Wiley

Abstract: The association of HLA‐B27 with ankylosing spondylitis and other spondyloarthropathies ranks among the strongest between any HLA antigen and a human disease. Yet, in spite of intense research and advanced knowledge of the biochemistry and biology of major histocompatibility complex molecules, the mechanism of this association remains unknown. This review attempts a critical assessment of current pathogenetic hypotheses from evidence concerning the epidemiology of HLA–B27 association with disease, its peptide‐binding specificity, and other aspects of the molecular biology and immunology of this molecule.

Abstract:  The very strong association of human leukocyte antigen (HLA)‐B27 with spondyloarthritis might be related to its peptide‐presenting properties. The natural polymorphism of this molecule influences both peptide specificity and disease susceptibility. In this study, we present a comprehensive compilation of known natural ligands of HLA‐B27 arising from endogenous proteins of human cells, together with a statistical assessment of residue usage among constitutive peptide repertoires of multiple HLA‐B27 subtypes. This analysis provides evidence that every peptide position, including ‘non‐anchor’ ones, may be subjected to selection on the basis of its contribution to HLA‐B27 binding and also allows a quantization of residue preferences at known anchor positions. The present registry is intended as a basis on which to build up reliable criteria to assess the effect of HLA‐B27 polymorphism on peptide presentation, for T‐cell epitope predictions, and for molecular mimicry studies.

Tóm tắt: Chúng tôi đã giới thiệu trước đây về định typ gen HLA‐DQA1,‐DPB1 và DQB1 bằng phương pháp PCR‐RFLP sửa đổi sử dụng một số enzyme cắt giới hạn thông tin, mà có hoặc không có vị trí cắt trong vùng DNA khuếch đại, tùy thuộc vào các alen HLA, làm cho việc đọc mẫu băng RFLP dễ dàng hơn nhiều. Trong nghiên cứu này, 43 alen HLA‐DRB1, ngoại trừ DRB1*1103 và *1104 không có enzyme cắt giới hạn nào để phân biệt một cách riêng biệt, có thể được xác định bằng phương pháp PCR‐RFLP sửa đổi kết hợp với 7 cặp mồi cụ thể cho từng nhóm. Không thể phân biệt được DRB 1*0701 và DRB1*0702 khi chúng giống hệt nhau ở exon thứ hai của DRB1. Đối với khuếch đại gene DRB1 của các kháng nguyên liên quan đến DRI‐DRB1, DR2‐DRB1, DR4‐DRB1, DR7‐DRB1, DR9‐DRB1, DRw10‐DRB1 hoặc DRw52 (DR3, w11, w12, w13, w14, và DRw8), exon thứ hai của gene DRB1 đã được khuếch đại chọn lọc bằng cách sử dụng từng mồi cụ thể cho nhóm từ DNA gen của 70 dòng tế bào B đồng hợp HLA và người Nhật khỏe mạnh bằng PCR. DNA khuếch đại đã được tiêu hóa bằng các enzyme cắt giới hạn và sau đó được điện di kiểm tra đơn giản để xác định việc cắt hay không cắt DNA, mặc dù một số alen chỉ có thể được phân biệt sau khi kiểm tra các mẫu băng RFLP được tạo ra và trong một số trường hợp sử dụng kỹ thuật tiêu hóa đôi với hai enzyme cắt giới hạn. Phương pháp PCR‐RFLP sửa đổi này có thể được áp dụng thành công cho tất cả các kiểu gen dị hợp DRB1 có thể có, mặc dù thực tế có 15 cặp dị hợp không thể phân biệt lý thuyết bằng phương pháp PCR‐SSO, vì phương pháp PCR‐RFLP có thể cho biết liệu hai vị trí đa hình có liên kết với nhau (vị trí cis) hay nằm trên một nhiễm sắc thể khác (vị trí trans) bằng cách kiểm tra chiều dài các băng RFLP được tạo ra với kỹ thuật tiêu hóa đôi. Do đó, phương pháp PCR‐RFLP về kỹ thuật là đơn giản, thực tiễn và tiết kiệm chi phí cho việc xác định các alen HLA‐DRB1 trong công việc xác định HLA thường xuyên.

