European Journal of Haematology

The physiology of B cells is intimately connected with the function of their B‐cell receptor (BCR). B‐cell lymphomas frequently (dys)regulate BCR signalling and thus take advantage of this pre‐existing pathway for B‐cell proliferation and survival. This has recently been underscored by clinical trials demonstrating that small molecules (fosfamatinib, ibrutinib, idelalisib) inhibiting BCR‐associated kinases (SYK, BTK, PI3K) have an encouraging clinical effect. Here we describe the current knowledge of the specific aspects of BCR signalling in diffuse large B‐cell lymphoma (DLBCL), follicular lymphoma, chronic lymphocytic leukaemia (CLL) and normal B cells. Multiple factors can contribute to BCR pathway (dys)regulation in these malignancies and the activation of ‘chronic’ or ‘tonic’ BCR signalling. In lymphoma B cells, the balance of initiation, amplitude and duration of BCR activation can be influenced by a specific immunoglobulin structure, the expression and mutations of adaptor molecules (like GAB1, BLNK, GRB2, CARD11), the activity of kinases (like LYN, SYK, PI3K) or phosphatases (like SHIP‐1, SHP‐1 and PTEN) and levels of microRNAs. We also discuss the crosstalk of BCR with other signalling pathways (NF‐κB, adhesion through integrins, migration and chemokine signalling) to emphasise that the ‘BCR inhibitors’ target multiple pathways interconnected with BCR, which might explain some of their clinical activity.

Mục tiêu:  Thiếu máu do thiếu sắt (IDA) và đặc điểm beta-thalassemia (B-TT) là nguyên nhân phổ biến nhất gây ra các dạng thiếu máu vi nhược sắc. Nhiều chỉ số đã được xác định để phân biệt nhanh chóng những thực thể tương tự này thông qua các thông số thu được từ máy phân tích công thức máu tự động. Mục đích của nghiên cứu là đánh giá giá trị tiên đoán của những chỉ số này trong chẩn đoán phân biệt IDA và B-TT ở các trường hợp người lớn.

Phương pháp:  Nghiên cứu bao gồm 45 trường hợp IDA, 36 phụ nữ và 9 nam giới, với độ tuổi trung bình là 33.87 ± 11.59 (trung bình ± SD) (phạm vi 17–57 tuổi) và 66 trường hợp B-TT, 41 phụ nữ và 25 nam giới, với độ tuổi trung bình là 33.26 ± 13.36 (trung bình ± SD) (phạm vi 14–74 tuổi). Những trường hợp IDA có giá trị Hb <8.7 g/dL đã bị loại trừ vì những trường hợp này không gây nhầm lẫn với các trường hợp B-TT trong thực tế. Các nhóm bệnh nhân đã được đánh giá dựa trên số lượng tế bào máu đỏ (RBC), độ rộng phân bố tế bào máu đỏ (RDW), chỉ số Mentzer, các chỉ số Shine và Lal, chỉ số England và Fraser, chỉ số Srivastava, chỉ số Green và King, chỉ số RDW và chỉ số Ricerca. Độ nhạy, độ đặc hiệu, giá trị tiên đoán dương và âm, và chỉ số Youden đã được tính toán.

Kết quả:  Cuối cùng, không có bất kỳ một trong những công thức phân biệt này nào mạnh hơn giá trị RBC thu được từ các máy phân tích tự động trong các trường hợp người lớn bị IDA và B-TT.

Kết luận:  Tình trạng sắt toàn cơ thể và mức hemoglobin A₂ nên được thu thập để có chẩn đoán phân biệt chính xác giữa IDA và B-TT cho đến khi có các công cụ hiệu quả hơn phát triển.

