Sự biểu hiện của protein yếu tố tăng trưởng tiểu cầu và mRNA thụ thể α và β của chúng trong quá trình liền xương ở chuột bình thường

Yếu tố tăng trưởng tiểu cầu (PDGF), có nhiều trong mô xương, đã được báo cáo là kích thích sự phát triển và di chuyển của các tế bào trung mô. Để làm rõ vai trò chức năng của PDGF trong quá trình liền xương, chúng tôi đã nghiên cứu sự biểu hiện của protein chuỗi PDGF-A và -B cũng như mRNA thụ thể α và β trong xương ống của chuột bị gãy. Chúng tôi tiến hành phẫu thuật cho các con chuột đực BALB/c 12 tuần tuổi để tạo ra một vết gãy kín ở đầu trên xương ống. Vào các ngày 2, 4, 7, 10, 14, 21, và 28 sau phẫu thuật, các mẫu xương bị gãy đã được cắt ra, cố định bằng paraformaldehyde 4%, khử khoáng bằng EDTA 20% và nhúng vào parafin để chuẩn bị các lát cắt dày 7µm. Phương pháp nhuộm miễn dịch tế bào với kháng thể đa dòng chống lại chuỗi PDGF-A và -B của người được thực hiện bằng phương pháp avidin-biotin-peroxidase. Đối với hybrid hóa tại chỗ, chúng tôi sử dụng các mồi DNA đơn chuỗi được đánh dấu bằng digoxigenin đặc hiệu cho các thụ thể PDGF α và β của chuột được tạo ra bằng phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase đơn hướng. Trong giai đoạn viêm từ ngày 2-4 sau vết gãy, các tế bào trung mô tập trung tại vị trí gãy biểu hiện mRNA chuỗi PDGF-B và thụ thể β. Tại giai đoạn hình thành callus sụn vào ngày 7, sự phản ứng miễn dịch cho PDGF-A và -B trên các tế bào sụn đang phát triển và phì đại cũng như các tín hiệu mRNA thụ thể α và β trên các tế bào sụn đang phát triển trở nên rõ ràng. Tại giai đoạn callus xương và tái tạo xương từ ngày 14-21, sự biểu hiện chủ yếu của chuỗi PDGF-B và thụ thể β được quan sát thấy trên cả tế bào tiêu xương và tạo xương. Vào ngày 28, các tín hiệu cho các protein ligand PDGF và mRNA thụ thể giảm đi. Sự phân bố đồng thời của các ligand PDGF và các thụ thể của chúng ngụ ý một cơ chế ngoại tiết và tự tiết. Dữ liệu của chúng tôi gợi ý rằng PDGF góp phần vào việc thúc đẩy sự thay đổi chondrogenic và osteogenic của các tế bào trung mô từ giai đoạn đầu đến giữa của quá trình liền xương; các chức năng được trung gian bởi thụ thể β, bao gồm di cư tế bào, có thể là những yếu tố tiên quyết cho sự thu hút các tế bào trung mô trong bước khởi đầu và cho sự tương tác giữa tế bào tiêu xương và tạo xương trong giai đoạn tái tạo xương.