Nhắm đến SPARC thông qua RNA can thiệp trung gian lentivirus ức chế sự phát triển và di căn của tế bào ung thư cổ tử cung
Tóm tắt
Protein được tiết ra mang tính acid và giàu cysteine (SPARC), một glycoprotein liên kết canxi trong ma trận, có liên quan đến quá trình tiến triển của một số loại ung thư. Tuy nhiên, đến nay chưa có thông tin nào về chức năng của SPARC trong sự phát triển và di căn của tế bào ung thư cổ tử cung.
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tách và thiết lập các dòng con xâm lấn cao và xâm lấn thấp từ hai dòng tế bào ung thư cổ tử cung người HeLa và SiHa bằng phương pháp pha loãng giới hạn. Các phương pháp q-RT-PCR thời gian thực, Western Blot và ICC đã được thực hiện để khảo sát sự biểu hiện mRNA và protein của SPARC ở các dòng con xâm lấn cao và thấp. Sau đó, vector lentivirus với SPARC shRNA đã được xây dựng và nhiễm vào các dòng con xâm lấn cao. Các phương pháp q-RT-PCR thời gian thực, Western Blot và ICC cũng được thực hiện để điều tra sự thay đổi của biểu hiện SPARC sau khi nhiễm virus. Trong các thử nghiệm chức năng, ảnh hưởng của việc giảm SPARC đến các hành vi sinh học của tế bào ung thư cổ tử cung đã được nghiên cứu. Các cơ chế của SPARC trong sự phát triển, apoptosis và xâm lấn của ung thư cổ tử cung cũng đã được điều tra.
Từ khóa
#SPARC #ung thư cổ tử cung #xâm lấn #apoptosis #lentivirus #RNA can thiệpTài liệu tham khảo
Parkin DM, Bray FI, Devesa SS: Cancer burden in the year 2000. The global picture. Eur J Cancer. 2001, 37 (Suppl 8): S4-66.
Sheng X, Du X, Zhang X, et al: Clinical value of serum SPARC levels in early detection of recurrent squamous cell carcinoma of uterine cervix: comparison with serum SCCA, CYFRA21-1, and CEA levels. Croat Med J. 2009, 50 (5): 455-464. 10.3325/cmj.2009.50.455.
Rao Y, Wang H, Fan L, et al: Silencing MTA1 by RNAi reverses adhesion, migration and invasiveness of cervical cancer cells (SiHa) via altered expression of p53, and E-cadherin/β-catenin complex. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 2011, 31 (1): 1-9. 10.1007/s11596-011-0141-9.
Shibata K, Kajiyama H, Ino K, et al: Twist expression in patients with cervical cancer is associated with poor disease outcome. Ann Oncol. 2008, 19 (1): 81-85.
Termine JD, Kleinman HK, Whitson SW, et al: Osteonectin, a bone-specific protein linking mineral to collagen. Cell. 1981, 26: 99-105. 10.1016/0092-8674(81)90037-4.
Bornstein P, Sage EH: Matricellular proteins: extracellular modulators of cell function. Curr Opin Cell Biol. 2002, 14 (5): 608-616. 10.1016/S0955-0674(02)00361-7.
Chlenski A, Cohn SL: Modulation of matrix remodeling by SPARC in neoplastic progression. Semin Cell Dev Biol. 2010, 21 (1): 55-65. 10.1016/j.semcdb.2009.11.018.
Tai IT, Tang MJ: SPARC in cancer biology: its role in cancer progression and potential for therapy. Drug Resist Updat. 2008, 11 (6): 231-246. 10.1016/j.drup.2008.08.005.
Albini A, Iwamoto Y, Kleinman HK, et al: A rapid in vitro assay for quantitating the invasive potential of tumor cells. Cancer Res. 1987, 47 (12): 3239-3245.
Framson PE, Sage EH: SPARC and tumor growth: where the seed meets the soil?. J Cell Biochem. 2004, 92: 679-690. 10.1002/jcb.20091.
Hsiao YH, Lien HC, Hwa HL, et al: SPARC (osteonectin) in breast tumors of different histologic types and its role in the outcome of invasive ductal carcinoma. Breast J. 2010, 16 (3): 305-308. 10.1111/j.1524-4741.2009.00899.x.
Lien HC, Hsiao YH, Lin YS, et al: Molecular signatures of metaplastic carcinoma of the breast by large-scale transcriptional profiling: identification of genes potentially related to epithelial-mesenchymal transition. Oncogene. 2007, 26 (57): 7859-7871. 10.1038/sj.onc.1210593.
Horie K, Tsuchihara M, Nakatsura T: Silencing of secreted protein acidic and rich in cysteine inhibits the growth of human melanoma cells with G arrest induction. Cancer Sci. 2010, 101 (4): 913-919. 10.1111/j.1349-7006.2009.01476.x.
Girotti MR, Fernández M, López JA, et al: SPARC promotes cathepsin B-mediated melanoma invasiveness through a collagen I/α2β1 integrin axis. J Invest Dermatol. 2011, 131 (12): 2438-2447. 10.1038/jid.2011.239.
Lau CP, Poon RT, Cheung ST, et al: SPARC and Hevin expression correlate with tumour angiogenesis in hepatocellular carcinoma. J Pathol. 2006, 210 (4): 459-468. 10.1002/path.2068.
Le Bail B, Faouzi S, Boussarie L, et al: Osteonectin/SPARC is overexpressed in human hepatocellular carcinoma. J Pathol. 1999, 189 (1): 46-52. 10.1002/(SICI)1096-9896(199909)189:1<46::AID-PATH392>3.0.CO;2-X.
