Phân bố in situ của methylase EcoRI và endonuclease hạn chế trong tế bào Escherichia coli Bs 5

FEBS Letters - Tập 216 - Trang 207-210 - 1987
Gert-Wieland Kohring1, Frank Mayer1
1Institut für Mikrobiologie der Universität Göttingen, Grisebachstr. 8, D-3400 Göttingen, FRG

Tóm tắt

Các kháng thể IgG đặc hiệu đã được tạo ra ở thỏ chống lại methylase và endonuclease hạn chế tinh khiết EcoRI. Các thí nghiệm gán nhãn sau khi nhúng, sử dụng kỹ thuật protein A-vàng, đã được thực hiện với các tế bào cố định bằng paraformaldehyde-glutaraldehyde, được nhúng trong nhựa Lowicryl K4M ở nhiệt độ thấp. Gán nhãn bằng các kháng thể đặc hiệu cho methylase cho thấy 60–70% các hạt vàng nằm trong tế bào chất và 30–40% ở màng tế bào, trong khi việc sử dụng các kháng thể đặc hiệu cho enzyme hạn chế dẫn đến phân bố 10–30% trong tế bào chất và 70–90% ở màng tế bào. Những kết quả này tương ứng với chức năng đã đề xuất của các enzyme: trong tế bào chất, methylase bảo vệ DNA của chính tế bào khỏi sự tự hủy diệt, và endonuclease hạn chế cắt DNA ngoại lai khi vào tế bào.

Từ khóa

#methylase #endonuclease hạn chế #<i>Escherichia coli</i> #phân bố in situ #kháng thể IgG

Tài liệu tham khảo

1982 Cold Spring Harbor NY P. Modrich J.R. Roberts S.M. Linn R.J. Roberts Nucleases 109 154 10.1021/bi00319a006 10.1016/S0076-6879(80)65014-9 10.1042/bj2110405 10.1007/BF00454940 10.1016/S0021-9258(19)66964-4 10.1016/0022-2836(81)90548-9 10.1177/28.2.7354212 10.1016/S0021-9258(17)42672-X 10.1177/26.12.366014 Kohring G.-W., 1985, Eur. J. Cell Biol., 37, 1 10.1016/S0021-9258(18)90900-2 10.1111/j.1699-0463.1949.tb00751.x 10.1016/0003-2697(84)90518-9 10.1128/jb.165.3.787-795.1986
Thông tin
Thông tin xuất bản

FEBS Letters

Tập 216

207-210

Thông tin tác giả