Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Các vesicle ngoại bào nguồn gốc từ nội mô CNS là các dấu ấn sinh học của bệnh hoạt động trong bệnh đa xơ cứng
Tóm tắt
Bệnh đa xơ cứng (MS) là một bệnh phức tạp, không đồng nhất, được đặc trưng bởi sự viêm, suy myelin và tính thấm của hàng rào máu-não (BBB). Hiện tại, bệnh hoạt động được xác định thông qua sự tái phát được xác nhận bởi bác sĩ hoặc phát hiện các tổn thương có tăng cường tương phản qua MRI, cho thấy tính thấm của BBB. Tuy nhiên, việc xác nhận lâm sàng về bệnh hoạt động có thể gặp nhiều khó khăn. Do đó, việc theo dõi bệnh trong MS có thể được hưởng lợi từ việc xác định một dấu ấn sinh học dễ tiếp cận cho bệnh hoạt động. Chúng tôi tin rằng các vesicle ngoại bào (EV) được tách ra từ huyết tương là những ứng cử viên xuất sắc để đáp ứng nhu cầu này. Bởi vì vai trò quan trọng của tính thấm BBB trong sinh bệnh học của MS và xác định bệnh hoạt động, chúng tôi đã tìm cách xác định EV có nguồn gốc từ tế bào nội mô hệ thần kinh trung ương (CNS) như là các dấu ấn sinh học của MS hoạt động. Vì các tế bào nội mô tiết ra nhiều EV hơn khi bị kích thích hoặc tổn thương, chúng tôi giả thuyết rằng nồng độ tuần hoàn của EV có nguồn gốc từ tế bào nội mô CNS sẽ tăng lên ở những bệnh nhân MS có bệnh hoạt động. Để kiểm tra điều này, chúng tôi đã phát triển một phương pháp mới để xác định EV có nguồn gốc từ tế bào nội mô CNS được tách ra từ huyết tương của bệnh nhân bằng cách sử dụng cytofluorometry. EV từ nội mô được xác định qua việc không có dấu ấn lymphocyte hoặc tiểu cầu CD3 và CD41, tương ứng, và biểu hiện dương tính của các dấu ấn pan-nội mô CD31, CD105 hoặc CD144. Để xác định xem EV có nguồn gốc từ tế bào nội mô CNS hay không, EV biểu thị CD31, CD105 hoặc CD144 đã được đánh giá để xác định sự biểu hiện của protein myelin và lymphocyte MAL, một protein được biểu hiện đặc biệt bởi các tế bào nội mô CNS so với các tế bào nội mô của các cơ quan ngoại vi. Các thí nghiệm kiểm soát chất lượng cho thấy rằng EV được phát hiện bằng phương pháp cytofluorometry của chúng tôi có kích thước từ 0,2 đến 1 micron. Phân tích cytofluorometry của EV tách ra từ 20 đối chứng khỏe mạnh, 16 bệnh nhân MS (RRMS) tái phát-điểm lại đang có bệnh hoạt động không nhận liệu pháp sửa đổi bệnh, 14 bệnh nhân RRMS có bệnh ổn định không nhận liệu pháp sửa đổi bệnh, 17 bệnh nhân RRMS tái phát ổn định đang nhận natalizumab, và 14 bệnh nhân RRMS ổn định đang nhận ocrelizumab cho thấy sự gia tăng đáng kể về nồng độ huyết tương của EV có nguồn gốc từ tế bào nội mô CNS ở những bệnh nhân có bệnh hoạt động so với tất cả các nhóm còn lại (p = 0.001). Kết luận: Lần đầu tiên, chúng tôi đã xác định được một phương pháp để nhận diện EV có nguồn gốc từ tế bào nội mô CNS trong huyết tương của mẫu máu người. Kết quả từ nghiên cứu pilot của chúng tôi cho thấy rằng mức độ tăng lên của EV có nguồn gốc từ tế bào nội mô CNS có thể là một dấu ấn sinh học của tính thấm BBB và bệnh hoạt động trong MS.
Từ khóa
#đa xơ cứng #ngoại bào #tính thấm hàng rào máu-não #dấu ấn sinh học #nội mô CNSTài liệu tham khảo
Thompson AJ, Baranzini SE, Geurts J, Hemmer B, Ciccarelli O. Multiple sclerosis. Lancet. 2018;391(10130):1622–36.
Khoury SJ, Guttmann CR, Orav EJ, Hohol MJ, Ahn SS, Hsu L, et al. Longitudinal MRI in multiple sclerosis: correlation between disability and lesion burden. Neurology. 1994;44(11):2120–4.
Inglis H, Norris P, Danesh A. Techniques for the analysis of extracellular vesicles using flow cytometry. J Vis Exp. 2015. https://doi.org/10.3791/52484.
Jansen F, Nickenig G, Werner N. Extracellular vesicles in cardiovascular disease: potential applications in diagnosis, prognosis, and epidemiology. Circ Res. 2017;120(10):1649–57.
Rubin LL, Staddon JM. The cell biology of the blood-brain barrier. Annu Rev Neurosci. 1999;22:11–28.