Jessica C. Harskamp1, Pim L.J. van der Heiden1, Esther H.M. van Egmond1, Sabrina A.J. Veld1, Hans L. Vos1, Constantijn J.M. Halkes1, J.H. Frederik Falkenburg1, Erik W.A. Marijt1
1Dept. of Hematology, Leiden University Medical Center, Leiden, Netherlands
Tóm tắt
摘要
Tóm tắt 1321
Sau khi cấy ghép tế bào gốc đồng loại bị giảm tế bào T (TCD), số lượng bệnh nhân (BN) có sự chimerism hỗn hợp (MC) nhiều hơn so với cấy ghép không TCD. MC thường được đo lường trong các tế bào bạch cầu tủy xương (BM) và được cho là phản ánh sự tồn tại của các tế bào gốc huyết học nhận ra, bao gồm cả dòng tế bào huyết học ác tính. MC liên quan đến tỷ lệ tái phát tăng, trường hợp này có thể điều trị bằng việc truyền tế bào lympho gây ra trước. Chỉ định cấy ghép thường thấy ở BN mắc các bệnh lý huyết học từ tế bào tủy hay tế bào B, và chưa rõ liệu MC trong tế bào bạch cầu BM có thực sự phản ánh được sự tồn tại của các tế bào nhận biết ở các dòng tế bào B hoặc tủy không, vì tổng thể bạch cầu là một đo lường kết hợp về trạng thái chimerism trong các dòng tế bào huyết học khác nhau. Do sự tái sinh tế bào T gần như không có trong 6 tháng đầu sau cấy ghép alloSCT, chimerism tế bào T có khả năng phản ánh sự sống sót và mở rộng của các tế bào T nhận ra còn lại và/hoặc tế bào T người hiến tặng. Do đó, chúng tôi giả thuyết rằng sự MC bạch cầu có thể bị ảnh hưởng mạnh mẽ bởi chimerism tế bào T. Hơn nữa, sự tăng cường MC bạch cầu được cho là liên quan đến sự mở rộng của thành phần có khả năng ác tính. Tuy nhiên, chúng tôi giả thuyết rằng sự tăng cường MC bạch cầu sẽ bị ảnh hưởng bởi các yếu tố kiểm soát chimerism tế bào T. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã điều tra xem chimerism bạch cầu tổng thể sau TCD alloSCT có tương ứng với chimerism đặc hiệu dòng bạch cầu (tế bào B hoặc tủy) hay không và liệu chimerism tế bào T có bị ảnh hưởng bởi các yếu tố miễn dịch như chế độ điều trị, sự kích thích kháng nguyên trong quá trình nhiễm virus hoặc bệnh ghép chống lại chủ (GvHD), gây phức tạp trong việc giải thích MC bạch cầu. Phân tích chi tiết chimerism đặc hiệu dòng đã được thực hiện trên 49 BN nhận cấy ghép TCD alloSCT sau một chế độ điều trị myeloablative (MA) (n=24) hoặc không myeloablative (NMA) (n=25) cho các bệnh lý huyết học. Những BN tái phát trong năm đầu tiên sau alloSCT đã bị loại trừ. Sau 3 tháng từ khi alloSCT, mẫu máu ngoại vi (PB) đã được thu thập và các tế bào B, mono và granulocyte (các tế bào myeloid), tế bào T CD4+ và CD8+ đã được phân loại. Việc tiêu hủy hồng cầu đã được thực hiện để thu lấy phần bạch cầu không phân tách. Sau đó, DNA đã được tách ra để thực hiện phân tích chimerism bằng kỹ thuật PCR ngắn. Trong 71% BN được phân tích, MC được phát hiện trong vùng tế bào T, với tỷ lệ phần trăm trung bình là 25,3% (khoảng 1–100), trong khi chỉ có 21% BN có MC trong các dòng tế bào B và myeloid, với tỷ lệ phần trăm trung bình là 6% (2.1-29.2). Trong vùng tế bào bạch cầu BM, 38% BN có MC với tỷ lệ phần trăm trung bình là 4% (2-46). Trong số BN có MC trong vùng tế bào bạch cầu BM, 33% có MC trong vùng tế bào T và hoàn toàn chimerism người hiến tặng trong vùng tế bào B và myeloid, cho thấy rằng chimerism dòng của tế bào thường không tương ứng với chimerism bạch cầu, vì nó bị ảnh hưởng bởi chimerism tế bào T. Ở những BN cấy ghép NMA, tỷ lệ phần trăm tế bào T nhận ra (42% (0-99.5) được phát hiện là cao hơn nhiều so với BN cấy ghép MA (1.6% (0-99.5). Ở những BN cấy ghép MA, một tỷ lệ phần trăm cao hơn (14% (0-99.5) của tế bào nhận biết đã được phát hiện nếu BN được cấy ghép với người hiến tặng có quan hệ, so với những BN được cấy ghép với người hiến tặng không liên quan hoặc không tương thích (0% (0-5.7) nhận thêm điều trị alemtuzumab như một phần của chế độ điều trị. Những BN phát triển GvHD độ I-II trước 2 tháng sau alloSCT có tỷ lệ phần trăm tế bào T nhận ra thấp hơn đáng kể sau 3 tháng alloSCT (1.7% (0-86.4) so với những BN không có GvHD (61.4% (7.1-99.5). Để phân tích ảnh hưởng của tình trạng CMV huyết thanh của người nhận trước khi cấy ghép lên chimerism tế bào T, những BN được cấy ghép với người hiến tặng có tình trạng huyết thanh CMV âm tính đã được lựa chọn. Những BN dương tính với CMV cho thấy tỷ lệ phần trăm cao hơn của tế bào T CD8 nhận biết (30.5% (0-99.5) so với những BN âm tính với CMV (3.1% (0-97.9), chỉ ra sự tồn tại của các tế bào nhớ CD8 T còn lại sau alloSCT. Tóm lại, những kết quả này cho thấy rằng chimerism bạch cầu BM thường không tương ứng với chimerism tế bào B và myeloid, vì nó chịu ảnh hưởng mạnh mẽ bởi chimerism tế bào T, mà lại bị ảnh hưởng bởi chế độ điều trị và các sự kiện miễn dịch như GvHD và tình trạng huyết thanh CMV. Do đó, để phân tích sự tồn tại các tế bào gốc huyết học nhận thấy bao gồm cả các dòng tế bào huyết học ác tính, cần thực hiện phân tích chimerism dòng đặc hiệu.
