Xác định các miền điều hòa được bảo tồn cao và các vị trí liên kết protein trong các trình điều khiển của gen mã hóa protein điều hòa glucose trọng số 78 kilodalton ở chuột và người.
Tóm tắt
Gen mã hóa GRP78 đã được chứng minh là được biểu hiện liên tục ở nhiều loại tế bào và có thể bị kích thích bởi ionophore canxi A23187. Để hiểu quy trình điều hòa phiên mã GRP78, chúng tôi đã phân tích các thành phần kiểm soát biểu hiện ở mức cơ bản của nó. Bằng cách chuyển gen các loại thiếu vào tế bào, chúng tôi đã xác định một yếu tố điều tiết cis-acting dài 54 nucleotide quan trọng cho biểu hiện ở mức cơ bản cao và một yếu tố liên tiếp dài 50 nucleotide cho cả biểu hiện ở mức cơ bản và sự cảm ứng bởi A23187. Sử dụng thử nghiệm footprint DNase với cả trình điều khiển GRP78 của chuột và người, chúng tôi đã chứng minh rằng các yếu tố protein có trong chiết xuất hạt nhân tế bào HeLa liên kết với các vùng điều tiết được xác định bởi các nghiên cứu thiếu. Miền này chứa một chuỗi đối xứng và được bảo tồn cao giữa các gen GRP ở Caenorhabditis elegans, gà, chuột và con người.