Abstract: Peripheral blood lymphocytes of healthy volunteers cultured with phytohaemagglutinin in folate‐deficient medium exhibit megaloblastic maturation with reduced intracellular folate content. We have employed this in vitro model for megaloblastic maturation to determine accompanying changes in cellular thymidylate cycle activities and deoxynucleotide levels. Folate‐deficient cells exhibit a two‐fold increase in thymidine kinase and thymidylate synthase activities. These increased activities were reduced to those of folate‐replete cells by co‐culture of folate‐deficient cells with thymidine. Folate deficiency was accompanied by reduced cellular levels of thymidine triphosphate (TTP) and deoxyguanosine triphosphate (dGTP). Exogenous deoxyuridine produced no increase in the reduced levels of TTP of folate‐deficient cells but effected a two‐fold increase in cellular deoxycytidine triphosphate. Exogenous thymidine increased the reduced TTP levels of folate‐deficient cells and corrected the reduced dGTP level; the increase in cellular TTP accompanying exogenous thymidine was more pronounced in folate‐deficient cells. These in vitro findings are compatible with a block in de novo thymidylate synthesis and explain in part the reported in vivo changes for the deoxynucleotide pool in megaloblastic marrow cells due to folate or vitamin B12 deficiency.

Abstract: The myelodysplastic syndromes (MDS) have attracted great interest during the last decade. Unfortunately there is not much material published concerning the incidence of these conditions. We present epidemiologic data on MDS based on case registration of patients in a well‐defined population and as a comparison similar data on acute myeloid leukaemia (AML). Between the years 1978–1992 we registered 120 cases of MDS and 146 cases of AML. The median age for all the MDS cases was 74.1 years for men and 78.2 years for women. Among haematologists there is a suspicion that the incidence of MDS is rising. Our study does not support this opinion. We have divided the study period into 5‐year periods and the crude incidence has been 3.2, 4.1 and 3.5/100 000/year for each period. In the age group over 70 years MDS was more frequent than AML and in the last 5‐year period the incidence was 15.0/100 000/year for MDS compared to 10.2/100 000/year for AML. In conclusion MDS is quite common among elderly people and there is no evidence for a rising incidence during the last 15 years.

Abstract:  A case of type II recessive congenital methaemoglobinaemia (RCM) observed in a Lebanese subject with a novel mutation in NADH‐cytochrome b5 reductase gene is described. A homozygous mutation CAC to AA identified at Thr 295 with an out‐of‐frame 1‐bp deletion leads to a frameshift with translational read‐through of the natural stop codon. The molecular mechanism is demonstrated by an in vitro translation study. The model of mutated cytochrome b5 reductase protein possessing 46 additional amino acids was obtained by homology modelling. The mutation causes an alteration of hydrophobicity in the carboxyl‐terminal portion, resulting in the conformation being drastically disturbed by the presence of 46 supplementary amino acids. The identical mutation was found in the heterozygous state in the patient's parents and sister. Identification of this new mutation enabled us to perform the molecular prenatal diagnosis of type II RCM at the DNA level.

A case of type I methaemoglobinaemia observed in a Polish subject with compound heterozygosity for two mutations in the reduced nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) cytochrome b5 reductase (b5R) gene is described. One is a novel mutation 647T→C which leads to substitution of isoleucine by threonine at position 215 (I215T). This maternal mutation was found in several family members. A previously known mutation, 757G→A, leads to the replacement of valine by methionine at position 252 (V252M). The latter mutation was found also in the father and one of the two brothers. The effects of these mutations were analysed on a model of the human b5R protein obtained by homology modelling. Although both amino acid substitutions are located in the NADH‐binding domain, the whole protein structure, especially the region between the flavin adenine dinucleotide and NADH‐binding domains, is disturbed. The structural changes in the I215T mutant are less prominent than those in the V252M mutant. We presume that the 647T→C mutation is a type I mutation, however, it has not been observed in the homozygous state.

Abstract:  The permeability of red blood cells (RBCs) to thiol containing compounds, reduced glutathione (GSH) and N‐acetyl cysteine (NAC), has been studied in control adult and neonatal cells and after oxidative stress. NAC penetrates the cell membrane easily while GSH hardly permeates. We measured their capacity to enhance intracellular non‐protein thiols (NPSH), after inducing damage to the membrane by formation of defects. Diamide, phenazine methosulfate (PMS) and t‐butyl hydroperoxide (BHP) were chosen as exogenous oxidants, each inducing damage by a different mechanism. Our data indicate that although neonatal cells are more sensitive to oxidative stress, only membrane damage induced by diamide, renders adult and neonatal cells permeable to GSH. NAC treatment enhances thiol levels in cells exposed to oxidizing agents, as well as in control cells.

