Neuroendocrinology

Đường tiếp cận qua màng cứng là kỹ thuật phổ biến nhất để phẫu thuật u tuyến yên nhờ vào tính nhanh chóng, khả năng dung nạp tốt, hiệu quả và tỷ lệ biến chứng thấp. Đây là các tham số mà chúng tôi đã sử dụng để so sánh phẫu thuật nội soi với phẫu thuật vi phẫu đường tiếp cận qua màng cứng. Chúng tôi đã xem xét hồ sơ y tế của 418 bệnh nhân bị u tuyến yên đã trải qua phẫu thuật nội soi đường tiếp cận qua màng cứng trong khoảng thời gian từ tháng 5 năm 1998 đến tháng 12 năm 2004, và trong bài viết này, chúng tôi trình bày kết quả của 381 bệnh nhân đã đáp ứng các tiêu chí theo dõi sau tối thiểu 15 tháng. Kinh nghiệm của chúng tôi xác nhận dữ liệu trước đó về tính nhanh chóng và khả năng dung nạp tốt của quy trình nội soi. Chúng tôi cũng xác nhận tỷ lệ biến chứng thấp, với việc chỉ ra rằng các biến chứng đặc trưng cho giai đoạn tiếp cận chắc chắn đã giảm; thay vào đó, những biến chứng đặc trưng cho việc loại bỏ khối u vẫn tương tự như những gì đã được báo cáo trong tài liệu vi phẫu. Kết quả của chúng tôi có thể so sánh với những loạt vi phẫu tốt nhất liên quan đến các tổn thương nội tiết, nhưng việc loại bỏ khối u có sự vượt trội đáng kể khi xử lý các khối u có sự mở rộng ngoài bao. Sự cải thiện này có thể được giải thích bằng việc tầm nhìn tuyệt vời của các vùng phẫu thuật sâu nhờ vào nội soi và sự linh hoạt cực kỳ của lộ trình phẫu thuật, chủ yếu là do không có thiết bị phân tách, cho phép tiếp cận các nhánh của khối u, mà khó khăn trong việc tiếp cận bằng các phương pháp khác.

Các nghiên cứu lâm sàng cho thấy có tác động của estrogen (E₂) đối với cảm xúc và nhận thức, có thể được trung gian bởi con đường protein kinase liên kết yếu tố đáp ứng cAMP (CREB) và yếu tố thần kinh do não (BDNF) mục tiêu liên quan đến CREB. Chúng tôi đã điều tra tác động của E₂ đối với sự biểu hiện và phosphoryl hóa CREB cũng như sự biểu hiện của BDNF trong amygdala và hippocampus, những khu vực liên quan đến xử lý cảm xúc. Những con chuột cống đã cắt buồng trứng được cho uống 10 µg 17β-estradiol hoặc dung dịch đối chứng trong 14 ngày, và sự biểu hiện của các thành phần của con đường tín hiệu CREB, tức là CREB, CREB phosphoryl hóa (pCREB), và BDNF trong amygdala và hippocampus được nghiên cứu bằng cách sử dụng phương pháp đánh dấu miễn dịch vàng. Mức độ mARN của BDNF được xác định thông qua phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược tại chỗ. Chúng tôi cũng đã xem xét tác động của E₂ đối với việc đánh dấu miễn dịch CaMK IV (kinase calci/calmodulin) trong hippocampus. E₂ đã làm tăng việc đánh dấu miễn dịch và mức độ mARN của BDNF trong amygdala giữa và cơ sở, cũng như các vùng CA1 và CA3 của hippocampus, nhưng không ở bất kỳ vùng amygdala hoặc hippocampus nào khác được khảo sát. E₂ cũng đã làm tăng việc đánh dấu miễn dịch của CREB và pCREB trong amygdala giữa và cơ sở, nhưng không phải ở amygdala trung tâm hoặc ngoại vi. E₂ cũng làm tăng đánh dấu miễn dịch CaMK IV và pCREB ở các vùng CA1 và CA3, nhưng không ở vùng CA2 hoặc gyrus răng của hippocampus. Không có sự thay đổi nào trong việc đánh dấu miễn dịch của CREB ở bất kỳ vùng hippocampus nào. Dữ liệu này xác định một con đường tín hiệu qua đó E₂ tăng cường biểu hiện BDNF, có thể là cơ sở của một số tác động của E₂ đối với hành vi cảm xúc, và chỉ ra sự dị biệt về thần kinh giải phẫu trong tác động của E₂ trong amygdala và hippocampus.

