyển hóa hóa học và tổng hợp. Steroid này có mặt với nồng độ 12 μg/100 ml huyết tương và có thể đã được báo cáo là corticosterone bởi các nhà nghiên cứu khác. Bằng chứng được đưa ra nhằm hỗ trợ sự tồn tại của corticosterone ở nồng độ rất thấp trong huyết tương cá hồi. Nồng độ cortisol, cortisone, corticosterone và tổng hợp steroid dương tính Porter–Silber đã được xác định trong các mẫu huyết tương lớn lấy từ cá đực và cái sau sinh sản.

Hormon cortisone, cortisol và 17-hydroxyprogesterone đã được tách ra từ huyết tương của cá hồi sockeye Fraser River trước khi sinh sản. Huyết tương của cá cái chứa nồng độ cortisone và cortisol gấp đôi so với huyết tương của cá đực, lần lượt là 41 μg và 26 μg/100 ml so với 22 μg và 11 μg/100 ml. Corticosterone có thể có mặt với nồng độ rất thấp và không phát hiện thấy 11-desoxycorticosterone hoặc aldosterone trong huyết tương của khoảng 100 con cá. Cortisone, cortisol, và tổng hợp 17-hydroxysteroids đã được xác định định lượng trong các mẫu huyết tương thu được từ hai giống cá hồi thuần chủng ở các giai đoạn trưởng thành sinh dục khác nhau. Nồng độ kết hợp của cortisone và cortisol, tại miệng sông gấp ba lần so với nồng độ bình thường ở người, đã tăng lên đến 17 lần nồng độ này sau khi sinh sản. Các kết quả được thảo luận liên quan đến cái chết của cá.

Ảnh hưởng của huyết thanh và tinh chất mô đối với tỉ lệ phân bào của gan tái sinh đã được kiểm nghiệm. Các hợp phần sau đây được tiêm vào chuột Sprague–Dawley 24 giờ sau khi cắt gan một phần: (a) huyết thanh từ chuột bình thường nặng 290–340 g; (b) huyết thanh từ chuột 24 hoặc 72 giờ sau khi cắt gan một phần; (c) tinh chất gan từ chuột bình thường nặng 290–340 g; (d) tinh chất gan tái sinh (24 giờ sau khi cắt gan một phần); và, để đối chứng, (e) tinh chất não đại diện cho mô không phân bào; (f) tinh chất tinh hoàn đại diện cho mô có hoạt động phân bào. Huyết thanh và gan từ động vật trưởng thành ức chế sự khởi phát của quá trình phân bào. Huyết thanh và gan tái sinh từ chuột đã cắt gan một phần, cũng như mô dị chủng, không cho thấy hiệu ứng ức chế. Kết quả cho thấy sự hiện diện của một chất ước chế phân bào đặc hiệu cho cơ quan trong huyết thanh và gan của động vật trưởng thành.

Phức hợp albumin palmitate-1-C¹⁴ đã được tiêm vào với tốc độ không đổi qua một ống thông động mạch cảnh (được đưa vào từ 5–7 ngày trước đó) vào các con chuột thí nghiệm không nhịn đói và không bị tổn thương trong môi trường có nhiệt độ 30° hoặc 6 °C, sau khi đã thích ứng với nhiệt độ 30° hoặc 6 °C. Ở 6 °C, cả chuột được thích nghi với nhiệt độ ấm và lạnh đều thở ra như nhau một tỷ lệ lớn hơn C^I4O₂ từ C¹⁴ được tiêm và có lượng C¹⁴ cuối cùng trong các axit béo tự do (F.F.A.) trong huyết tương thấp hơn so với mức 30 °C. Những kết quả này cho thấy rằng F.F.A. trong huyết tương hoạt động như là chất nền cho quá trình nhiệt sinh khi tiếp xúc với lạnh. Ngoài ra, sự quay vòng và oxy hóa của F.F.A. tăng không phải lúc nào cũng có mối quan hệ nghịch đảo với việc sử dụng carbohydrate mà có thể được tăng cường trong các điều kiện dẫn đến tốc độ quay vòng và oxy hóa glucose cao hơn đồng thời.