Tóm tắt: Chúng tôi đã phát triển một kỹ thuật mới để phân loại gen HLA lớp II bằng cách tiêu hóa các gen được khuếch đại bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR) với các endonuclease hạn chế (phương pháp PCR-RFLP). Phương pháp PCR-RFLP này là một kỹ thuật phân loại hiệu quả và thuận tiện cho các alen lớp II. Tuy nhiên, những đoạn nhỏ hoặc các băng gần nhau trên gel polyacrylamide đôi khi cản trở việc phân tích chính xác các băng RFLP. Hơn nữa, các enzyme hạn chế mà chúng tôi đã báo cáo trong các bài viết trước đây không đủ để xác định kiểu gen của tất cả các cá thể dị hợp. Ở đây, chúng tôi báo cáo một phương pháp PCR-RFLP cải tiến sử dụng một số enzyme hạn chế thông tin có một vị trí cắt đơn lẻ hoặc, ngược lại, không có vị trí cắt trong vùng DNA được khuếch đại, tùy thuộc vào các alen HLA, làm cho việc đọc các mẫu băng RFLP dễ dàng hơn rất nhiều. Mỗi exon thứ hai của gene HLA-DQA1 hoặc -DPB1 được khuếch đại chọn lọc từ DNA gen của 70 dòng tế bào B HLA đồng hợp và 100 người Nhật khỏe mạnh bằng PCR. DNA được khuếch đại được tiêu hóa bằng các endonuclease hạn chế và sau đó được điện di để kiểm tra việc cắt hay không cắt DNA. ApaLI, HphI, BsaJI, Fokl, MboII và Mnll có khả năng phân biệt tám alen của gene DQA1. Tương tự, 19 alen của gene DPB1 có thể được phân biệt với các enzyme Bsp1286I, Fokl, Ddel, BsaJI, BssHII, Cfr13I, Rsal, EcoNI và AvaII. Phương pháp PCR-RFLP đã được sửa đổi này có thể được áp dụng thành công cho các cá thể dị hợp. Do đó, phương pháp này đơn giản về kỹ thuật và thực tiễn hơn cho công việc phân loại HLA thường quy so với phương pháp PCR-RFLP trước đây của chúng tôi.

Nhóm máu và kháng nguyên HL‐A đã được xác định ở 12 thành viên của một gia đình trong đó có bốn anh em mắc bệnh bạch cầu lympho mạn tính (CLL). Haplotype HL‐A giống nhau [Da25 (W30 + W31), HL‐A13] đã được quan sát thấy ở ba anh em bị bệnh đã được xét nghiệm.

Trường hợp này, cùng với trường hợp của một gia đình tương tự được Schweitzer và cộng sự (1973) nghiên cứu, trong đó ba trong số năm anh em mắc bệnh đã chia sẻ hai kháng nguyên - HL‐A2 và W5 - cho thấy có thể có sự liên kết giữa HL‐A và nguy cơ mắc CLL.

Tóm tắt: Các đặc điểm của các đồng dạng canine của CD4 và CD8, được xác định bởi các kháng thể đơn dòng chuột CA13.1E4 (IgG1) và CA9.JD3 (IgG2a) được mô tả. Những kháng thể này xác định các phân nhóm tế bào lympho không B loại trừ lẫn nhau trong các cơ quan lympho ngoại biên và trong máu. Tuy nhiên, trong tuyến ức, các kháng thể xác định các quần thể tế bào dương tính kép, âm tính kép và dương tính đơn, cho thấy sự trưởng thành tiến triển nhất quán với những gì đã mô tả cho CD4 và CD8 ở các loài động vật có vú khác. Hơn nữa, các nghiên cứu chức năng đã liên kết rõ ràng chức năng tế bào hiệu ứng cytotoxic với phân nhóm phản ứng với CA9.JD3 (CD8). Ngược lại, sự tăng sinh kích thích bởi các tế bào đồng loài và các mitogen có phần nổi bật hơn ở phân nhóm phản ứng với CA13.1E4 (CD4). Các nghiên cứu phân bố tế bào và mô cho thấy CA13.1E4 đã nhuộm bạch cầu trung tính với cường độ tương đương với sự nhuộm của các tế bào T ngoại biên. CA13.1E4 kết tủa một protein 60 kD từ bề mặt của các tế bào T và bạch cầu trung tính được tinh chế cao dưới cả hai điều kiện khử và không khử. CA9.JD3 đã kết tủa một heterodimer 32 kd và 36 kD dưới điều kiện khử, và một protein 70 kD dưới điều kiện không khử. Việc biểu hiện CD4 bởi các bạch cầu trung tính chó là điều chưa từng có ở các loài động vật có vú khác; ý nghĩa chức năng của việc biểu hiện CD4 của bạch cầu trung tính còn nhiều điều đáng ngạc nhiên trong bối cảnh hiểu biết hiện tại về các chức năng của CD4, bao gồm vai trò của nó như một thụ thể cho các vùng không đa hình của các phân tử MHC lớp II.