We examined the incidence and prognostic effect of IDH1 and IDH2 mutations in 233 Japanese adults with acute myeloid leukemia (AML). IDH1 R132 mutations were detected in 20 (8.6%) patients with AML. IDH2 mutations were found in 19 (8.2%, 17 R140 and two R172) patients. IDH1 and IDH2 mutations were mutually exclusive and were associated with normal karyotype AML, cytogenetic intermediate‐risk group, and NPM1 mutations. Five‐year overall survival (OS) rates were significantly lower (15.6%) in patients harboring the IDH mutations than in patients lacking the IDH mutation (32.0%) in the entire cohort of AML (P = 0.005). Among patients aged 59 yr or younger with IDH mutations, 5‐yr OS in patients who underwent allogeneic stem cell transplantation (SCT) was significantly higher than that in those not receiving allogeneic SCT (50% vs. 10.6%, P = 0.020). Of 51 patients with NPM1 mutations, there was no significant difference in 5‐yr OS rates between patients with and those without the IDH mutations. In contrast, among 175 patients lacking the NPM1 mutations, 5‐yr OS rate in patients with IDH mutations was significantly lower than that in those without IDH mutations (0% vs. 34.7%, P = <0.001). These data suggest that IDH mutations have an unfavorable effect in AML, especially AML with the NPM1 wild type and younger AML patients with IDH mutations may benefit from allogeneic SCT.

Tóm tắt:  Mục tiêu: Đánh giá tình trạng tim mạch ở một nhóm lớn bệnh nhân thalassemia nặng đã được điều trị theo cách tiêu chuẩn từ khi còn nhỏ với liệu pháp truyền máu tích cực và chelat deferoxamine, những người có tuân thủ tốt phác đồ điều trị này. Phương pháp và Kết quả: Chúng tôi đã tiến hành đánh giá lâm sàng và siêu âm tim cho 202 bệnh nhân thalassemia nặng tuổi trung bình 27,3 ± 6,3 năm và 75 đối chứng khỏe mạnh cùng tuổi và giới tính. Bệnh tim mạch biểu hiện rõ đã được phát hiện ở 14 bệnh nhân (6,9%), trong đó có 5 bệnh nhân (2,5%) bị suy tim sung huyết, tuổi từ 26–37 năm, và 9 bệnh nhân bị rối loạn chức năng tâm thu thất trái (LV), tuổi từ 23–37 năm. Mười bệnh nhân (5,0%) có tiền sử viêm màng ngoài tim. Đường kính tâm nhĩ trái và LV, khối lượng LV và lưu lượng tim đều cao hơn đáng kể ở bệnh nhân so với các đối chứng, trong khi kháng lực ngoại vi và gánh nặng thất trái (afterload) thấp hơn đáng kể. Độ dày thành LV tương đối không khác nhau giữa bệnh nhân và đối chứng, nhưng giảm đáng kể ở các bệnh nhân có bệnh tim mạch biểu hiện rõ so với những người không có (P < 0,05). Sự lấp đầy LV có tính hạn chế được quan sát thấy ở 37,6% bệnh nhân và thường gặp hơn ở những trường hợp có bệnh tim mạch biểu hiện rõ (P < 0,01). Tăng huyết áp phổi hầu như không có. Các thông số huyết học và mức áp lực động mạch phổi không có liên quan độc lập với sự hiện diện của bệnh tim mạch biểu hiện rõ. Kết luận: Tuân thủ nghiêm ngặt phác đồ truyền máu và liệu pháp deferoxamine suốt đời đáng kể giúp giảm nguy cơ suy tim, rối loạn chức năng LV và viêm màng ngoài tim, ngăn ngừa suy tim sớm và tăng huyết áp phổi, nhưng không loại bỏ hoàn toàn bệnh tim mạch ở bệnh nhân thalassemia nặng.