FEBS Letters

Một thụ thể estrogen mới (sau đây gọi là ERβ) đã được clon bằng cách sử dụng các primer PCR phức hợp. So sánh chuỗi axit amin của ERβ với thụ thể estrogen 'cổ điển' (ERα) cho thấy một mức độ bảo tồn cao của miền liên kết DNA (96%) và miền liên kết ligand (58%). Ngược lại, miền A/B, vùng bản lề và miền F không được bảo tồn. Phân tích Northern blot cho thấy ERβ được biểu hiện trong tuyến ức, lách, buồng trứng và tinh hoàn của con người. Việc chuyển gen tạm thời của một cấu trúc biểu hiện ERβ cùng với một cấu trúc báo cáo dựa trên ERE trong tế bào CHO đã chứng minh rõ ràng sự kích hoạt chéo của ERβ bởi 17β-estradiol. Thêm vào đó, đối kháng thể ERα ICI-164384 cũng là một đối kháng thể mạnh đối với ERβ. Thú vị thay, mức độ kích hoạt của 17β-estradiol cao hơn đối với ERα so với ERβ, điều này có thể phản ánh điều kiện không tối ưu cho ERβ ở cấp độ ligand, yếu tố đáp ứng hoặc ngữ cảnh tế bào.

Một lớp pyridinyl imidazoles ức chế homolog MAP kinase, được gọi là kinase tái kích hoạt (RK) ở đây [Lee et al. (1994) Nature 372, 739–746]. Chúng tôi hiện nay cho thấy rằng một trong những hợp chất này (SB 203580) ức chế RK in vitro (IC₅₀ = 0.6 μM), ức chế sự kích hoạt của MAPKAP kinase‐2 và ngăn chặn sự phosphoryl hóa protein sốc nhiệt (HSP) 27 phản ứng với interleukin‐1, các căng thẳng tế bào và endotoxin vi khuẩn in vivo. Những kết quả này xác lập rằng MAPKAP kinase‐2 là một chất nền RK sinh lý, và rằng HSP27 được phosphoryl hóa bởi MAPKAP kinase‐2 in vivo. Tính đặc hiệu của SB 203580 được chỉ ra bởi sự không thành công trong việc ức chế 12 protein kinase khác in vitro, và bởi sự thiếu tác dụng của nó lên sự kích hoạt của kinase RK và các chuỗi MAP kinase khác in vivo. Chúng tôi gợi ý rằng SB 203580 sẽ hữu ích cho việc xác định các vai trò sinh lý và mục tiêu khác của RK và MAPKAP kinase‐2.

Sự hình thành H₂O₂ đã được nghiên cứu trong ty thể của tim chuột, đã được xử lý trước bằng H₂O₂ và aminotriazole để giảm khả năng chống oxy hóa của chúng. Kết quả cho thấy rằng tốc độ hình thành H₂O₂ bởi ty thể oxy hóa 6 mM succinate bị ức chế bởi một chất khử năng lượng proton, ADP và phosphate, malonate, rotenone và myxothiazol, và được kích thích bởi antimycin A. Tác động của ADP bị loại bỏ bởi carboxyatractylate và oligomycin. Việc thêm chất khử năng lượng sau rotenone gây ức chế thêm sự sản xuất H₂O₂. Sự ức chế hình thành H₂O₂ bởi chất khử năng lượng, malonate và ADP+P_i cho thấy tỉ lệ thuận với sự giảm ΔΨ bởi các hợp chất này. Một giá trị ΔΨ ngưỡng được tìm thấy, trên đó có sự tăng mạnh về sản xuất H₂O₂. Ngưỡng này hơi vượt qua mức ΔΨ trạng thái 3. Dữ liệu thu được phù hợp với khái niệm [Skulachev, V.P., Q. Rev. Biophys. 29 (1996), 169–202] rằng lực động proton cao trong trạng thái 4 có thể nguy hiểm cho tế bào do tăng xác suất hình thành superoxide.

