Quá trình chuyển gen của tác nhân gây bệnh oomycete Phytophthora megasperma f. sp. glycinea xảy ra thông qua việc tích hợp DNA vào một hoặc nhiều nhiễm sắc thể

Current Genetics - Tập 23 - Trang 211-218 - 1993
Howard S. Judelson1, Michael D. Coffey2, Felipe R. Arredondo3, Brett M. Tyler3
1Department of Vegetable Crops, University of California, Davis, USA
2Department of Plant Pathology, University of California, Riverside, USA
3Department of Plant Pathology, University of California, Davis USA

Tóm tắt

Một quy trình để chuyển gen ổn định đã được phát triển cho Phytophthora megasperma f. sp. glycinea, một tác nhân gây bệnh oomycete của đậu nành. Các dòng biến dị đã được thu nhận bằng cách sử dụng gen kháng hygromycin từ vi khuẩn kết hợp với một promoter và một terminator từ gen ham34 của một oomycete khác, Bremia lactucae. DNA vector, được sử dụng độc lập hoặc kết hợp với liposome cationic, đã được đưa vào protoplast bằng polyethylene glycol và CaCl2. Các phép thử lai DNA và RNA, cùng với các thử nghiệm phosphotransferase, đã xác nhận sự hiện diện và biểu hiện của DNA vector trong các dòng biến dị. Thử nghiệm lai với các nhiễm sắc thể của P. m. glycinea được tách biệt bằng điện cho thấy DNA vector đã tích hợp vào chỉ một nhiễm sắc thể trong bốn dòng biến dị, và vào nhiều nhiễm sắc thể trong một dòng biến dị.

Từ khóa

#Phytophthora megasperma #biến đổi gen #nhiễm sắc thể #đậu nành #oomycete #kháng thuốc.

Tài liệu tham khảo

Bailey AM, Mena GL, Herrera-Estrella L (1991) Nucleic Acids Res 19:4273–4278 Buzzel RI, Anderson TR, Rennie BD (1987) Soybean Genet Newslett 14:79–81 Casselton LA, de la Fuente Herce A (1989) Curr Genet 16:35–40 Chu G, Vollrath D, Davis RW (1986) Science 234:1582–1585 Fincham JRS (1989) Microbiol Rev 53:148–170 Flor HH (1956) Adv Genet 8:29–54 Folger KR, Thomas K, Capecchi MR (1985) Mol Cell Biol 5:59–69 Förster H, Coffey MD, Elwook H, Sogin ML (1990) Mycologia 82:306–312 Judelson HS, Michelmore RW (1991) Curr Genet 19:453–459 Judelson HS, Tyler BM, Michelmore RW (1992) Mol Plant-Microbe Int 4:602–607 Judelson HS, Tyler BM, Michelmore RW (1992) Mol Gen Genet 234:138–146 Layton AC, Kuhn DN (1988 a) Exp Mycol 12:180–194 Layton AC, Kuhn DN (1988 b) Phytopatholgy 78:961–966 Mao Y, Tyler BM (1991) Exp Mycol 15:283–291 Mohr G (1989) Appl Microbiol Biotechnol 30:371–374 Morris PF, Savard ME, Ward EWB (1991) Phys Mol Plant Pathol 39:229–244 Orr-Weaver TL, Szostak JW, Rothstein RJ (1981) Proc Natl Acad Sci USA 78:6354–6358 Parsons KA, Chumley FG, Valent B (1987) Proc Natl Acad Sci USA 84:4161–4165 Raeder U, Broda P (1985) Lett Appl Microbiol 1:1–17 Rambosek JA, Leach J (1987) CRC Crit Rev Biotechnol 6:357–393 Ribeiro OK (1978) A source book of the genus Phytophthora. J. Cramer, West Germany Sansome E, Brasier CM (1974) Trans Br Mycol Soc 63:641–467 Schmitthenner AF (1985) Plant Dis 69:362–368 Tsukuda T, Carleton S, Fotheringham S, Holloman WK (1988) Mol Cell Biol 8:3703–3709 Tyler BM, Geever RF, Case ME, Giles NH (1984) 36:493–502 Vollmer SJ, Yanofsky C (1986) Proc Natl Acad Sci USA 83:4869–4873 Wang J, Holden DW, Leong SA (1988) Proc Natl Acad Sci USA 85:865–869 Wernars K, Goosen T, Wennekes BMJ, Swart K, van den Hondel CAMJJ, van den Broek HWJ (1987) Mol Gen Genet 209:71–77 Whittaker RH (1969) Science 16:150–160 Yelton MM, Hamer JE, Timberlake WE (1984) Proc Natl Acad Sci USA 81:1470–1474