Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Tách biệt các thành phần biểu mô của tuyến vú chuột cho các nghiên cứu nuôi cấy ở mức mô
Tóm tắt
Chúng tôi đã phát triển một quy trình phân tách mô cho tuyến vú chuột, cho phép tách biệt phần parenchyma thành các tiểu thành phần cấu trúc nguyên vẹn, hầu như không có mô liên kết. Các miếng mỡ vú nguyên vẹn được cắt nhỏ thô và trải qua quá trình tiêu hóa collagenase giới hạn, với sự phân tách cơ học trong 90 phút ở 37°C. Phần parenchyma được giải phóng dưới dạng hỗn hợp các organoid đa tế bào và các tế bào đồng phân. Việc sử dụng một loạt các bộ lọc có kích thước lỗ (400, 250, 150, 95 và 51 μm) cho phép tách biệt parenchyma khỏi các vật liệu không phải parenchymal, với sự làm giàu hơn nữa của phần này thành các quần thể ống dẫn, ống dẫn - tiểu thùy, và nụ tận cùng hoặc phế nang. Lợi suất thu được thay đổi và phụ thuộc vào bản chất của mô khởi đầu, ví dụ, chủng chuột, tuổi tác và tình trạng sinh sản. Các phần organoid này có thể được thiết lập riêng biệt trong nuôi cấy. Quy trình này cho phép nghiên cứu các vùng ống dẫn và tận cùng của tuyến vú chuột trong nuôi cấy ở mức mô.
Từ khóa
#tuyến vú chuột #tách biệt mô #parenchyma #organoid #nuôi cấy môTài liệu tham khảo
Flynn, D.; Yang, J.; Nandi, S. Growth and differentiation of primary cultures of mouse mammary epithelium embedded in collagen gel. Differentiation 22: 191–194; 1982.
Foster, R. C.; Feldman, M. K. Technique for mammary epithelial cell isolation and cultivation. TCA Manual 1: 27–30; 1975.
Imagawa, W.; Tomooka, Y.; Nandi, S. Serum-free growth of normal and tumor mouse mammary epithelial cells in primary culture. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 79: 4074–4077; 1982.
Richards, J.; Larson, L.; Yang, J.; Guzman, R.; Tomooka, Y.; Osborn, R.; Nandi, S. Method for culturing mammary epithelial cells in a rat tail collagen gel matrix. J. Tissue Cult. Methods. 8: 31–36; 1983.
Hallowes, R. C.; Bone, E. S.; Jones, W. A new dimension in the culture of human breast. In: Richards, R. J.; Rajan, K. T., eds. Tissue culture in medical research (II). Oxford and New York: Pergamon Press; 1980: 213–220.
Wigle, J. C.; Freyer, J. P.; Sutherland, R. M. Use of a sedimentation column to obtain uniformly sized populations of multicell spheroids. In Vitro 19: 361–366; 1983.
Stampfer, M.; Hallowes, R. C.; Hackett, A. J. Growth of normal human mammary cells in culture. In Vitro 16: 415–425; 1980.