Mặc dù estrogen đã được chứng minh là có tác dụng bảo vệ thần kinh, các nghiên cứu về ảnh hưởng của nó đối với một số hành vi lại mâu thuẫn, cho thấy cả tác động cải thiện lẫn tác động có hại. Một yếu tố liên quan đến hiệu quả của hormone là chế độ estrogen. Chúng tôi đã báo cáo về tác động của 10 µg estrogen trong 14 ngày lên con đường protein gắn với yếu tố phản ứng cAMP (CREB), bao gồm cả yếu tố thần kinh được sản xuất từ não (BDNF), trong hạch amygdala giữa (MeA) của chuột. Để xác định ảnh hưởng của estrogen lên số lượng nơ-ron và thể tích vùng não trong MeA và nhân trung ương của amygdala (CeA), chúng tôi đã sử dụng phương pháp lượng tử học để kiểm tra tác động của các chế độ estrogen khác nhau lên số lượng nơ-ron được đánh dấu bằng protein đặc hiệu cho nơ-ron (NeuN) và thể tích vùng não của MeA và CeA. Những con chuột cái đã cắt buồng trứng được tiêm dung dịch đối chứng trong 14 ngày, 2.5 µg estradiol benzoate (E2) trong 4 hoặc 14 ngày, hoặc 10 µg estrogen trong 14 ngày. Do số lượng nơ-ron được đánh dấu bằng NeuN có thể liên quan đến sự sống sót của nơ-ron và sự tăng cường tín hiệu CREB, chúng tôi đã kiểm tra tác động của các chế độ này lên mức độ đánh dấu CREB phosphoryl hóa (pCREB) trong MeA và CeA. Chế độ 2.5 µg estrogen trong 14 ngày đã làm gia tăng số lượng tế bào nơ-ron được đánh dấu bằng NeuN và số lượng tế bào được đánh dấu bằng pCREB trong MeA so với dung dịch đối chứng hoặc 2.5 µg trong 4 ngày. Có sự gia tăng thể tích của MeA với 2.5 µg estrogen trong 14 ngày so với dung dịch đối chứng hoặc 2.5 µg trong 4 ngày. Không có sự khác biệt nào trong các tham số này được ghi nhận ở CeA. Dữ liệu này cho thấy sự không đồng nhất về mặt giải phẫu thần kinh của tác động theo thời gian của estrogen lên các tế bào biểu hiện NeuN và pCREB trong MeA so với CeA.

Chúng tôi đã chứng minh rằng protein enzym tổng hợp nitric oxide cảm ứng (iNOS) và hoạt động tổng thể của NOS tăng lên trong vùng hypothalamus và các khu vực khác của não chuột đực khi lão hóa. Hiện tại, chúng tôi đã kiểm tra giả thuyết rằng sự gia tăng của iNOS dẫn đến sản xuất nitric oxide (NO) và peroxynitrite quá mức, dẫn đến gia tăng apoptosis trong các tế bào hệ thần kinh trung ương (CNS), bao gồm các nơ-ron GnRH và oxytocin trong hypothalamus có liên quan đến việc điều chỉnh chức năng sinh sản ở nam giới. Chuột Brown Norway non (3 tháng tuổi) và già (24 tháng tuổi) (n = 6) đã được tưới rửa bằng formalin 4%. Các lát cắt hình chóp xiên ngang gần kề (5 µm) của khu vực giả trước (POA), hạch supraoptic (SON), hạch paraventricular (PVN) và hạch arcuate (ARC) trong hypothalamus đã được nhuộm miễn dịch với kháng thể iNOS, nNOS và nitrotyrosine (một dấu hiệu của sự hình thành peroxynitrite). Cường độ nhuộm miễn dịch đã được đo bằng hệ thống phân tích hình ảnh độ dày. Sự apoptosis được xác định thông qua thử nghiệm TUNEL. Nhuộm miễn dịch kép với kính hiển vi quét laser hội tụ đã được sử dụng cho các nghiên cứu đồng địa phương. Một sự gia tăng đáng kể trong nhuộm iNOS được đo bằng mật độ quang học (OD) đã được phát hiện ở chuột già so với chuột trẻ (SON: 0.32 ± 0.02 so với 0.23 ± 0.03, p < 0.05; PVN: 0.34 ± 0.03 so với 0.07 ± 0.05, p < 0.001; POA: 0.18 ± 0.02 so với 0.01 ± 0.02, p < 0.001). Lão hóa không làm ảnh hưởng đến biểu hiện nNOS. Nitrotyrosine tăng cao trong các vùng hypothalamus của chuột già so với chuột trẻ (SON: 0.32 ± 0.05 so với 0.10 ± 0.04, p < 0.05; PVN: 0.32 ± 0.04 so với 0.13 ± 0.03, p < 0.01; POA: 0.72 ± 0.06 so với 0.03 ± 0.003, p < 0.001). Sự gia tăng nitrotyrosine đi kèm với sự gia tăng chỉ số apoptosis ở chuột già (SON: 11.01 ± 3.33 so với 0.57 ± 0.50, p < 0.001; PVN: 3.08 ± 1.12 so với 0.42 ± 0.32; POA: 6.60 ± 1.93 so với 0.18 ± 0.17, p < 0.01; ARC: 0.001 ± 0.0001 so với 4.33 ± 2.33). Nhuộm iNOS đã đồng địa phương với nhuộm GnRH và oxytocin. Kết luận: Sự gia tăng biểu hiện iNOS liên quan đến lão hóa trong hypothalamus của chuột đực ảnh hưởng đến các vùng được biết đến với việc điều chỉnh sự tổng hợp và giải phóng GnRH (POA, ARC) và oxytocin (PVN, SON), và các yếu tố điều chỉnh sự cương cứng dương vật (POA và PVN). Các quan sát này gợi ý rằng iNOS có thể đóng vai trò trong việc giảm bài tiết nơ-ron GnRH và oxytocin dẫn đến các rối loạn sinh sản như giảm testosterone huyết thanh, hypospermatogenesis, và giảm chức năng giao cấu ở động vật nam lão hóa.