Thomas R, True LD, Bassuk JA, et al: Differential expression of osteonectin/SPARC during human prostate cancer progression. Clin Cancer Res. 2000, 6 (3): 1140-1149.
Chan SK, Griffith OL, Tai IT, et al: Meta-analysis of colorectal cancer gene expression profiling studies identifies consistently reported candidate biomarkers. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2008, 17 (3): 543-552. 10.1158/1055-9965.EPI-07-2615.
Wiese AH, Auer J, Lassmann S, et al: Identification of gene signatures for invasive colorectal tumor cells. Cancer Detect Prev. 2007, 31 (4): 282-295. 10.1016/j.cdp.2007.07.003.
Nagai MA, Gerhard R, Fregnani JH, et al: Prognostic value of NDRG1 and SPARC protein expression in breast cancer patients. Breast Cancer Res Treat. 2011, 126 (1): 1-14. 10.1007/s10549-010-0867-2.
Koblinski JE, Kaplan-Singer BR, VanOsdol SJ, et al: Endogenous osteonectin/SPARC/BM-40 expression inhibits MDA-MB-231 breast cancer cell metastasis. Cancer Res. 2005, 65 (16): 7370-7377. 10.1158/0008-5472.CAN-05-0807.
Said N, Motamed K: Absence of host-secreted protein acidic and rich in cysteine (SPARC) augments peritoneal ovarian carcinomatosis. Am J Pathol. 2005, 167 (6): 1739-1752. 10.1016/S0002-9440(10)61255-2.
Said N, Najwer I, Motamed K: Secreted protein acidic and rich in cysteine (SPARC) inhibits integrinmediated adhesion and growth factor-dependent survival signaling in ovarian cancer. Am J Pathol. 2007, 170 (3): 1054-1063. 10.2353/ajpath.2007.060903.
Atorrasagasti C, Malvicini M, Aquino JB, et al: Overexpression of SPARC obliterates the in vivo tumorigenicity of human hepatocellular carcinoma cells. Int J Cancer. 2010, 126 (11): 2726-2740.
Said N, Frierson HF, Chernauskas D, et al: The role of SPARC in the TRAMP model of prostate carcinogenesis and progression. Oncogene. 2009, 28 (39): 3487-3498. 10.1038/onc.2009.205.
Liang JF, Wang HK, Xiao H, et al: Relationship and prognostic significance of SPARC and VEGF protein expression in colon cancer. J Exp Clin Cancer Res. 2010, 29: 71-10.1186/1756-9966-29-71.
Yang E, Kang HJ, Koh KH, et al: Frequent inactivation of SPARC by promoter hypermethylation in colon cancers. Int J Cancer. 2007, 121 (3): 567-575. 10.1002/ijc.22706.
Sova P, Feng Q, Geiss G, et al: Discovery of novel methylation biomarkers in cervical carcinoma by global demethylation and microarray analysis. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2006, 15 (1): 114-123. 10.1158/1055-9965.EPI-05-0323.
Kahn SL, Ronnett BM, Gravitt PE, et al: Quantitative methylation-specific PCR for the detection of aberrant DNA methylation in liquid-based Pap tests. Cancer. 2008, 114 (1): 57-64. 10.1002/cncr.23258.
Zhang LQ, Jiang F, Xu L, et al: The Role of Cyclin D1 Expression and Patient's Survival in Non-Small-Cell Lung Cancer: A Systematic Review with Meta-Analysis. Clin Lung Cancer. 2012, 13 (3): 188-195. 10.1016/j.cllc.2011.10.003.
Naryzhny SN: Proliferating cell nuclear antigen: a proteomics view. Cell Mol Life Sci. 2008, 65 (23): 3789-3808. 10.1007/s00018-008-8305-x.
Liebermann DA, Hoffman B, Vesely D: p53 induced growth arrest versus apoptosis and its modulation by survival cytokines. Cell Cycle. 2007, 6: 166-170. 10.4161/cc.6.2.3789.
Gartel AL: p21 (WAF1/CIP1) and cancer: a shifting paradigm?. Biofactors. 2009, 35 (2): 161-164. 10.1002/biof.26.
Fenouille N, Robert G, Tichet M, et al: The p53/p21Cip1/ Waf1 pathway mediates the effects of SPARC on melanoma cell cycle progression. Pigment Cell Melanoma Res. 2011, 24 (1): 219-232. 10.1111/j.1755-148X.2010.00790.x.
Kelly PN, Strasser A: The role of Bcl-2 and its pro-survival relatives in tumourigenesis and cancer therapy. Cell Death Differ. 2011, 18 (9): 1414-1424. 10.1038/cdd.2011.17.
Fenouille N, Puissant A, Tichet M, et al: SPARC functions as an anti-stress factor by inactivating p53 through Akt-mediated MDM2 phosphorylation to promote melanoma cell survival. Oncogene. 2011, 30 (49): 4887-4900. 10.1038/onc.2011.198.
Robert G, Gaggioli C, Bailet O, et al: SPARC represses E-cadherin and induces mesenchymal transition during melanoma development. Cancer Res. 2006, 66 (15): 7516-7523. 10.1158/0008-5472.CAN-05-3189.
Smit DJ, Gardiner BB, Sturm RA: Osteonectin downregulates E-cadherin, induces osteopontin and focal adhesion kinase activity stimulating an invasive melanoma phenotype. Int J Cancer. 2007, 121 (12): 2653-2660. 10.1002/ijc.23039.
Kunigal S, Gondi CS, Gujrati M, et al: SPARC-induced migration of glioblastoma cell lines via uPA-uPAR signaling and activation of small GTPase RhoA. Int J Oncol. 2006, 29 (6): 1349-1357.