Đường truyền tín hiệu của thụ thể T-Cell có ảnh hưởng kiểm soát tiêu cực đối với sự gia tăng do thrombin gây ra trong [Ca2+]i và hoạt động của p38 MAPK trong các tế bào Jurkat T: Ý nghĩa của kinase tyrosine p56Lck

Blood - Tập 91 - Trang 4232-4241 - 1998
Laurence Maulon, Sandrine Guérin, Jean-Ehrland Ricci, Dariush FarahiFar, Jean-Philippe Breittmayer, Patrick Auberger

Tóm tắt

Mục tóm tắtViệc kích hoạt kinase mitogen-activated protein (Erk) và kinase terminal c-Jun là một cơ chế đã được chứng minh rõ ràng đối với các thụ thể xuyên màng bảy lần. Chúng tôi đã chỉ ra trước đó rằng sự kích thích của thrombin trên dòng tế bào leucemic T Jurkat đã gây ra sự gia tăng tạm thời trong [Ca2+]i và phosphoryl hóa tyrosine của một vài protein tế bào. Ở đây, chúng tôi đã phân tích hoạt động của tế bào p42-44 MAPK, JNK và p38 MAPK bằng cách sử dụng các dòng tế bào T Jurkat thiếu hụt either kinase tyrosine p56Lck (JCaM1) hoặc phosphatase tyrosine CD45 (J45.01). Kết quả của chúng tôi chứng minh rằng p56Lck và CD45 có sự điều khiển tiêu cực đối với sự kích hoạt p38 MAPK do thrombin gây ra và sự giải phóng [Ca2+]i trong các tế bào Jurkat. Sự biểu hiện thụ thể thrombin là giống nhau trên các dòng tế bào khác nhau như được đánh giá bằng phân tích FACS. Phosphoryl hóa tyrosine của p38 MAPK đã tăng đáng kể sau sự kích thích của thrombin trên các tế bào JCaM1 hoặc J45.01, so với các tế bào cha mẹ (JE6.1). Hoạt động của P42-44 MAPK và JNK cũng tăng lên sau điều trị với thrombin của các dòng tế bào JE6.1 và JCaM1, trong khi hoạt động kinase cơ bản đã cao hơn trong các tế bào J45.01 và không được kích thích thêm bởi thrombin. Việc giải phóng [Ca2+]i do thrombin và peptide hoạt hóa thụ thể thrombin gây ra đã song hành với việc kích hoạt p38 MAPK ở các tế bào JCaM1 và J45.01. Hơn nữa, việc tái cấu trúc các dòng tế bào J45.01 và JCaM1 với một trong hai CD45 hoặc Lck đi kèm với việc phục hồi phản ứng [Ca2+]i do thrombin gây ra và phosphoryl hóa p38MAPK bình thường. Dữ liệu này cho thấy rằng một thành phần của con đường tín hiệu thụ thể T-Cell có ảnh hưởng kiểm soát tiêu cực đối với các phản ứng do thrombin gây ra trong các tế bào T Jurkat. Theo đó, chúng tôi nhận thấy rằng thrombin đã làm tăng phosphoryl hóa tyrosine của p56Lck và giảm hoạt động kinase của p56Lck trong các tế bào J45.01. Kết quả của chúng tôi phù hợp với một vai trò tiêu cực của p56Lck đối với việc giải phóng [Ca2+]i và hoạt động của p38 MAPK do thrombin gây ra trong các dòng tế bào T Jurkat.

