Các chuỗi động thái ngắn xác định các mục tiêu của hệ thống bảo vệ CRISPR ở vi sinh vật nhân sơ

Microbiology (United Kingdom) - Tập 155 Số 3 - Trang 733-740 - 2009
Francisco J. M. Mojica1, César Díez‐Villaseñor1, Jesús García‐Martínez1, Cristóbal Almendros1
1Departamento de Fisiología, Genética y Microbiología, Facultad de Ciencias, Universidad de Alicante, E-03080 Alicante, Spain

Tóm tắt

Các trình tự lặp lại ngắn được phân tách thường xuyên (CRISPR) và các protein liên quan đến chúng (CAS) cấu thành một hệ thống phòng vệ chống virus mới mẻ phổ biến trong các prokaryotes. Các trình tự lặp lại được phân tách bởi các đoạn không mã hóa (spacer), một số đoạn trong số đó tương đồng với các trình tự trong các yếu tố di truyền di động. Mặc dù toàn bộ quá trình liên quan vẫn chưa được xác định rõ ràng, nhưng người ta đã biết rằng các đoạn không mã hóa mới được đưa vào vị trí CRISPR của vật chủ trong suốt thách thức từ virus (phage), giúp tạo ra khả năng kháng lại virus một cách đặc hiệu. Hơn nữa, đã được chứng minh rằng sự can thiệp như vậy dựa trên các RNA nhỏ mang theo các đoạn không mã hóa. Những RNA này sẽ hướng dẫn hệ thống bảo vệ tới các phân tử bên ngoài mang theo các trình tự phù hợp với các đoạn không mã hóa. Dù vai trò này là rất thiết yếu, nhưng cơ chế tiếp nhận các đoạn không mã hóa vẫn chưa được giải quyết. Một bước tiến đầu tiên đến từ việc phát hiện các động thái liên quan đến các nguyên liệu đoạn không mã hóa (proto-spacers) của Streptococcus thermophilus, cho thấy sự nhận diện đặc hiệu của các trình tự cho người hiến tặng trong loài này. Tại đây, chúng tôi cho thấy rằng sự bảo tồn của các động thái kề bên proto-spacer (PAMs) là một chủ đề phổ biến cho các hệ thống CRISPR đa dạng nhất. Chuỗi PAM phụ thuộc vào biến thể CRISPR-CAS, ngụ ý rằng có một sự lựa chọn đặc hiệu liên quan đến loại CRISPR (hướng theo động thái) cho các đoạn không mã hóa, điều này sau đó xác định mục tiêu sự can thiệp. PAMs cũng hướng dẫn định hướng của các đoạn không mã hóa trong các dãy lặp lại. Đáng chú ý, các quan sát dựa trên tính cực như vậy cho thấy sự tránh xa sẽ xảy ra đối với việc nhận diện các nguyên liệu đoạn không mã hóa trên các phân tử RNA được phiên mã như một quy luật chung.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Altschul, 1997, Gapped blast and psi-blast: a new generation of protein database search programs, Nucleic Acids Res, 25, 3389, 10.1093/nar/25.17.3389

Barrangou, 2007, CRISPR provides acquired resistance against viruses in prokaryotes, Science, 315, 1709, 10.1126/science.1138140

Beloglazova, 2008, A novel family of sequence-specific endoribonucleases associated with the clustered regularly interspaced short palindromic repeats, J Biol Chem, 283, 20361, 10.1074/jbc.M803225200

Bolotin, 2005, Clustered regularly interspaced short palindrome repeats (CRISPRs) have spacers of extrachromosomal origin, Microbiology, 151, 2551, 10.1099/mic.0.28048-0

Brennecke, 2007, Discrete small RNA-generating loci as master regulators of transposon activity in Drosophila, Cell, 128, 1089, 10.1016/j.cell.2007.01.043

Brouns, 2008, Small CRISPR RNAs guide antiviral defense in prokaryotes, Science, 321, 960, 10.1126/science.1159689

Crooks, 2004, WebLogo: a sequence logo generator, Genome Res, 14, 1188, 10.1101/gr.849004

DeBoy, 2006, Chromosome evolution in the Thermotogales: large-scale inversions and strain diversification of CRISPR sequences, J Bacteriol, 188, 2364, 10.1128/JB.188.7.2364-2374.2006

Deveau, 2008, Phage response to CRISPR-encoded resistance in Streptococcus thermophilus, J Bacteriol, 190, 1390, 10.1128/JB.01412-07

