Hai kháng thể đơn dòng nhắm tới actin: Một kháng thể chọn lọc cho cơ và một kháng thể phản ứng chung

Wiley - Tập 10 Số 3 - Trang 349-362 - 1988
J L Lessard1
1Molecular Cytology Laboratory, Children's Hospital Research Foundation, Cincinnati, Ohio 45229.

Tóm tắt

Tóm tắtHai kháng thể IgG1, κ đơn dòng chống lại actin đã được thu nhận từ một kỹ thuật hợp nhất trong đó actin từ dạ dày gà được sử dụng làm miễn dịch. Một kháng thể được chỉ định là B4, cho thấy sự phản ứng ưu tiên đối với actin cơ trơn ruột nhưng cũng phản ứng chéo với actin cơ vân, cơ tim và actin động mạch chủ dựa trên các kết quả từ các thử nghiệm immunoblots, thử nghiệm ELISA và miễn dịch huỳnh quang gián tiếp. Tuy nhiên, kháng thể này không phản ứng với actin tế bào chất trong bất kỳ hệ thống thử nghiệm nào. Một kháng thể đơn dòng thứ hai, được chỉ định là C4, phản ứng với cả sáu isoactin được biết đến của động vật có xương sống cũng như actin trong Dictyostelium discoideum và Physarum polycephalum. Do đó, kháng thể B4 có vẻ như phản ứng với một epitope mà ít nhất một phần được chia sẻ giữa các actin cơ nhưng không có ở các actin tế bào chất, trong khi kháng thể C4 liên kết với một định danh kháng nguyên đã được bảo tồn rất cao giữa các actin. Các vị trí liên kết của cả hai kháng thể trên actin cơ vân chồng lên vị trí của DNase I của tuyến tụy. Cả hai kháng thể đều liên kết với một sản phẩm proteolytic SV8 gồm hai phần ba amino đầu của phân tử actin, và các epitope của chúng có vẻ như chồng lấn nhau vì C4 có thể cạnh tranh với sự liên kết của B4 với actin cơ vân. Không có kháng thể nào có khả năng ngăn chặn quá trình polymer hóa actin.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1073/pnas.80.6.1506

10.1073/pnas.80.6.1738

Cleveland D.W. Fischer S.G. Kirschner M.W. andLaemmli U.K.(1977) Peptide mapping by limited proteolysis in sodium dodecyl sulfate and analysis by gel electrophoresis.J. Biol. Chem.1102–1106.

10.1101/SQB.1973.037.01.062

10.1038/266550a0

10.1016/0092-8674(76)90142-2

10.1083/jcb.100.3.807

Halenda D., 1984, Evidence for the presence of actin in guinea pig spermatogenic cells and its loss prior to formation of mature sperm, J. Cell Biol., 99, 394a

10.1083/jcb.80.3.509

10.1038/227680a0

10.1073/pnas.71.12.4742

10.1016/0003-2697(79)90803-0

Lessard J.L., 1982, Hybridoma antibodies to gizzard actin binding to epitopes that are either unique or shared with other actins, Hybridoma, 1, 198

Lessard J.L., 1983, Immunofluorescent localization of actins in differentiating chick myoblasts, J. Cell Biol., 97, 74a

10.1016/0014-4827(84)90649-9

10.1083/jcb.86.3.891

10.1073/pnas.81.12.3680

10.1016/S0021-9258(19)41496-8

Oosawa F., 1971, Actin Biol. Macromol., 5, 261

10.1083/jcb.102.5.1726

10.1016/0092-8674(83)90293-3

10.1152/physrev.1972.52.3.631

10.1073/pnas.74.1.120

10.1038/276269a0

10.1083/jcb.99.1.287

Spudich J.A., 1971, The regulation of rabbit skeletal muscle contraction I. Biochemical studies of the interaction of the tropomyosin‐troponin complex with actin and the proteolytic fragments of myosin, J. Biol. Chem., 246, 4806

Strauch A.R., 1984, Induction of vascular smooth muscle alpha‐isoactin expression in BC3H1 cells, J. Biol. Chem., 259, 3152, 10.1016/S0021-9258(17)43274-1

10.1021/bi00304a009

Vandekerchove J., 1978, Actin amino acid sequences, Eur. J. Biochem, 90, 451

10.1111/j.1432-0436.1979.tb01021.x

10.1111/j.1432-1033.1981.tb05104.x

10.1021/bi00508a020

Wang S.M., 1985, Studies on cardiac myofibrillogenesis with antibodies to titin, actin, tropomyosin, and myosin, J. Cell Biol., 101, 170a

Thông tin
Thông tin xuất bản

Wiley

Tập 10 Số 3

349-362

Thông tin tác giả