Giàn Giáo Sinh Học Để Phân Tích 3D Về Sự Phát Triển Và Xâm Lấn Của Glioblastoma

Springer Science and Business Media LLC - Tập 43 - Trang 1965-1977 - 2014
John M. Heffernan1,2, Derek J. Overstreet1, Long D. Le2, Brent L. Vernon2, Rachael W. Sirianni1,2
1Barrow Brain Tumor Research Center, Barrow Neurological Institute, Phoenix, USA
2School of Biological and Health Systems Engineering, Arizona State University, Tempe, USA

Tóm tắt

Sự xâm lấn của các tế bào glioblastoma ác tính (GBM) vào não khỏe mạnh là nguyên nhân chính gây tái phát khối u và các bệnh lý liên quan. Trong bài viết này, chúng tôi mô tả một phương pháp có khả năng cao để đo lường định lượng sự phát triển và xâm lấn của GBM trong nuôi cấy ba chiều (3D). Các hydrogels trong suốt về mặt quang học được tạo thành từ axit hyaluronic thiol hóa và gelatin đã được liên kết hóa học bằng các polyme poly(ethylene glycol) phản ứng với thiol để tạo thành một môi trường vi mô khối u 3D nhân tạo. Việc đặc trưng hóa độ nhớt và độ ổn định trong nước cho thấy các hydrogels có thể điều chỉnh cơ học với độ cứng dao động từ 18 Pa đến 18,2 kPa và có khả năng kháng thủy phân ít nhất trong 30 ngày. Sự phát triển, phân tán và xâm lấn tiếp theo của các spheroid GBM U118 và U87R được nuôi cấy trên các hydrogels đã được theo dõi tại chỗ bằng hình ảnh huỳnh quang vi cấu hình lặp lại. Sử dụng xử lý hình ảnh tự động tùy chỉnh, các tế bào được xác định và định lượng qua 500 µm gel trong vòng 14 ngày. Hành vi phát triển và xâm lấn được quan sát tùy thuộc vào loại tế bào, độ cứng của gel và sự sẵn có của yếu tố tăng trưởng tế bào gan. Những phép đo này làm nổi bật tính hữu dụng của nền tảng này trong việc thực hiện phân tích hình ảnh định lượng, huỳnh quang về hành vi của các tế bào ác tính trong một môi trường vi mô khối u 3D nhân tạo.

Từ khóa

#glioblastoma #phát triển #xâm lấn #vi mô khối u 3D #hydrogels #sinh học phân tử

Tài liệu tham khảo

Akiyama, Y., S. Jung, B. Salhia, S. Lee, S. Hubbard, M. Taylor, T. Mainprize, K. Akaishi, W. van Furth, and J. T. Rutka. Hyaluronate receptors mediating glioma cell migration and proliferation. J. Neurooncol. 53:115–127, 2001.

Hubbell, J. A. Biomaterials in Tissue Engineering. Nat. Biotech 13:565–576, 1995.

Ponten, J., and E. Macintyre. Long term culture of normal and neoplastic human glia. Acta Pathol. Microbiol. Scand. 74:465–486, 1968.