Ebihara, 2006, Crystal structure of hypothetical protein TTHB192 from Thermus thermophilus HB8 reveals a new protein family with an RNA recognition motif-like domain, Protein Sci, 15, 1494, 10.1110/ps.062131106

Haft, 2005, A guild of 45 CRISPR-associated (Cas) protein families and multiple CRISPR/Cas subtypes exist in prokaryotic genomes, PLoS Comput Biol, 1, e60, 10.1371/journal.pcbi.0010060

Horvath, 2008, Diversity, activity and evolution of CRISPR loci in Streptococcus thermophilus, J Bacteriol, 190, 1401, 10.1128/JB.01415-07

Ishino, 1987, Nucleotide sequence of the iap gene, responsible for alkaline phosphatase isozyme conversion in Escherichia coli, and identification of the gene product, J Bacteriol, 169, 5429, 10.1128/JB.169.12.5429-5433.1987

Jansen, 2002, Identification of genes that are associated with DNA repeats in prokaryotes, Mol Microbiol, 43, 1565, 10.1046/j.1365-2958.2002.02839.x

Kawaji, 2008, Exploration of small RNAs, PLoS Genet, 4, e22, 10.1371/journal.pgen.0040022

Kojima, 2008, Systematic survey for novel types of prokaryotic retroelements based on gene neighbourhood and protein architecture, Mol Biol Evol, 25, 1395, 10.1093/molbev/msn081

Kunin, 2007, Evolutionary conservation of sequence and secondary structures in CRISPR repeats, Genome Biol, 8, R61, 10.1186/gb-2007-8-4-r61

Lillestøl, 2006, A putative viral defence mechanism in archaeal cells, Archaea, 2, 59, 10.1155/2006/542818

Makarova, 2002, A DNA repair system specific for thermophilic Archaea and bacteria predicted by genomic context analysis, Nucleic Acids Res, 30, 482, 10.1093/nar/30.2.482

Makarova, 2006, A putative RNA-interference-based immune system in prokaryotes: computational analysis of the predicted enzymatic machinery, functional analogies with eukaryotic RNAi, and hypothetical mechanisms of action, Biol Direct, 1

Mandin, 2007, Identification of new noncoding RNAs in Listeria monocytogenes and prediction of mRNA targets, Nucleic Acids Res, 35, 962, 10.1093/nar/gkl1096

Mojica, 1995, Long stretches of short tandem repeats are present in the largest replicons of the Archaea Haloferax mediterranei and Haloferax volcanii and could be involved in replicon partitioning, Mol Microbiol, 17, 85, 10.1111/j.1365-2958.1995.mmi_17010085.x

Mojica, 2000, Biological significance of a family of regularly spaced repeats in the genomes of Archaea, Bacteria and mitochondria, Mol Microbiol, 36, 244, 10.1046/j.1365-2958.2000.01838.x

Mojica, 2005, Intervening sequences of regularly spaced prokaryotic repeats derive from foreign genetic elements, J Mol Evol, 60, 174, 10.1007/s00239-004-0046-3

Ochman, 1984, Standard reference strains of Escherichia coli from natural populations, J Bacteriol, 157, 690, 10.1128/jb.157.2.690-693.1984

Pourcel, 2005, CRISPR elements in Y ersinia pestis acquire new repeats by preferential uptake of bacteriophage DNA, and provide additional tools for evolutionary studies, Microbiology, 151, 653, 10.1099/mic.0.27437-0

Riehle, 2001, Genetic architecture of thermal adaptation in Escherichia coli, Proc Natl Acad Sci U S A, 98, 525, 10.1073/pnas.98.2.525

Schneider, 1990, Sequence logos: a new way to display consensus sequences, Nucleic Acids Res, 18, 6097, 10.1093/nar/18.20.6097

Sorek, 2008, CRISPR – a widespread system that provides acquired resistance against phages in bacteria and archaea, Nat Rev Microbiol, 6, 181, 10.1038/nrmicro1793

Tang, 2002, Identification of 86 candidates for small non-messenger RNAs from the archaeon Archaeoglobus fulgidus, Proc Natl Acad Sci U S A, 99, 7536, 10.1073/pnas.112047299

Tang, 2005, Identification of novel non-coding RNAs as potential antisense regulators in the archaeon Sulfolobus solfataricus, Mol Microbiol, 55, 469, 10.1111/j.1365-2958.2004.04428.x

Willkomm, 2005, Experimental RNomics in Aquifex aeolicus: identification of small non-coding RNAs and the putative 6S RNA homolog, Nucleic Acids Res, 33, 1949, 10.1093/nar/gki334