Chúng tôi báo cáo sự phân lập và đặc trưng hóa một peptide người mới có hoạt tính kháng khuẩn, được gọi là LEAP‐1 (peptide kháng khuẩn biểu hiện tại gan). Sử dụng phương pháp xét nghiệm khối phổ phát hiện các peptide giàu cysteine, một peptide dài 25 dư lượng chứa bốn liên kết disulfide đã được xác định trong siêu lọc máu người. Sự biểu hiện LEAP‐1 chủ yếu được phát hiện ở gan và, ở mức thấp hơn nhiều, ở tim. Trong các thử nghiệm khuếch tán tia sống, các vi khuẩn Gram dương như Bacillus megaterium, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus, Staphylococcus carnosus, và vi khuẩn Gram âm Neisseria cinerea cũng như nấm men Saccharomyces cerevisiae đã thể hiện độ nhạy phụ thuộc vào liều khi điều trị với LEAP‐1 tổng hợp. Phát hiện LEAP‐1 mở rộng các họ peptide được biết đến của động vật có vú với hoạt tính kháng khuẩn thông qua motif disulfide mới và mẫu biểu hiện khác biệt của nó.

Chất béo nâu (BAT) và cơ xương là những vị trí quan trọng của quá trình sinh nhiệt không run. Protein không liên kết-1 (UCP1) là tác nhân chính của sinh nhiệt không run trong BAT và gần đây đã được mô tả là UCP2 phổ quát [1] đã được liên kết với cân bằng năng lượng. Trong nỗ lực hiểu rõ hơn về các sự kiện sinh hóa cơ bản liên quan đến sinh nhiệt không run trong cơ bắp, chúng tôi đã sàng lọc một thư viện cDNA cơ xương của con người và đã phân lập được ba mẫu: UCP2, UCP3_L và UCP3_S. UCP3 mới có độ tương đồng 57% và 73% với UCP1 và UCP2 của người, tương đối đặc hiệu cho cơ xương và sự biểu hiện của nó không bị ảnh hưởng bởi sự thích nghi với lạnh. Thành viên mới này của gia đình UCP là một protein ứng cử viên cho việc điều chỉnh kiểm soát hô hấp trong cơ xương.

Hai protein phong phú với 140 và 134 axit amin đã được tinh khiết và xác định trình tự từ não người. Chúng được xác định thông qua khả năng tương tác của chúng trên các tấm miễn dịch với một kháng thể đơn dòng đã được đặc trưng một phần, kháng thể này nhận diện protein tau theo cơ chế phụ thuộc vào sự phosphoryl hóa. Protein 140 axit amin giống hệt với tiền chất của thành phần không phải Aβ của amyloid bệnh Alzheimer, mà lại có tính đồng hợp cao với synuclein từ các điện bản của cá Torpedo và não chuột. Protein 134 axit amin là đồng homologue với phosphoneuroprotein 14 của bò; nó có 61% đồng nhất về trình tự với protein 140 axit amin. Tính tương đồng chưa từng được nhận diện giữa hai protein này xác định một họ các synuclein trong não người. Chúng tôi gọi protein 140 và 134 axit amin là α‐synuclein và β‐synuclein, tương ứng. Cả hai synuclein đều được biểu hiện chủ yếu trong não, nơi chúng tập trung tại các đầu dây thần kinh trước synapse.

Mục đích của nghiên cứu này là đánh giá hoạt động chống oxy hóa tương đối của một loạt các loại caroten và xanthophyll thông qua khả năng của chúng trong việc tiêu diệt cá thể gốc tự do ABTS^·+. Kết quả cho thấy rằng khả năng tương đối của các carotenoid trong việc tiêu diệt gốc tự do ABTS^·+ bị ảnh hưởng bởi sự hiện diện của các nhóm chức với độ phân cực tăng dần, chẳng hạn như nhóm carbonyl và nhóm hydroxyl, ở các vòng đầu cuối, cũng như bởi số lượng các liên kết đôi liên hợp.

Hình thái biểu hiện của mRNA mã hóa hai thụ thể orexin (OX₁R và OX₂R) trong não chuột rat đã được khảo sát. OX₁R và OX₂R thể hiện sự phân bố khác biệt rõ rệt. Trong vùng hạ hypothalamus, mRNA OX₁R có nồng độ cao nhất tại nhân ventromedial hypothalamic, trong khi OX₂R chủ yếu được biểu hiện trong nhân paraventricular. Nồng độ cao của mRNA OX₁R cũng được phát hiện tại tenia tecta, cấu trúc hồi hải mã, raphe dorsal và locus coeruleus. MRNA OX₂R chủ yếu được biểu hiện trong vỏ não, nhân accumbens, nhân dưới thalamic và nhân paraventricular thalamic, nhân anterior pretectal. Sự hiện diện của mRNA thụ thể orexin trong hypothalamus hỗ trợ vai trò của nó trong việc điều chỉnh việc ăn uống. Sự phân bố rộng rãi của thụ thể orexin trong não cho thấy có thể có thêm các chức năng khác cho orexin.