Chúng tôi đã cập nhật danh mục các alen kháng nguyên bạch cầu người (HLA) thông thường và đã được tài liệu hóa (CWD) để phản ánh hiểu biết hiện tại về sự phổ biến của các trình tự alen cụ thể. Danh mục CWD ban đầu đã chỉ định 721 alen tại các locus HLA‐A, ‐B, ‐C, ‐DRB1, ‐DRB3/4/5, ‐DQA1, ‐DQB1, và ‐DPB1 trong dữ liệu IMGT (IMmunoGeneTics)/HLA phát hành 2.15.0 là những alen CWD. Danh mục CWD đã được cập nhật chỉ định 1122 alen tại các locus HLA‐A, ‐B, ‐C, ‐DRB1, ‐DRB3/4/5, ‐DQA1, ‐DQB1, ‐DPA1 và ‐DPB1 là những alen CWD, đại diện cho 14.3% các alen HLA trong dữ liệu IMGT/HLA phát hành 3.9.0. Đặc biệt, chúng tôi đã xác định 415 trong số các alen này là 'thông thường' (có tần suất đã biết) và 707 là 'đã được tài liệu hóa' dựa trên ~140,000 quan sát định danh theo trình tự và dữ liệu haplotype HLA có sẵn. Sử dụng các dữ liệu về sự phổ biến alen này, chúng tôi cũng đã chỉ định trạng thái CWD cho các ký hiệu G và P cụ thể. Chúng tôi đã xác định 147/151 nhóm G và 290/415 nhóm P là CWD. Danh mục CWD sẽ được cập nhật thường xuyên trong tương lai, và sẽ kết hợp các thay đổi từ dữ liệu IMGT/HLA cũng như dữ liệu thực nghiệm từ cộng đồng tương thích miễn dịch và miễn dịch học. Phiên bản 2.0.0 của danh mục CWD hiện có thể truy cập trực tuyến tại cwd.immunogenomics.org, và sẽ được tích hợp vào cơ sở dữ liệu Tần suất Alen, cơ sở dữ liệu IMGT/HLA và các trang web thông tin sinh học của Chương trình Tặng Tủy Xương Quốc Gia.

Tóm tắt: Bệnh Behçet (BD) được biết đến có sự liên quan với kháng nguyên leucocyte người (HLA) B51 ở nhiều nhóm sắc tộc khác nhau. Một tỷ lệ gia tăng HLA-B51 trong nhóm bệnh nhân cũng đã được báo cáo trong dân số Nhật Bản. Gần đây, kháng nguyên B51 đã được xác định gồm có 21 allele, từ B*5101 đến B*5121. Hơn nữa, không chỉ HLA-B*5101 mà còn HLA-B*5108 cũng được tìm thấy có sự gia tăng tương đối trong các nhóm bệnh nhân ở các dân tộc Ý và Ả Rập Saudi. Vì vậy, chúng tôi đã thực hiện phân loại gen HLA-B*51 allele bằng phương pháp loại hình dựa trên chuỗi polymerase (PCR‐SBT) để điều tra xem có sự liên quan nào giữa một allele B51 cụ thể với bệnh BD ở Nhật Bản hay không. Chín mươi sáu bệnh nhân Nhật Bản mắc BD và 132 tình nguyện viên Nhật Bản khỏe mạnh đã được tham gia vào nghiên cứu này. Kết quả cho thấy tần suất kiểu hình của kháng nguyên B51 được xác nhận là tăng đáng kể trong nhóm bệnh nhân so với nhóm đối chứng tương ứng về dân tộc (59,4% ở bệnh nhân so với 13,6% ở đối chứng; Pc=0.0000000000098, R.R.=9.3). Trong phân loại allele B*51, 56 trong tổng số 57 bệnh nhân dương tính với B51 được xác định là B*5101 và một người còn lại là B*5102. Ngược lại, tất cả 18 đối chứng bình thường dương tính với B51 đều là B*5101. Không có bệnh nhân Nhật Bản và đối chứng khỏe mạnh nào mang allele HLA-B*5108. Nghiên cứu này đã chỉ ra rằng phân bố allele B*51 ở Nhật Bản khác biệt so với các dân tộc Ý và Ả Rập Saudi, và tỷ lệ cao của kháng nguyên HLA-B51 trong nhóm bệnh nhân BD Nhật Bản chủ yếu là do sự gia tăng đáng kể của allele HLA-B*5101.

