Đếm và Phân Tích Chu Kỳ Tế Bào của Quần Thể Picoplankton Biển Tự Nhiên Bằng Kỹ Thuật Flow Cytometry Sử Dụng Thuốc Nhuộm Ribonucleic SYBR Green I

Applied and Environmental Microbiology - Tập 63 Số 1 - Trang 186-193 - 1997
Dominique Marie1,2, Frédéric Partensky1,2, Stéphan Jacquet1,2, Daniel Vaulot1,2
1Station Biologique, BP 74, F-29682 Roscoff Cedex, France.
2Station Biologique, CNRS, INSU et Universite ´Pierre et Marie Curie, F-29682 Roscoff Cedex, France

Tóm tắt

Thuốc nhuộm mới SYBR Green I gắn kết đặc biệt với acid nucleic và có thể được kích thích bằng ánh sáng xanh (bước sóng 488 nm). Nồng độ tế bào của vi khuẩn đo lường trong các mẫu hải dương bằng thuốc nhuộm này trên máy đo dòng chảy chi phí thấp gọn nhẹ so sánh được với các kết quả thu được với thuốc nhuộm kích thích UV Hoechst 33342 (bis-benzimide) trên máy đo dòng chảy đắt đỏ có tia laser làm mát bằng nước. Trái ngược với TOTO-1 và TO-PRO-1, SYBR Green I có lợi thế trong việc phân biệt rõ ràng cả vi khuẩn dị dưỡng và tế bào Prochlorococcus tự dưỡng, ngay cả trong các vùng nước thiếu dưỡng chất. Tương tự TOTO-1 và TO-PRO-1, hai nhóm vi khuẩn dị dưỡng (loại B-I và B-II) có thể được phân biệt. Hơn nữa, độ phân giải của sự phân bố ADN đạt được với SYBR Green I tương tự như với Hoechst 33342 và cho phép phân tích chu kỳ tế bào của vi khuẩn quang hợp trong toàn bộ cột nước.

Từ khóa

#SYBR Green I #cyanobacteria #flow cytometry #marine microbiology #nucleic acid stains #cell cycle analysis #heterotrophic bacteria #Prochlorococcus #oligotrophic waters #DNA resolution

Tài liệu tham khảo