Biểu đồ tế bào đơn với phương pháp phân tích khối lượng thích ứng cho việc đo lường chu kỳ tế bào
Tóm tắt
Cytometry khối lượng là một công nghệ mới được giới thiệu, sử dụng kháng thể gắn đồng vị của nguyên tố chuyển tiếp để phát hiện protein trên cơ sở từng tế bào. Bằng cách vượt qua các hạn chế của sự chồng chéo quang phổ phát xạ liên quan đến các fluorochrome sử dụng trong cytometry dòng truyền thống, cytometry khối lượng hiện cho phép đo tới 40 thông số trên mỗi tế bào. Gần đây, một phân tích cytometry khối lượng toàn diện đã được mô tả cho chương trình phân biệt huyết học trong tủy xương của người từ một người hiến máu khỏe mạnh. Nghiên cứu hiện tại mô tả các phương pháp để phân đoạn các giai đoạn chu kỳ tế bào bằng cách sử dụng 5-iodo-2-deoxyuridine (IdU) để đánh dấu các tế bào trong giai đoạn S, đồng thời với các kháng thể chống lại cyclin B1, cyclin A và histone H3 phosphoryl hóa (S28) đặc trưng cho các giai đoạn chu kỳ tế bào khác. Các quy trình đã được phát triển trong đó một kháng thể chống lại protein retinoblastoma phosphoryl hóa (Rb) tại các serine 807 và 811 được sử dụng để tách biệt các tế bào ở các giai đoạn G0 và G1 của chu kỳ tế bào. Phương pháp cytometry khối lượng này đã cho ra các phân bố chu kỳ tế bào của cả quần thể tế bào bình thường và tế bào ung thư mà tương đương với những gì thu được từ các kỹ thuật cytometry huỳnh quang truyền thống. Chúng tôi đã áp dụng điều này để vẽ bản đồ các giai đoạn chu kỳ tế bào của các tế bào trải rộng qua hệ thống huyết học trong tủy xương người khỏe mạnh như một sự chuẩn bị cho các nghiên cứu sau này với ung thư và các rối loạn khác của dòng này. © 2012 Hiệp hội Quốc tế vì sự Tiến bộ của Cytometry
Từ khóa
Tài liệu tham khảo
Griffin J, 1986, Clonogenic cells in acute myeloblastic leukemia, Blood, 68, 1185–1195, 10.1182/blood.V68.6.1185.1185
Moore MA, 1974, Agar culture studies in 127 cases of untreated acute leukemia: The prognostic value of reclassification of leukemia according to in vitro growth characteristics, Blood, 44, 1–18, 10.1182/blood.V44.1.1.1
Raza A, 1997, Cell cycle kinetic studies in 68 patients with myelodysplastic syndromes following intravenous iodo‐ and/or bromodeoxyuridine, Exp Hematol, 25, 530
Pearce DJ, 2006, AML engraftment in the NOD/SCID assay reflects the outcome of AML: Implications for our understanding of the heterogeneity of AML, Blood, 107, 1166–1173, 10.1182/blood-2005-06-2325
van Lochem EG, 2004, Immunophenotypic differentiation patterns of normal hematopoiesis in human bone marrow: Reference patterns for age‐related changes and disease‐induced shifts, Cytometry Part B: Clinical Cytometry, 60, 1–13
2011, Asymmetric cancer cell division regulated by AKT, Proc Natl Acad Sci, 108, 12845–12850
Gong J, 1994, Unscheduled expression of Cyclin B1 and Cyclin E in several leukemic and solid tumor cell lines, Cancer Res, 54, 4285–4288
Passegue E, 2005, Global analysis of proliferation and cell cycle gene expression in the regulation of hematopoietic stem and progenitor cell fates, J Exp Med, 202, 1599–1611, 10.1084/jem.20050967
Head DR, 2011, Innovative analyses support a role for DNA damage and an aberrant cell cycle in myelodysplastic syndrome pathogenesis, Bone Marrow Res, 2011