Tóm tắt: Bệnh đa xơ cứng (MS) đã được biết đến từ những năm 1970 có liên quan đến các đặc điểm HLA-Dw2 và -DR2 ở người châu Âu da trắng và Bắc Mỹ. Bằng việc sử dụng các kỹ thuật phân loại genom, liên kết này đã được xác định là thuộc về DRwlS,DQw6,Dw2, tức là haplotype DRBI*1501-DQAI*0102-DQBl*0602. Một báo cáo đã mô tả sự liên kết DPw4 đáng kể ở bệnh nhân MS Scandinavi. Tuy nhiên, sự liên kết này chưa được xác nhận trong nhiều nghiên cứu tiếp theo với bệnh nhân từ cùng một nhóm sắc tộc và các nhóm khác. Trong vài năm qua, nhiều báo cáo, dựa trên dữ liệu huyết thanh, RFLP và PCR-SSO, đã gợi ý rằng các gen nhạy cảm với MS liên quan đến HLA lớp II có thể liên quan chặt chẽ hơn với DQ hơn là khu vực DR. Các quan sát cho thấy các gen HLA-DQBI của bệnh nhân MS chia sẻ các chuỗi dài các động thái trình tự và cũng mang các alen DQA1 mã hóa glutamine ở vị trí 34 của chuỗi α DQ đã nhận được sự quan tâm đáng kể. Có giả thuyết rằng tính nhạy cảm phát triển MS có thể được xác định bởi các heterodimer DQ α-β tương ứng được mã hóa trong cis hoặc trong trans. Chúng tôi đã điều tra các vấn đề này trong một nhóm lớn các bệnh nhân MS Thụy Điển (n=179). Chúng tôi phát hiện rằng các mối liên hệ với các trình tự DQBI được đề xuất và vị trí 34 của chuỗi α DQ là do sự mất cân bằng liên kết và thứ yếu là do mối liên kết với haplotype DRw15,DQw6,Dw2 (p < 10-⁹ và p < 10-⁸, tương ứng). Không có sự quá đại diện của các heterodimer DQ α-β liên quan được quan sát ở bệnh nhân âm tính với DRw1S,DQw6,Dw2. Chúng tôi kết luận rằng dữ liệu hiện có không cho phép xác định vị trí của các gen nhạy cảm với MS liên quan đến HLA lớp II trong haplotype DRw15,DQw6,Dw2. Chúng tôi đã mô tả trước đó những khác biệt miễn dịch di truyền giữa các hình thức lâm sàng khác nhau của MS. Trong nghiên cứu hiện tại về một nhóm bệnh nhân MS mới so với một bảng kiểm soát mới, những khác biệt này đã được xác nhận một phần. Mối liên kết DRw17,DQw2 trong bệnh MS tái phát/tái phát đã được khẳng định. Tuy nhiên, ở bệnh nhân mắc bệnh MS tiến triển mãn tính chủ yếu, một mối liên kết tiêu cực với alen DQw7 đã không được xác thực và một mối liên kết tích cực với haplotype DR4.DQw8 cũng không thể được xác nhận hay bác bỏ.

Tóm tắt: Bệnh đa xơ cứng (MS) là một bệnh viêm thoái hóa myelin của hệ thần kinh trung ương với các đặc điểm tổn thương, tiến triển và nền tảng di truyền khác nhau. Trong nghiên cứu này, chúng tôi xác định xem các biến thể di truyền của thụ thể giống Toll 4 (TLR4), điều này có thể gây ra sự khác biệt đáng kể trong tình trạng viêm do lipopolysaccharide do vi khuẩn gây ra, có liên quan đến sự phát triển của MS hay không. Chúng tôi không nhận thấy sự khác biệt nào trong tần suất của các polimorphism TLR4 Asp299Gly và Thr399Ile đồng phân bố giữa các bệnh nhân MS người Áo (11.6%) và nhóm đối chứng cùng độ tuổi (13.7%). Hơn nữa, chúng tôi không thể phát hiện bất kỳ ảnh hưởng nào của những đột biến này đến các thông số lâm sàng và nồng độ serum của các phân tử kết dính hòa tan ở bệnh nhân MS. Dữ liệu của chúng tôi chỉ ra rằng các polimorphism TLR4 này không có ảnh hưởng đến tần suất, sự tiến triển và các thông số viêm của MS.