Sự keratin hóa bình thường trong dòng tế bào keratinocyte người bất tử thường xảy ra tự phát mảnh nhiễm sắc thể

Trái ngược với các tế bào biểu bì của chuột, tế bào keratinocyte của da người khá kháng lại sự biến đổi in vitro. Việc bất tử hóa đã được thực hiện bằng SV40 nhưng đã dẫn đến các dòng tế bào có sự khác biệt trong quá trình biệt hóa. Chúng tôi đã thiết lập một dòng tế bào biểu mô người được chuyển hóa tự phát từ da người trưởng thành, duy trì đầy đủ khả năng biệt hóa của biểu bì. Dòng tế bào HaCaT này rõ ràng là bất tử (hơn 140 lần chuyển đi), có kiểu hình được chuyển hóa in vitro (có khả năng clonogenic trên nhựa và trong agar) nhưng vẫn không gây khối u. Mặc dù có tiềm năng tăng trưởng không giới hạn và bị biến đổi, tế bào HaCaT, tương tự như keratinocyte bình thường, tái tạo lại một mô biểu bì có cấu trúc có trật tự và biệt hóa khi được cấy ghép lên chuột nude. Các keratin đặc hiệu cho quá trình biệt hóa (số 1 và 10) và các dấu hiệu khác (involucrin và filaggrin) được biểu hiện và định vị một cách thường xuyên. Do đó, HaCaT là dòng tế bào biểu mô vĩnh viễn đầu tiên từ da người trưởng thành thể hiện sự biệt hóa bình thường và cung cấp một công cụ hứa hẹn cho việc nghiên cứu sự điều chỉnh quá trình keratin hóa trong các tế bào người. Khi phân tích di truyền, dòng tế bào này cho thấy sự không ổn định di truyền (ban đầu là hypodiploid) với các nhiễm sắc thể đánh dấu ổn định duy nhất cho thấy nguồn gốc đơn dòng. Cơ sở xác định sự đúng đắn của dòng tế bào HaCaT với mô gốc đã được chứng minh bằng dấu vân tay DNA sử dụng các đầu dò minisatellite siêu biến đổi. Đây là sự chứng minh đầu tiên cho thấy mô hình dấu vân tay DNA không bị ảnh hưởng bởi quá trình nuôi cấy lâu dài, sự biến đổi và nhiều thay đổi nhiễm sắc thể, do đó cung cấp một khả năng độc đáo để xác định rõ ràng các dòng tế bào người. Các đặc điểm của dòng tế bào HaCaT tài liệu rõ ràng rằng sự chuyển hóa tự phát của keratinocyte người trưởng thành có thể xảy ra in vitro và liên quan đến các thay đổi nhiễm sắc thể liên tiếp, mặc dù không bắt buộc phải có các khuyết tật lớn trong các quá trình biệt hóa.