Young-woo Eom1, Seong Hyun Jeong2, Jin-Hyuk Choi3, Seok Yun Kang3, Hyun Woo Lee3, Mal Sook Yang4, Hyo Eun Kim4, In Keun Jang4, Jong Eun Lee4, Yeong Jin Kim4, Hugh Chul Kim3, Yoon Ho Hwang5, Mi Sun Ahn5, Joon Seong Park5
1Biomedical Research Institute, LifeCord Inc., Suwon, South Korea
2Department of Hematology-Oncology, Ajou University School of Medicine, Suwon
3Ajou University School of medicine
4Biomedical Research Institute, LifeCord Inc.
5Hematology-Oncology, Ajou University Hospital, Seoul, South Korea
Tóm tắt
Đánh giá
Mục đích: Trong quá trình cấy ghép máu cuống rốn (UCB), sự tái sinh nhanh hơn có thể dẫn đến kết quả lâm sàng tốt hơn. Bởi vì số lượng tế bào sống được cấy ghép trong UCB liên quan đến sự tái sinh, chúng tôi đã kiểm tra các tế bào UCB cryopreserved bằng nhiều phương pháp khác nhau sau khi rã đông.
Phương pháp: Độ sống sót của các tế bào cryopreserved được kiểm tra bằng cách sử dụng thử nghiệm trypan blue, phân tích nội dung DNA, kiểm tra hoạt động caspase-3, hoạt động esterase nội bào và nhuộm Annexin-V/PI.
Kết quả: Tổng cộng có 60 mẫu được sử dụng trong nghiên cứu này. Sau khi rã đông, 89% tổng số tế bào hạt lớn và 84% tế bào CD34+ sống sót được xác định bằng thử nghiệm loại trừ trypan blue. Trong quần thể tế bào CD34+, tỷ lệ tế bào chết được phát hiện là 47 % qua nhuộm Annexin-V/PI và ít hơn 5 % qua phân tích nội dung DNA. Hoạt động caspase-3 không ghi nhận được sự chết tế bào. Thử nghiệm hoạt động esterase nội bào cũng cho thấy tỷ lệ tế bào chết khoảng 10–20 % sau 2, 4 và 6 giờ sau khi rã đông.
Kết luận: Các tế bào sống trong UCB nên được đo bằng nhiều kỹ thuật bù trừ thay vì chỉ một phương pháp. Sự không nhất quán giữa nhuộm Annexin-V/PI so với loại trừ trypan blue, phân tích nội dung DNA và thử nghiệm hoạt động caspase-3 hoặc hoạt động esterase nội bào cần được làm rõ để áp dụng những kỹ thuật này cho cấy ghép máu cuống thực tế.
