Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Sáu lớp bổ sung của đột biến tổng hợp protein chết điều kiện ở tế bào CHO được chọn lọc bởi axit amin phóng xạ 3H
Tóm tắt
Sử dụng quy trình tự sát bằng axit amin đánh dấu Tritium được thiết kế đặc biệt để lựa chọn các đột biến tổng hợp protein điều kiện, chúng tôi đã phân lập và xác định một số lượng lớn các đột biến như vậy từ tế bào buồng trứng của hamster Trung Quốc. Tất cả các đột biến đều ổn định về di truyền và hoạt động như là gen lặn trong các hợp nhất tế bào soma. Hầu hết các đột biến mới đều phụ thuộc vào nồng độ của một axit amin cụ thể cũng như nhiệt độ. Ngoài việc xác định nhiều đột biến synthetase tRNA leucyl và asparagyl bổ sung, phân tích bổ sung đã phân biệt bốn lớp di truyền mới đại diện cho các đột biến phụ thuộc vào methionine, glutamine, histidine và arginine. Việc đặc trưng sinh hóa các đột biến tiêu biểu từ mỗi lớp này đã xác định các tổn thương chính là các synthetase aminoacyl-tRNA bị khuyết tật. Kết quả lựa chọn của chúng tôi càng chứng minh được tính đặc hiệu cao của quy trình axit amin phóng xạ 3H trong việc phân lập các đột biến tổng hợp protein. Các thí nghiệm tái cấu trúc được thực hiện với hai đột biến tiêu biểu cho thấy hiệu suất chọn lọc khoảng 10% dưới các điều kiện tiêu chuẩn.
Từ khóa
#đột biến sinh tổng hợp protein #tế bào CHO #axit amin #phân tích bổ sung #synthetase tRNATài liệu tham khảo
Basilico, C. (1977).Adv. Cancer Res. 24:222–266.
Thompson, L. H., and Baker, R. M. (1973). InMethods in Cell Biology, Vol. 6, (edited by D. M. Prescott) Academic Press, New York, pp. 209–281.
Thompson, L. H., Harkins, J. L., and Stanners, C. P. (1973).Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 70:3094–3098.
Stanners, C. P., and Thompson, L. H. (1974). InControl of Proliferation in Animal Cells, Cold Spring Harbor Conferences on Cell Proliferation, Vol. 1, (edited by B. Clarkson and R. Baserga) Cold Spring Harbor Laboratory, pp. 191–203.
Molnar, S. J., and Rauth, A. M. (1975).J. Cell Physiol. 85:173–178.
Thompson, L. H., Stanners, C. P., and Siminovitch, L. (1975).Somat. Cell Genet. 1:187–208.
McBurney, M. W., and Whitmore, G. F. (1976).Cell 2:173–182.
Taylor, R. T., and Hanna, M. L. (1977).Arch. Biochem. Biophys. 181:331–344.
Thompson, L. H., Lofgren, D. J., and Adair, G. M. (1977).Cell 11:157–168.
Stanners, C. P., Eliceiri, G. L., and Green, H. (1971).Nature (London) New Biol. 230:52–54.
Davidson, R. L., and Gerald, P. S. (1976).Somat. Cell Genet. 2:165–176.
Davidson, R. L., O'Malley, K. A., and Wheeler, T. B. (1976).Somat. Cell Genet. 2:271–280.
Kao, F. T., Chasin, L., and Puck, T. T. (1969).Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 64:1284–1291.
Roufa, D. J., and Reed, S. J. (1975).Genetics 80:549–566.
Haralson, M. A., and Roufa, D. J. (1975).J. Biol. Chem. 250:8618–8623.
Wasmuth, J. J., and Caskey, C. T. (1976).Cell 9:655–662.
Gupta, R. S., and Siminovitch, L. (1976).Cell 9:213–221.
Hankinson, O. (1976).Somat. Cell Genet. 2:497–507.
Patterson, D., Kao, F. T., and Puck, T. T. (1974).Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 71:2057–2061.
Kao, F. T., and Puck, T. T. (1975).Genetics 79:343–352.
Jones, C., and Moore, E. E. (1976).Somat. Cell Genet. 2:235–243.
Patterson, D. (1976).Somat. Cell Genet. 2:41–53.
Patterson, D. (1976).Somat. Cell Genet. 2:189–203.
Patterson, D., and Jones, C. (1976).Somat. Cell Genet. 2:429–439.
Patterson, D., Waldren, C., and Walker, C. (1976).Somat. Cell Genet. 2:113–123.
Gupta, R. S., and Siminovitch, L. (1977).Cell 10:61–66.
Jones, G. E., and Sargent, P. A. (1974).Cell 2:43–54.
Stanley, P., Caillibot, V., and Siminovitch, L. (1975).Somat. Cell Genet. 1:3–26.
Stanley, P., and Siminovitch, L. (1977).Somat. Cell Genet. 3:391–406.
Flintoff, W. F., Spindler, S. M., and Siminovitch, L. (1976).In Vitro 12:749–757.
Siminovitch, L. (1976).Cell 7:1–11.
Worten, R. G., Ho, C. C., and Duff, C. (1977).Somat. Cell Genet. 3:27–45.
Chasin, L. A. (1973).J. Cell Physiol. 82:299–308.
Hsie, A. W., Brimer, P. A., Mitchell, T. J., and Gosslee, D. G. (1975).Somat. Cell Genet. 1:247–261.
Denney, R. M., and Craig, I. W. (1976).Biochem. Genet. 14:99–117.
Shimizu, N., Kucherlapati, R. S., and Ruddle, F. H. (1976).Somat. Cell Genet. 2:345–357.