Experimental Hematology & Oncology

Đánh giá hiệu quả của liệu pháp tế bào giết tế bào do cytokine (CIK) trong điều trị ung thư biểu mô tế bào gan.

Các thử nghiệm ngẫu nhiên pha II và III về liệu pháp dựa trên tế bào CIK đã được xác định thông qua tìm kiếm điện tử với sự kết hợp của các từ khóa "ung thư biểu mô tế bào gan" và "tế bào giết tế bào do cytokine".

Phân tích cho thấy lợi ích sống sót đáng kể (tỉ lệ sống một năm, p < 0.001; tỉ lệ sống hai năm, p < 0.001; tỉ lệ sống trung bình, p < 0.001) ủng hộ cho liệu pháp dựa trên CIK. So sánh nhóm CIK với nhóm không CIK cho thấy thời gian sống không bệnh kéo dài đáng kể (PFS) (p < 0.01). Tỉ lệ kiểm soát bệnh (DCR) và tỉ lệ đáp ứng tổng thể (ORR) cũng được quan sát thấy cao hơn ở những bệnh nhân nhận liệu pháp tế bào CIK (p < 0.01). Trong khi đó, bệnh nhân trong nhóm CIK cho thấy chất lượng cuộc sống (QoL) tốt hơn, giảm nồng độ DNA virus viêm gan B (HBV-DNA) và mức AFP (p < 0.01). So sánh các phân nhóm tế bào T trong máu ngoại vi, phân tích cho thấy tỉ lệ các tế bào T CD3⁺, CD4⁺, CD4⁺CD8⁺ và CD3⁺CD4⁺ tăng đáng kể ở nhóm CIK, so với nhóm không CIK (p < 0.01).

Liệu pháp tế bào CIK cho thấy sự vượt trội đáng kể trong việc kéo dài tỉ lệ sống trung bình, PFS, DCR, ORR và QoL của bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan. Những kết quả này khuyến khích thực hiện các thử nghiệm ngẫu nhiên kiểm soát quy mô lớn hơn cho các bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào gan có hoặc không phối hợp với các phương pháp điều trị khác.

Chỉnh sửa N⁶-methyladenosine (m⁶A), là dạng chỉnh sửa RNA phong phú nhất, tham gia rộng rãi vào các quá trình sinh lý và liên quan đến sự tiến triển của nhiều loại bệnh, đặc biệt là ung thư. Protein gắn RNA YTH N6-methyladenosine 1 (YTHDF1) là một protein “đọc” m⁶A quan trọng, đã được báo cáo trong nhiều loại ung thư. Tuy nhiên, vai trò và cơ chế phân tử của YTHDF1 trong ung thư biểu mô gan (HCC) vẫn chưa được làm sáng tỏ hoàn toàn.

Dựa trên các cơ sở dữ liệu bioinformatics khác nhau, q-RT PCR, blot miền và một hồ sơ vi mô mô chứa 90 mẫu HCC, chúng tôi đã kiểm tra sự biểu hiện của YTHDF1 trong HCC. Sau đó, chúng tôi đã áp dụng các thí nghiệm mất chức năng để khám phá vai trò của YTHDF1 trong HCC thông qua các thí nghiệm trong ống nghiệm và trong cơ thể. Cuối cùng, chúng tôi tiến hành phân tích làm giàu tập hợp gen (GSEA) để dự đoán con đường tín hiệu tiềm ẩn của YTHDF1 liên quan đến HCC và xác minh dự đoán này.

YTHDF1 đã được biểu hiện cao trong HCC và có mối liên hệ với độ ác tính của HCC. Việc loại bỏ YTHDF1 đã làm suy yếu rõ rệt quá trình sinh sản, di cư, xâm lấn và chu kỳ tế bào của các tế bào HCC. Về mặt cơ chế, YTHDF1 thúc đẩy sự phát triển của các tế bào HCC thông qua việc kích hoạt con đường tín hiệu PI3K/AKT/mTOR. Hơn nữa, chúng tôi cũng đã chứng minh rằng quá trình chuyển đổi biểu mô - trung mô (EMT) đã làm trung gian hiệu ứng thúc đẩy của YTHDF1 đối với sự di cư và xâm lấn của các tế bào HCC.

YTHDF1 góp phần vào sự tiến triển của HCC bằng cách kích hoạt con đường tín hiệu PI3K/AKT/mTOR và gây ra EMT.

Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tóm tắt lại những khác biệt về đột biến gen phân tử giữa bệnh nhân MDS và AML, cũng như giữa các nhóm tuổi trẻ và cao tuổi của bệnh nhân MDS và AML. Chúng tôi cũng đã phân tích phản ứng của bệnh nhân AML được chẩn đoán mới với hóa trị liệu khởi đầu chuẩn DA hoặc IA và mối liên hệ giữa kết quả hóa trị liệu và tần suất của các bất thường về đột biến gen khác nhau.

Mẫu xét nghiệm NGS bao gồm 43 gen đã được nghiên cứu trên 93 bệnh nhân MDS de novo và 325 bệnh nhân AML không phải M3. Mẫu tủy xương của tất cả bệnh nhân đã trải qua phân tích đột biến gen bằng NGS.

