Giải quyết và tinh chế ba phosphatase ngoại bào của Salmonella typhimurium
Tóm tắt
Một cuộc khảo sát về các enzym phosphatase hoặc phosphodiesterase của Salmonella typhimurium đã được thực hiện dưới nhiều điều kiện tăng trưởng khác nhau. Các nghiên cứu này đã tiết lộ sự hiện diện của ba enzym chính, tất cả đều đã được tinh chế sau đó: một cyclic 2' ,3'-nucleotide phosphodiesterase (EC 3.1.4.d), một acid hexose phosphatase (EC 3.1.3.2), và một nonspecific acid phosphatase (EC 3.1.3.2). Một enzym thứ tư đã thủy phân bis-(p-nitrophenyl)phosphate nhưng không thủy phân được bất kỳ hợp chất nào khác đã thử nghiệm. Không có bằng chứng nào được tìm thấy cho sự tồn tại của một alkaline phosphatase (EC 3.1.3.1) hoặc một specific 5'-nucleotidase (EC 3.1.3.5) trong S. typhimurium LT2. Cả ba phosphatase đều có thể được đo một cách hiệu quả trong các tế bào nguyên vẹn, điều này gợi ý vị trí periplasmic; tuy nhiên, chúng không được giải phóng dễ dàng bằng các quy trình sốc thẩm thấu. Phosphatase acid không đặc hiệu, đã được tinh chế đến độ đồng nhất rõ ràng, đã tạo ra một dải polypeptide đơn trong cả hệ thống điện di gel natri dodecyl sulfate và gel điện di urê axit.
Từ khóa
Tài liệu tham khảo
Abrell , J. W. 1971 . Ribonuclease I released from Escherichia coli by osmotic shock . Arch. Biochem. Biophys. 142 : 693 - 700 .
Allen , J. M. , and G. Hyncik . 1963 . Localization of alkaline phosphatases in gel matrices following electrophoresis . J. Histochem. Cytochem. 11 : 169 - 175 .
Ames B. N. 1966. Assay of inorganic phosphate total phosphate and phosphatases p. 115-118. In E. F. Neufield and V. Ginsberg (ed.) Methods in enzymology vol. 8. Academic Press Inc New York.
Ames , B. N. , P. E. Hartman , and F. Jacob . 1963 . Chromosomal alterations affecting the regulation of histidine biosynthetic enzymes in Salmonella . J. Mol. Biol. 7 : 23 - 42 .
Ames , G. F. 1974 . Resolution of bacterial proteins by polyacrylamide gel electrophoresis on slabs. Membrane, soluble, and periplasmic fractions . J. Biol. Chem. 249 : 634 - 644 .
Ames , G. F. , and J. Lever , 1970 . Components of histidine transport: histidine-binding proteins and hisP protein . Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 66 : 1096 - 1103 .
Anraku , Y. 1964 . A new cyclic phosphodiesterase having a 3'-nucleotidase activity from Escherichia coli B. I. Purification and some properties of the enzyme . J. Biol. Chem. 239 : 3412 - 3419 .
Anraku , Y. 1964 . A new cyclic phosphodiesterase having a 3'-nucleotidase activity from Escherichia coli B. II. Further studies on substrate specificity and mode of action of the enzyme . J. Biol. Chem. 239 : 3420 - 3424 .
Brockman , R. W. , and L. A. Heppel . 1968 . On the localization of alkaline phosphatase and cycle phosphodiesterase in Escherichia coli . Biochemistry 7 : 2554 - 2562 .
Datta , A. K. , and D. P. Burma . 1972 . Association of ribonuclease I with ribosomes and their subunits . J. Biol. Chem. 247 : 6795 - 6801 .
Davis , B. J. 1964 . Disc electrophoresis-II. Method and application to human serum proteins . Ann. N. Y. Acad. Sci. 121 : 404 - 427 .
Dvorak , H. F. , R. W. Brockman , and L. A. Heppel . 1967 . Purification and properties of two acid phosphatase fractions isolated from osmotic shock fluid of Escherichia coli . Biochemistry 6 : 1743 - 1751 .
Fairbanks , G. , T. L. Steck , and D. F. H. Wallach . 1971 . Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane . Biochemistry 10 : 2606 - 2617 .
Fernley , H. N. , and P. G. Walker . 1966 . The substrate specificity of calf-intestinal alkaline phosphatase . Biochem. J. 99 : 39P - 340 P.