Nhằm làm rõ vai trò của thụ thể hormone giải phóng corticotropin loại 2 (CRH) (CRHR-2) trong não đối với việc kích hoạt trục giáp-hồ hơi-adrenal, chúng tôi đã thực hiện các thí nghiệm trên chuột đực Wistar. Đầu tiên, việc tiêm urocortin-2 (7.5 µg) vào não thất bên đã dẫn đến sự gia tăng tạm thời của CRH RNA đa hình dị hợp tử (hnRNA) trong nhân ngoại vi màng não (PVN) và trong hormone có tác dụng kích thích tuyến vỏ thượng thận (ACTH) trong huyết tương, trong khi sự gia tăng kéo dài của RNA hn mã hóa arginine vasopressin (AVP) và mRNA c-fos trong PVN được quan sát thấy so với nhóm tiêm giả dược. Việc tiền xử lý bằng chất đối kháng chọn lọc CRHR-2 antisauvagine-30 (20 µg) vào não thất bên 15 phút trước khi tiêm agonist đã làm giảm các hiệu ứng kích thích của urocortin-2 trên các biến số thuộc trục giáp-hồ hơi-adrenal nói trên. Các hiệu ứng này tương tự hoặc thậm chí mạnh mẽ hơn so với những gì được tạo ra bởi việc tiền xử lý bằng 50 µg CRH helical α. Thứ hai, chúng tôi nhận thấy sự gia tăng kéo dài hơn trong RNA hn của CRH và AVP cũng như mRNA c-fos trong PVN và ACTH huyết tương sau khi tiêm trung tâm urocortin-3 (7.5 µg) hơn là sau khi tiêm urocortin-2. Việc tiền xử lý bằng antisauvagine-30 đã làm mất hiệu quả của urocortin-3 trên các biến số nói trên. Cuối cùng, việc tiêm trung tâm antisauvagine-30 cũng như CRH helical α đã làm giảm đáng kể sự gia tăng RNA hn của AVP do căng thẳng do kiềm chế gây ra. Tuy nhiên, CRH helical α, chứ không phải antisauvagine-30, đã giảm sự gia tăng RNA hn của CRH trong PVN do căng thẳng do kiềm chế. Cả hai chất đối kháng đều làm giảm tạm thời các phản ứng căng thẳng của mRNA c-fos trong PVN và ACTH huyết tương. Những kết quả này cho thấy có một cơ chế điều hòa bởi CRHR-2 trong não kích thích các nơron sản xuất CRH và AVP trong PVN, dẫn đến sự thúc đẩy tiết ACTH trong huyết tương.

