Điều chỉnh tổng hợp đại phân tử của virus herpes I. Quy định theo từng giai đoạn của tổng hợp ba nhóm protein virus
Tóm tắt
Dựa trên bằng chứng rằng 50% DNA herpes simplex 1 được phiên mã trong các tế bào HEp-2 trong điều kiện không có tổng hợp protein, chúng tôi đã khảo sát thứ tự và tỷ lệ tổng hợp các polypeptid virus trong các tế bào bị nhiễm sau khi đảo ngược sự ức chế tổng hợp protein do cycloheximide hoặc puromycin gây ra. Các thí nghiệm này cho thấy rằng các polypeptid virus hình thành ba nhóm được tổng hợp theo trình tự, được điều chỉnh đồng bộ được ký hiệu là α, β và γ. Cụ thể: (i) Nhóm α, bao gồm một polypeptid cấu trúc nhỏ và một số polypeptid không cấu trúc, được tổng hợp với tỷ lệ cao nhất từ 3 đến 4 giờ sau khi nhiễm trong các tế bào không điều trị và giảm dần sau đó. Nhóm β, cũng chứa các polypeptid cấu trúc nhỏ và không cấu trúc, được tổng hợp với tỷ lệ cao nhất từ 5 đến 7 giờ và giảm dần sau đó. Nhóm γ chứa các polypeptid cấu trúc chính được tổng hợp với tỷ lệ tăng cho đến ít nhất 12 giờ sau khi nhiễm. (ii) Sự tổng hợp các polypeptid α không cần tổng hợp protein tế bào bị nhiễm trước đó. Ngược lại, sự tổng hợp các polypeptid β yêu cầu cả sự tổng hợp polypeptid α trước đó cũng như tổng hợp RNA mới, vì việc thêm actinomycin D ngay sau khi loại bỏ cycloheximide đã ngăn cản sự tổng hợp polypeptid β. Chức năng do các polypeptid α cung cấp là ổn định vì sự gián đoạn tổng hợp protein sau khi bắt đầu tổng hợp polypeptid α và trước khi polypeptid β được tạo ra không ngăn cản sự tổng hợp ngay lập tức của các polypeptid β khi thuốc được rút lui. Yêu cầu tổng hợp các polypeptid γ cho sự tổng hợp trước đó của các polypeptid β dường như tương tự như yêu cầu của các polypeptid β cho sự tổng hợp trước đó của nhóm α. (iii) Tỷ lệ tổng hợp của các polypeptid α cao nhất ngay sau khi loại bỏ cycloheximide và giảm dần sau đó đồng thời với sự khởi đầu của tổng hợp polypeptid β; sự giảm này trong tổng hợp polypeptid α đã chậm hơn khi có mặt của actinomycin D, điều này ngăn cản sự xuất hiện của các polypeptid β và γ. Sự giảm tỷ lệ tổng hợp polypeptid β thường xảy ra sau 7 giờ sau khi nhiễm cũng chậm hơn khi có mặt của actinomycin D so với khi không có nó, trong khi tổng hợp polypeptid γ đang diễn ra vào thời điểm này đã bị giảm nhanh chóng bởi actinomycin D. (iv) Các chất ức chế tổng hợp DNA (cytosine arabinoside hoặc hydroxyurea) không ngăn cản sự tổng hợp các polypeptid α, β hay γ, nhưng đã giảm số lượng polypeptid γ được tạo ra.