Từ khóa

#thrombin #kinase p56Lck #tế bào Jurkat #[Ca2+]i #p38 MAPK #thụ thể T-Cell

Tài liệu tham khảo

Mari, 1994, Thrombin and thrombin receptor agonist peptide induce early events of T cell activation and synergize with TCR cross-linking for CD69 expression and interleukin 2 production., J Biol Chem, 269, 8517, 10.1016/S0021-9258(17)37225-3 Mari, 1996, Thrombin and trypsin-induced Ca2+ mobilization in human T cell lines through interaction with different protease-activated receptors., FASEB J, 10, 309, 10.1096/fasebj.10.2.8641564 Magnaldo, 1988, Thrombin exerts a dual effect on stimulated adenylate cyclase in hamster fibroblasts, an inhibition via a GTP-binding protein and a potentiation via activation of protein kinase C., Biochem J, 253, 711, 10.1042/bj2530711 Hung, 1992, The cloned platelet thrombin receptor couples to at least two distinct effectors to stimulate phosphoinositide hydrolysis and inhibit adenyl cyclase., J Biol Chem, 267, 20831, 10.1016/S0021-9258(19)36762-6 Vu, 1991, Molecular cloning of a functional thrombin receptor reveals a novel proteolytic mechanism of receptor activation., Cell, 64, 1057, 10.1016/0092-8674(91)90261-V Vu, 1991, Domains specifying thrombin-receptor interaction., Nature, 353, 674, 10.1038/353674a0 Vouret-Craviari, 1992, Synthetic alpha-thrombin receptor peptides activate G protein-coupled signaling pathways but are unable to induce mitogenesis., Mol Biol Cell, 3, 95, 10.1091/mbc.3.1.95 Troyer, 1992, Stimulation of the thrombin receptor of human glomerular mesangial cells by Ser-Phe-Leu-Arg-Asn-Pro-Asn-Asp-Lys-Tyr-Glu-Pro-Phe peptide., J Biol Chem, 267, 20126, 10.1016/S0021-9258(19)88675-1 McNamara, 1993, Thrombin stimulates proliferation of cultured rat aortic smooth muscle cells by a proteolytically activated receptor., J Clin Invest, 91, 94, 10.1172/JCI116206 Tordai, 1993, Functional thrombin receptors on human T lymphoblastoid cells., J Immunol, 150, 4876, 10.4049/jimmunol.150.11.4876 Papkoff, 1994, p42mitogen-activated kinase and p90 ribosomal S6 kinase are selectively phosphorylated and activated during thrombin-induced platelet activation and aggregation., Mol Cell Biol, 14, 463, 10.1128/MCB.14.1.463 Vouret-Craviari, 1993, Differential activation of p44MAPK (ERK1) by alpha-thrombin and thrombin-receptor peptide agonist., Biochem J, 289, 209, 10.1042/bj2890209 Bhat, 1995, Thrombin activates mitogen-activated protein kinase in primary astrocyte cultures., J Cell Physiol, 165, 417, 10.1002/jcp.1041650223 Molloy, 1996, Thrombin receptor activation elicits rapid protein tyrosine phosphorylation and stimulation of the Raf-1/MAP Kinase pathway preceding delayed mitogenesis in cultured rat aortic muscle cells., J Clin Invest, 97, 1173, 10.1172/JCI118531 Boulton, 1990, An insulin-stimulated protein kinase similar to yeast kinases involved in cell cycle control., Science, 249, 64, 10.1126/science.2164259 Ray, 1988, Insulin-stimulated microtubule-associated protein kinase is phosphorylated on tyrosine and threonine in vivo., Proc Natl Acad Sci USA, 85, 3753, 10.1073/pnas.85.11.3753 Anderson, 1990, Requirement for integration of signals from two distinct phosphorylation pathways for activation of MAP Kinases., Nature, 343, 651, 10.1038/343651a0 Cadwallader, 1997, Differential regulation of extracellular signal-regulated protein kinase 1 and Jun N-terminal kinase 1 by Ca2+ and protein kinase C in endothelin-stimulated Rat-1 cells., Biochem J, 321, 795, 10.1042/bj3210795 Robinson, 1996, Characterization of Grb2-binding proteins in human platelets activated by FcγRIIA cross-linking., Blood, 88, 522, 10.1182/blood.V88.2.522.bloodjournal882522 Hawes, 1995, Distincts pathways of Gi-and Gq-mediated mitogen-activated protein kinase activation., J Biol Chem, 270, 17148, 10.1074/jbc.270.29.17148 Van Biesen, 1995, Receptor-tyrosine-kinase- and Gβγ-mediated MAP Kinase activation by a common signaling pathway., Nature, 376, 781, 10.1038/376781a0 Touhara, 1995, G protein βγ-subunits stimulate phosphorylation