Ít nhất một đột biến gen không đồng nghĩa đã được phát hiện ở 279 bệnh nhân AML (85.8%) và 85 bệnh nhân MDS (91.4%). Trái ngược với các bệnh nhân AML dưới 59 tuổi, có một tỉ lệ đột biến gen cao hơn đáng kể ở bệnh nhân AML từ 60 tuổi trở lên (2.37 so với 1.94, p = 0.034). Tần suất đột biến gen ở bệnh nhân MDS từ 60 tuổi trở lên tăng lên, nhưng không có ý nghĩa thống kê (1.95 so với 1.64, p = 0.216). Bệnh nhân AML có tần suất đột biến gen cao hơn đáng kể so với bệnh nhân MDS-MLD (2.02 so với 1.63, p = 0.046). Tần suất đột biến gen cao hơn ở bệnh nhân mắc MDS-EB1/EB2 so với bệnh nhân MDS-MLD nhưng không có ý nghĩa thống kê (2.14 so với 1.63, p = 0.081). Bệnh nhân AML có tỉ lệ đột biến gen CEBPA, FLT3-ITD, DNMT3A, NPM1 và IDH1/2 cao hơn đáng kể (p = 0.0043, 0.000, 0.030962, 0.002752 và 0.000628, tương ứng) và tỉ lệ đột biến gen TET2 và U2AF1 thấp hơn đáng kể (p = 0.000004 và 0.000, tương ứng) so với bệnh nhân MDS. Trong số các gen cá nhân ở các nhóm tuổi khác nhau, có tỉ lệ đột biến gen RUNX1, IDH2, TP53 và SF3B1 cao hơn đáng kể (p = 0.0478, 0.0028, 0.0024 và 0.005, tương ứng) cũng như có xu hướng cao hơn về đột biến gen ASXL (p = 0.057) ở bệnh nhân AML từ 60 tuổi trở lên so với bệnh nhân dưới 59 tuổi. Không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê ở bệnh nhân MDS giữa các nhóm tuổi khác nhau và giữa các gen cá nhân. Giữa bệnh nhân AML và bệnh nhân MDS ở các nhóm gen chức năng khác nhau, bệnh nhân AML có tỉ lệ đột biến gen vô hiệu hóa điều hòa phiên mã cao hơn đáng kể (27.4% so với 15.1%, p = 0.014963), đột biến gen liên quan đến tín hiệu đã kích hoạt (36.3% so với 10.8%, p = 0.000002) cũng như có tỉ lệ đột biến gen liên quan đến RNA spliceosome thấp hơn đáng kể (6.15% so với 60.1%, p = 0.000). Hơn nữa, giữa các bệnh nhân nhận được chế độ IA hoặc DA cho hóa trị liệu khởi đầu, bệnh nhân nhận chế độ IA có tỉ lệ CR tốt hơn đáng kể so với những người nhận chế độ DA (76.6% so với 57.1%, p = 0.0228).

Các đột biến gen khác nhau đã được tìm thấy ở phần lớn bệnh nhân MDS và AML. Bệnh nhân MDS và AML có các mẫu đột biến gen khác nhau. Bệnh nhân AML có ít hoặc không có đột biến gen có khả năng đạt được CR tốt hơn khi được điều trị bằng hóa trị liệu khởi đầu với chế độ IA và DA.

Sự xâm nhập của tế bào miễn dịch vào vi môi trường khối u (TME) ảnh hưởng đến sự khởi phát của khối u, tiên lượng của bệnh nhân và các chiến lược điều trị miễn dịch. Tuy nhiên, những vai trò và tương tác của chúng với các quá trình di truyền và phân tử trong ung thư tế bào gan (HCC) vẫn chưa được đánh giá một cách hệ thống.

Chúng tôi đã thực hiện phân nhóm không giám sát trên tổng số 1000 mẫu HCC, bao gồm nhóm phát hiện và nhóm xác thực từ các bộ dữ liệu công khai có sẵn. Đặc tính miễn dịch của từng phân nhóm đã được khám phá bằng phân tích đa chiều. Một mô hình máy vector hỗ trợ (SVM) dựa trên các dấu hiệu đa ôm đã được huấn luyện và kiểm tra. Cuối cùng, chúng tôi thực hiện nhuộm miễn dịch để xác minh vai trò miễn dịch của các dấu hiệu.

Chúng tôi đã xác định ba phân loại miễn dịch trong HCC, với các đặc điểm lâm sàng, phân tử và di truyền đa dạng. Cụm 1 có tiên lượng xấu hơn, đặc tính chống khối u tốt hơn và điểm miễn dịch cao nhất, nhưng cũng đi kèm với ức chế miễn dịch và rối loạn chức năng tế bào T. Trong khi đó, phản ứng điều trị miễn dịch chống PD1/CTLA4 tốt hơn đã được dự đoán trong cụm 1. Cụm 2 giàu tế bào TAM-M2 và tế bào mô đệm, cho thấy sự ức chế miễn dịch. Cụm 3, với tiên lượng tốt hơn, có số lượng tế bào T CD8 thấp nhất nhưng số lượng tế bào nghỉ ngơi miễn dịch cao nhất. Hơn nữa, dựa trên các dấu hiệu di truyền, chúng tôi đã phát triển một bộ phân loại SVM để xác định trạng thái miễn dịch của bệnh nhân, được chia thành loại A và loại B, trong đó loại A có tiên lượng kém hơn, chức năng tế bào T cao hơn mặc dù có sự xâm nhập tế bào T cao hơn, và có phản ứng điều trị miễn dịch tốt hơn. Đồng thời, MMP9 có thể là một dự đoán trước tiềm năng về các đặc điểm miễn dịch và phản ứng điều trị miễn dịch trong HCC.

Công trình của chúng tôi đã chứng minh ba cụm miễn dịch với các đặc điểm khác nhau. Quan trọng hơn, các dấu hiệu đa ôm, như MMP9, đã được xác định dựa trên ba cụm để giúp chúng tôi nhận diện bệnh nhân với tiên lượng và phản ứng điều trị miễn dịch khác nhau trong HCC. Nghiên cứu này có thể tiết lộ trạng thái miễn dịch của HCC và cung cấp các dự đoán trước tiềm năng cho phản ứng điều trị bằng điểm kiểm soát miễn dịch.