c-kit được biểu hiện trong sarcoma mô mềm có nguồn gốc từ neuroectoderm và ligand của nó ngăn chặn sự chết tế bào của tế bào ung thư

Blood - Tập 91 - Trang 2397-2405 - 1998
Emanuela Ricotti1, Franca Fagioli1, Emanuela Garelli1, Claudia Linari1, Nicoletta Crescenzio1, Alberto L. Horenstein1, Paola Pistamiglio1, Sergio Vai1, Massimo Berger1, Luca Cordero diMontezemolo1, Enrico Madon1, Giuseppe Basso1
1From the Department of Pediatrics and the Laboratory of Cell Biology, Department of Genetics, Biology and Biochemistry, the University of Turin, Torino, Italy.

Tóm tắt

Tóm tắtTrong quá trình phát triển, chuột mang các đột biến của yếu tố tế bào gốc (SCF) hoặc thụ thể c-kit biểu hiện các khuyết tật trong quá trình sinh sắc tố, cũng như trong tạo máu và tạo sinh dục. Do đó, ngày càng có nhiều bằng chứng cho thấy hệ thống c-kit/SCF đóng vai trò quan trọng trong tất cả các quá trình này và trong các khối u phát sinh từ chúng. Đặc biệt, trong neuroblastoma (các khối u ở trẻ em có nguồn gốc từ đỉnh neuroectoderm như melanocytes), dường như tồn tại một vòng phản hồi tự động giữa c-kit và SCF, và việc khối chức năng của các thụ thể c-kit bằng kháng thể đơn dòng (MoAbs) dẫn đến sự giảm đáng kể trong sự phát triển tế bào. Chúng tôi đã nghiên cứu sự biểu hiện và vai trò của c-kit và SCF trong các dòng tế bào sarcoma mô mềm có nguồn gốc từ neuroectoderm, chẳng hạn như sarcoma Ewing (ES) và các khối u ngoại vi neuroectodermal (PNET). Sử dụng cytofluorometry với MoAb CD117 PE, sự biểu hiện c-kit đã được làm nổi bật trong tất cả sáu dòng tế bào được kiểm tra. Thụ thể này được kích hoạt cụ thể và chức năng bởi SCF, như được thể hiện qua các thí nghiệm liên kết và các nghiên cứu phosphotyrosine và miễn dịch lắng đọng trong tế bào đã được thực hiện. Sử dụng phân tích phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược, năm trong sáu dòng tế bào biểu hiện mRNA của SCF. Trong môi trường được đo bằng kiểm tra miễn dịch liên kết enzyme, mức độ SCF thấp đã được tìm thấy: chỉ có dòng tế bào TC32 sản xuất mức độ cao hơn đáng kể (32 pg) so với đối chứng. Trong môi trường nuôi cấy không có huyết thanh, việc bổ sung SCF đã giảm tỷ lệ tế bào chết theo chương trình từ 25% xuống 90% trong năm trên sáu dòng tế bào. Quan sát này đã được xác nhận bởi (1) khối chức năng của c-kit bằng MoAb: sau 7 ngày nuôi cấy, hơn 30% các tế bào đã chết theo chương trình (trong khoảng từ 31,5% đến 100%) trong năm trên sáu dòng tế bào và cũng có sự giảm tỷ lệ tế bào ở giai đoạn S, và (2) các oligonucleotides chống c-kit: trong các dòng tế bào điều trị bằng oligonucleotides (so với các dòng không điều trị) đã có sự giảm đáng kể (P < .001) cả về số lượng tế bào tuyệt đối và sự hấp thụ 3H-thymidine. Các kết quả này chỉ ra rằng ES và PNET biểu hiện c-kit và ligand của nó là SCF và rằng SCF có khả năng bảo vệ các tế bào khối u khỏi sự chết theo chương trình. Hơn nữa, phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược được thực hiện trên các mẫu sinh thiết cho thấy sự hiện diện của mRNA cả của SCF và c-kit trong hầu hết các mẫu đã được nghiên cứu. Dữ liệu in vitro của chúng tôi dẫn đến giả định rằng SCF cũng có thể ức chế sự chết theo chương trình của tế bào khối u trong cơ thể sống.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Yarden, 1987, Human proto-oncogene c-kit, a new cell-surface-receptor tyrosine kinase for an unidentified ligand., EMBO J, 6, 3341, 10.1002/j.1460-2075.1987.tb02655.x Williams, 1990, Identification of a ligand for the c-kit proto-oncogene., Cell, 63, 167, 10.1016/0092-8674(90)90297-R Hung, 1990, The hematopoietic growth factor KL is encoded by the SI locus and is the ligand of the c-kit receptor, the gene product of the W locus., Cell, 63, 225, 10.1016/0092-8674(90)90303-V Nocka, 1989, Expression of c-kit gene products is known cellular targets of W mutations in normal and W mutant mice. Evidence for an impaired c-kit kinase in mutant mice., Genes Dev, 3, 816, 10.1101/gad.3.6.816 Mintz, 1957, Gene induced embryological modifications of