Các tín hiệu chuyển hóa như insulin, leptin và glucose được biết đến là có khả năng làm thay đổi chức năng hypothalamus. Mặc dù insulin và leptin được biết là trực tiếp làm thay đổi các khu vực hypothalamus điều chỉnh sinh sản, nhưng cơ chế mà glucose làm thay đổi chức năng sinh sản thì chưa rõ ràng. Các nơron catecholaminergic trong vùng A1/C1 của não sau nhạy cảm với glucose và phát triển đến nhân cong. Để xác định xem con đường này có liên quan đến việc điều chỉnh hành vi tình dục và tiết hormon luteinizing (LH) hay không, con đường catecholaminergic này đã bị tổn thương bằng cách tiêm saporin liên hợp với kháng thể chống dopamine-β-hydroxylase (DSAP) hoặc saporin không liên hợp (SAP) ở chuột đực trưởng thành. Chuột được cho thử thách glucoprivic và hành vi ăn uống cũng như hành vi tình dục được quan sát. Như đã mong đợi, các chuột được điều trị bằng DSAP cho thấy sự giảm ăn uống trong điều kiện thiếu glucose (250 mg/kg 2-deoxy-D-glucose, 2DG) so với nhóm đối chứng SAP. Tình trạng thiếu glucose gây ra sự giảm đáng kể về hành vi tình dục ở cả hai nhóm động vật SAP và DSAP, so với các điều trị bằng dung dịch muối sinh lý (p < 0.05). Vào cuối thí nghiệm, các động vật được thử thách lần cuối với 2DG hoặc dung dịch muối sinh lý, được gây mê bằng cách chặt đầu và máu thân được xét nghiệm để kiểm tra mức LH trong huyết tương. Phân tích hybridization in situ đã những gì cho thấy điều trị với 2DG dẫn đến sự giảm đáng kể trong GALP mRNA ở nhóm đối chứng SAP so với điều trị bằng dung dịch muối sinh lý. Sự giảm này trong GALP mRNA đã được ngăn chặn bằng việc điều trị với DSAP. Ở các động vật SAP, 2DG đã gây ra sự giảm đáng kể trong mức LH trong huyết tương (p < 0.05); sự giảm này trong LH huyết tương không xảy ra ở các chuột đực được điều trị bằng DSAP. Những dữ liệu này cho thấy rằng các nhánh A1/C1 đến hypothalamus ventromedial có liên quan đến việc điều chỉnh glucostatic của GALP mRNA, hành vi ăn uống và tiết LH, nhưng không ảnh hưởng đến hành vi tình dục ở chuột đực trưởng thành.

<i>Nền tảng/Mục tiêu:</i> RFRP-3 là một neuropeptide được mô tả gần đây, ảnh hưởng đến nhiều yếu tố sinh lý, bao gồm việc ức chế sự tiết gonadotropin và hành vi sinh sản. Chúng tôi giả thuyết rằng RFRP-3 nội sinh có thể đóng vai trò trong việc ức chế sự khởi đầu của dậy thì ở chuột đực non. <i>Phương pháp:</i> Để kiểm tra giả thuyết này, chúng tôi đã đặt cannula vào não thất ba của các chuột đực non 24 ngày tuổi. Cannula được gắn với các bơm mini thẩm thấu để truyền các oligonucleotide chống cảm ứng (ODNs) chống lại RFRP-3. Thứ hai, các cannula được đặt vào não thất của bầy chuột 35 ngày tuổi và được truyền RFRP-3, NPFF (có thể là một bản sao thay thế của gen RFRP), hoặc dung dịch kiểm soát. <i>Kết quả:</i> Không có điều trị nào làm thay đổi thời điểm dậy thì so với nhóm kiểm soát. Các chuột RFRP-3 ODN có tinh hoàn lớn hơn đáng kể so với các chuột kiểm soát. Tương tự, các chuột được điều trị ODN RFRP-3 có sự gia tăng đáng kể nồng độ LH trong huyết tương nhưng không phải FSH so với các chuột kiểm soát. Các chuột được truyền RFRP-3 cho thấy tinh hoàn nhỏ hơn đáng kể so với chuột kiểm soát. Các chuột RFRP-3 cũng có mức LH trong huyết tương giảm rõ rệt. Việc truyền RFRP-3 đã tạo ra sự gia tăng đáng kể của mRNA hormone giải phóng hormone tăng trưởng và mức hormone tăng trưởng trong huyết tương so với chuột kiểm soát. Không có peptide nào ảnh hưởng đến biểu hiện mRNA KiSS-1. <i>Kết luận:</i> Những dữ liệu này gợi ý rằng RFRP-3 nội sinh của chuột không ảnh hưởng đến thời điểm của dậy thì ở chuột đực, nhưng có thể liên quan đến sự gia tăng tiết hormone tăng trưởng trong giai đoạn xung quanh dậy thì.