of Shc adapter protein., Proc Natl Acad Sci USA, 92, 9284, 10.1073/pnas.92.20.9284 Chen, 1994, Activation of src family kinase activity by G protein-coupled thrombin receptor in growth-responsive fibroblasts., J Biol Chem, 269, 27312 Chen, 1996, Shc adaptor proteins are key transducers of mitogenic signaling mediated by the G protein-coupled thrombin receptor., EMBO J, 15, 1037, 10.1002/j.1460-2075.1996.tb00441.x Buday, 1994, A complex of Grb2 adaptator protein, Sos exchange factor, and a 36 kDa membrane-bound tyrosine phosphoprotein is implicated in Ras activation in T cells., J Biol Chem, 269, 9019, 10.1016/S0021-9258(17)37070-9 Saklatvala, 1996, Role for p38 mitogen-activated protein kinase in platelet aggregation caused by collagen or a thromboxane analogue., J Biol Chem, 271, 6586, 10.1074/jbc.271.12.6586 Goldsmith, 1987, Isolation and characterisation of a T-lymphocyte somatic mutant with altered signal transduction by the antigen receptor., Proc Natl Acad Sci USA, 84, 6879, 10.1073/pnas.84.19.6879 Feng, 1995, Development of a potent thrombin receptor ligand., J Med Chem, 38, 4125, 10.1021/jm00020a029 Grynkiewiz, 1985, A new generation of Ca2+ indicators with greatly improved fluorescence properties., J Biol Chem, 260, 3440, 10.1016/S0021-9258(19)83641-4 Auberger, 1989, Chymotryptic type protease inhibitors block the increase in Ca2+ and IL2 production in activated Jurkat cells., J Immunol, 142, 289, 10.4049/jimmunol.142.4.1253 Mari, 1992, Jurkat T cells express a functional neutral endopeptidase activity (CALLA) involved in T cell activation., EMBO J, 11, 3875, 10.1002/j.1460-2075.1992.tb05480.x Kramer, 1995, Thrombin induces activation of p38 kinase in human platelets., J Biol Chem, 270, 27395, 10.1074/jbc.270.46.27395 Raingeaud, 1995, Pro-inflammatory cytokines and environmental stress cause p38 mitogen-activated protein kinase activation by dual phosphorylation on tyrosine and threonine., J Biol Chem, 270, 7420, 10.1074/jbc.270.13.7420 Weiss, 1994, Signal transduction by lymphocyte antigen receptors., Cell, 76, 263, 10.1016/0092-8674(94)90334-4 Grand, 1996, Cellular consequences of thrombin receptor activation., Biochem J, 313, 353, 10.1042/bj3130353 Cabre, 1993, Synthesis and release of platelet-activating factor and eicoanoids in human endothelial cells induced by different agonists., Agents Actions, 38, 212, 10.1007/BF01976213 Harlan, 1986, Alpha-thrombin induces release of platelet-derived growth factor-like molecule(s) by cultured human endothelial cells., J Cell Biol, 103, 1129, 10.1083/jcb.103.3.1129 Bar-Shavit, 1983, Monocyte chemotaxis: Stimulation by specific exosite region in thrombin., Science, 220, 728, 10.1126/science.6836310 Hoffman, 1993, Response of blood leukocytes to thrombin receptor peptides., J Leukoc Biol, 54, 145, 10.1002/jlb.54.2.145 Eguchi, 1996, Identification of an essential signaling cascade for mitogen-activated protein kinase activation by angiotensin II in cultured rat vascular smooth muscle cells., J Biol Chem, 271, 14169, 10.1074/jbc.271.24.14169 Wan, 1996, Tyrosine kinases in activation of the MAP kinase cascade by G-protein-coupled receptors., Nature, 380, 541, 10.1038/380541a0 Shapiro, 1996, The seven-transmembrane-spanning receptors for endothelin and thrombin cause proliferation of airway smooth muscle cells and activation of the extracellular regulated kinase and c-Jun NH2-terminal kinase groups of mitogen-activated protein kinases., J Biol Chem, 271, 5750, 10.1074/jbc.271.10.5750 Sieh, 1994, Grb2 and phospholipase G-gamma 1 associate with a 36-to 38-kilodalton phosphotyrosine protein after T-cell receptor stimulation., Mol Cell Biol, 14, 4435, 10.1128/MCB.14.7.4435 Ford, 1994, Signaling-induced association of a tyrosine-phosphorylated 36-kDa protein with p50Csk., J Biol Chem, 269, 30378, 10.1016/S0021-9258(18)43824-0 Joyce, 1997, Functional interactions between the thrombin receptor and the T-cell antigen receptor in human T-cell lines., Blood, 90, 1893, 10.1182/blood.V90.5.1893