primordial germ cells in the mouse., J Exp Zool, 134, 207, 10.1002/jez.1401340202 Mayer, 1968, An experimental analysis of the pigment defect caused by mutations at the W and SI loci in mice., Dev Biol, 18, 62, 10.1016/0012-1606(68)90023-7 Bernstein, 1991, Recombinant human stem cell factor enhances the formation of colonies by CD34+ line cells, and the generation of colony-forming cell progeny from CD34+ line cells cultured with interleukin-3, granulocyte colony-stimulating factor, or granulocyte-macrophage colony stimulating factor., Blood, 77, 2316, 10.1182/blood.V77.11.2316.2316 Broxmeyer, 1991, Effect of murine mast cell growth factor (c-kit proto-oncogene ligand) on colony formation by human marrow hematopoietic progenitor cells., Blood, 77, 2142, 10.1182/blood.V77.10.2142.2142 McNiece, 1991, Recombinant human stem cell factor synergizes with GM-CSF, IL-3 and EPO to stimulate human progenitor cells of myeloid and erythroid lineages., Exp Hematol, 19, 226 Turner, 1992, Nonhematopoietic tumor cell lines express stem cell factor and display c-kit receptor., Blood, 80, 374, 10.1182/blood.V80.2.374.374 Natali, 1992, Expression of c-kit receptor in normal and transformed human nonlymphoid tissues., Cancer Res, 52, 6139 Pietsch, 1992, Effects of human stem cell factor (c-kit ligand) on proliferation of myeloid leukemia cells: Heterogeneity in response and synergy with other hematopoietic growth factors., Blood, 80, 1199, 10.1182/blood.V80.5.1199.1199 Krystal, 1996, Autocrine growth of small cell lung cancer mediated by co-expression of c-kit and stem cell factor., Cancer Res, 56, 370 Hines, 1995, Co-expression of the c-kit and stem cell factor genes in breast carcinomas., Cell Growth Differ, 6, 769 Cohen, 1994, Expression of stem cell factor and c-kit in human neuroblastoma., Blood, 84, 3465, 10.1182/blood.V84.10.3465.3465 Timues, 1997, Stem cell factor suppresses apoptosis in neuroblastoma cell lines., Exp Hematology, 25, 1253 Cavazzana, 1987, Experimental evidence for s neuronal origin of Ewing's Sarcoma of Bone., Am J Pathol, 127, 507 Pagani, 1995, Neural and mesenchymal differentiations in Ewing's Sarcoma cell lines. Morphological, immunophenotypic, molecular biological and cytogenetic evidence., Int J Cancer, 63, 738, 10.1002/ijc.2910630522 Rosolen, 1997, Expression of type I Interferon receptor in solid tumors of childhood., Mod Pathol, 10, 55 Avanzi, 1990, M-07e human leukemic factor-dependent cell line provides a rapid and sensitive bioassay for the human cytokines GM-CSF and IL3., J Cell Physiol, 145, 458, 10.1002/jcp.1041450310 Lund-Johansen, 1996, Apoptosis in hemopoietic cells is associated with an extensive decrease in cellular phosphotyrosine content that can be inhibited by the tyrosine phosphatase antagonist pervanadate., Cytometry, 25, 182, 10.1002/(SICI)1097-0320(19961001)25:2<182::AID-CYTO7>3.0.CO;2-J Brizzi, 1996, Convergence of signaling by interleukin 3 granulocyte-macrophage colony stimulating factor and mast cell growth factor on JAK2 tyrosine kinase., J Biol Chem, 269, 31680, 10.1016/S0021-9258(18)31749-6 Gorczyca, 1993, Detection of DNA strand breaks in individual apoptotic cells by the in situ terminal deoxynucleotidyl transferase and nick translation assay., Cancer Res, 53, 3186 Brandt, 1992, Role of c-kit ligand in the expression of human hematopoietic progenitor cells., Blood, 79, 634, 10.1182/blood.V79.3.634.634 McNiece, 1991, Recombinant human cell factor synergizes with GM-CSF, G-CSF, IL-3 and EPO to stimulate human progenitor cells of myeloid and erythroid lineages., Exp Hematol, 19, 226 Caceres-Cortes, 1994, Product of the steel locus suppresses apoptosis in hemopoietic cells., J Biol Chem, 269, 12084, 10.1016/S0021-9258(17)32684-4 Papadimitriou, 1995, Recombinant human stem cell factor does exert minor stimulation of growth in small cell lung cancer and melanoma cell lines., Eur J Cancer, 31, 2371, 10.1016/0959-8049(95)00438-6
Thông tin
Thông tin xuất bản

Blood

Tập 91

2397-2405

Thông tin tác giả