Di Zhou1, Tiancheng Liu1, Xiaoying Zhou1, Guangxiu Lu1
1Institute of Reproductive & Stem Cell Engineering, Central South University, National Engineering & Research Center of Human Stem Cells, No. 86 Xiangya Road, Changsha, Hunan 410078, PR China
Tóm tắt
Tóm tắtMặc dù việc phát triển một hệ thống nuôi cấy không cần thêm tế bào hỗ trợ (feeder) cho các ứng dụng trong tương lai của tế bào gốc phôi người (hESCs), hiện tại hệ thống nuôi cấy thông thường vẫn sử dụng tế bào nguyên bào sợi phôi chuột (mEFs) đã bị bất hoạt qua biện pháp phân bào làm tế bào hỗ trợ để duy trì sự không biệt hóa của hESCs. Mitomycin C (MMC) được sử dụng để bất hoạt mEFs, nhưng điều này gây tổn thương DNA, và chưa rõ liệu MMC còn tồn tại trong hệ thống nuôi cấy sau nhiều lần rửa hay không. Ba biến số đã được đánh giá liên quan đến việc chuẩn bị tế bào hỗ trợ và sự tham gia của MMC, bao gồm sự tiếp xúc của mEF với MMC, mật độ tế bào hỗ trợ, và các bước rửa khác nhau trong quá trình chuẩn bị tế bào hỗ trợ. Các biến số này rất quan trọng đối với việc trồng hESCs sau này vì dư lượng của MMC sẽ không an toàn cho việc nuôi cấy lâu dài tế bào gốc phôi. Dữ liệu mới độc đáo ở đây đánh giá lượng dư lượng của MMC trong hệ thống nuôi cấy hESCs bằng công nghệ HPLC/MS/MS. Mục tiêu cuối cùng của nghiên cứu này là kiểm soát mức độ của MMC trong một phạm vi an toàn.
Từ khóa
#tế bào gốc phôi người #tế bào hỗ trợ #Mitomycin C #nuôi cấy tế bào #khả năng sinh sản tế bào.Tài liệu tham khảo
10.1038/292154a0
Hata T., 1956, Mitomycin, a new antibiotic from stretomyces, J Antibiot (Tokyo), 9, 141
10.1290/0407052.1
10.1002/cbf.1221
10.1073/pnas.78.12.7634
10.1073/pnas.72.4.1441
10.1016/j.jpba.2005.06.024
10.1073/pnas.41.7.432
10.1038/74447
10.1126/science.282.5391.1145
10.1016/j.bbrc.2004.01.089
