Phân Hiện Biểu Hiện Khác Nhau Của RNA Thông Tin Eukaryote Bằng Phương Pháp Chuỗi Polymerase

American Association for the Advancement of Science (AAAS) - Tập 257 Số 5072 - Trang 967-971 - 1992
Liang Peng1, Arthur B. Pardee1
1Department of Biological Chemistry and Molecular Pharmacology, Harvard Medical School, and Division of Cell Growth and Regulation, Dana-Farber Cancer Institute, Boston, MA 02115.

Tóm tắt

Cần có những phương pháp hiệu quả để xác định và tách biệt những gen có biểu hiện khác nhau trong các tế bào khác nhau hoặc trong các điều kiện thay đổi. Báo cáo này mô tả một phương pháp để phân tách và nhân bản các RNA thông tin (mRNA) riêng lẻ thông qua phản ứng chuỗi polymerase. Yếu tố chính là sử dụng một bộ các mồi oligonucleotide, một mồi được gắn vào đuôi polyadenylate của một tập hợp con mRNA, và mồi còn lại ngắn và có trình tự ngẫu nhiên để nó có thể liên kết tại các vị trí khác nhau tương ứng với mồi đầu tiên. Các phân nhóm mRNA được định nghĩa bởi các cặp mồi này đã được tăng cường sau khi phiên mã ngược và được tách biệt trên một gel kết hợp DNA. Khi sử dụng nhiều bộ mồi, các mẫu DNA bổ sung đã được khuếch đại cho thấy các mẫu lặp lại có được, có sự phụ thuộc mạnh vào tính đặc hiệu của trình tự tại từng mồi.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

ADAMS, M.D., SEQUENCE IDENTIFICATION OF 2,375 HUMAN BRAIN GENES, NATURE 355: 632 (1992).

Alberts B. Molecular Biology of the Cell (1989).

BAND, V, TUMOR PROGRESSION IN 4 MAMMARY EPITHELIAL-CELL LINES DERIVED FROM THE SAME PATIENT, CANCER RESEARCH 50: 7351 (1990).

Bothwell A. Methods for Cloning and Analysis of Eukaryotic Genes (1990).

COPPOCK, D.L., CONTROL OF THYMIDINE KINASE MESSENGER-RNA DURING THE CELL-CYCLE, MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY 7: 2925 (1987).

Croy, R. G., Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 80: 4699 (1983).

HOFBAUER, R, CELL-CYCLE REGULATED SYNTHESIS OF STABLE MOUSE THYMIDINE KINASE MESSENGER-RNA IS MEDIATED BY A SEQUENCE WITHIN THE CDNA, NUCLEIC ACIDS RESEARCH 15: 741 (1987).

JACKSON, R.J., DO THE POLY(A) TAIL AND 3' UNTRANSLATED REGION CONTROL MESSENGER-RNA TRANSLATION, CELL 62: 15 (1990).

KEYOMARSI, K, SYNCHRONIZATION OF TUMOR AND NORMAL-CELLS FROM G1 TO MULTIPLE CELL-CYCLES BY LOVASTATIN, CANCER RESEARCH 51: 3602 (1991).

KHAN, A.S., EFFICIENT DOUBLE-STRANDED SEQUENCING OF CDNA CLONES CONTAINING LONG POLY(A) TAILS USING ANCHORED POLY(DT) PRIMERS, NUCLEIC ACIDS RESEARCH 19: 1715 (1991).

10.1073/pnas.88.7.2825

LEWIN, B, DRIVING THE CELL-CYCLE - M-PHASE KINASE, ITS PARTNERS, AND SUBSTRATES, CELL 61: 743 (1990).

LIANG P unpublished data.

LIN, P.F., MOLECULAR-CLONING AND STRUCTURAL-ANALYSIS OF MURINE THYMIDINE KINASE GENOMIC AND CDNA SEQUENCES, MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY 5: 3149 (1985).

10.1126/science.3296191

MASIAKOWSKI, P, CLONING OF CDNA SEQUENCES OF HORMONE-REGULATED GENES FROM THE MCF-7 HUMAN-BREAST CANCER CELL-LINE, NUCLEIC ACIDS RESEARCH 10: 7895 (1982).

10.1016/S0021-9258(19)41496-8

10.1126/science.2683075

SU, J.Y., MOLECULAR-CLONING AND EXPRESSION OF THE HUMAN DEOXYTHYMIDYLATE KINASE GENE IN YEAST, NUCLEIC ACIDS RESEARCH 19: 823 (1991).

Varmus, H., Oncogenes and the Molecular Origins of Cancer: 3 (1989).

WILLIAMS, JGK, DNA POLYMORPHISMS AMPLIFIED BY ARBITRARY PRIMERS ARE USEFUL AS GENETIC-MARKERS, NUCLEIC ACIDS RESEARCH 18: 6531 (1990).

Thông tin
Thông tin xuất bản

American Association for the Advancement of Science (AAAS)

Tập 257 Số 5072

967-971

Thông tin tác giả