Garen , A. , and C. Levinthal . 1960 . A fine-structure genetic and chemical study of the enzyme alkaline phosphatase ofE. coli. I. Purification and characterization of alkaline phosphatase . Biochim. Biophys. Acta 28 : 470 - 483 .
Glaser , L. , A. Melo , and R. J. Paul . 1967 . Uridine diphosphate sugar hydrolase. Purification of enzyme and protein inhibitor . J. Biol. Chem. 242 : 1944 - 1954 .
Gutnick , D. , J. M. Calvo , T. Klopotowski , and B. N. Ames . 1969 . Compounds which serve as the sole source of carbon or nitrogen for Salmonella typhimurium LT-2 . J. Bacteriol. 100 : 215 - 219 .
Hafkenscheid , J. C. M. 1968 . Properties of an acid phosphatase in Escherichia coli . Biochim. Biophys. Acta 167 : 582 - 589 .
Heppel L. A. 1971. The concept ofperiplasmic enzymes p. 223-247. In L. I. Rothfield (ed.) Structure and function of biological membranes. Academic Press Inc. New York.
Heppel , L. A. , D. R. Harkness , and R. J. Hilmoe . 1962 . A study of the substrate specificity and other properties of the alkaline phosphatase ofEscherichia coli . J. Biol. Chem. 237 : 841 - 846 .
Kepes A. and G. N. Cohen. 1962. Permeation p. 179-221. In I. C. Gunsalus and R. Y. Stanier (ed.) The bacteria vol. 4. Academic Press Inc. New York.
Laemmli , U. K. 1970 . Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 . Nature (London) 227 : 680 - 685 .
Lever , J. E. 1972 . Purification and properties of a component of histidine transport in Salmonella typhimurium. The histidine-binding protein J . J. Biol. Chem. 247 : 4317 - 4326 .
Lichenstein , J. , H. D. Barner and S. S. Cohen . 1960 . The metabolism of exogenously supplied nucleotides by Escherichia coli . J. Biol. Chem. 235 : 457 - 465 .
Lowry , 0. H. , N. J. Rosebrough , A. L. Farr , and R. J. Randall . 1951 . Protein measurement with the Folin phenol reagent . J. Biol. Chem. 193 : 265 - 275 .
Melo , A. , and L. Glaser . 1966 . Nucleotide diphosphate hexose pyrophosphatases . Biochem. Biophys. Res. Commun. 22 : 524 - 531 .
Neu , H. C. 1968 . The 5'-nucleotidases and cyclic phosphodiesterases (3-nucleotidases) of the Enterobacteriaceae . J. Bacteriol. 95 : 1732 - 1737 .
Neu , H. C. , and L. A. Heppel . 1964 . Some observations on the "latent " ribonuclease of Echerichia coli. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 51 : 1267 - 1274 .
Neu , H. C. , and L. A. Heppel . 1965 . The release of enzymes from Escherichia coli by osmotic shock and during the formation of spheroplasts . J. Biol. Chem. 240 : 3685 - 3692 .
Nossal , N. E. , and L. A. Heppel . 1966 . The release of enzymes by osmotic shock from Escherichia coli in exponential phase . J. Biol. Chem. 241 : 3055 - 3062 .
Rogers , D. , and F. J. Reithel . 1960 . Acid phosphatases of Escherichia coli . Arch. Biochem. Biophys. 89 : 97 - 104 .
Schlesinger , M. J. , and R. Olsen . 1968 . Expression and localization of Escherichia coli alkaline phosphatase synthesized in Salmonella typhimurium cytoplasm . J. Bacteriol. 96 : 1601 - 1605 .
Spahr , P. F. , and B. R. Hollingsworth . 1961 . Purification and mechanism of action of ribonuclease from Escherichia coli ribosomes . J. Biol. Chem. 236 : 823 - 831 .
Takayama , K. , D. H. MacLennan , A. Tzagoloff , and C. D. Stoner . 1964 . Studies on the electron transfer system. LXVII. Polyacrylamide gel electrophoresis of the mitochondrial electron transfer complexes . Arch. Biochem. Biophys. 114 : 223 - 230 .
Torriani A. 1968. Alkaline phosphatase of Escherichia coli p. 212-218. In L. Grossman and K. Moldave (ed.) Methods in enzymology vol. 12 part B. Academic Press Inc. New York.
Uerkvitz , W. , 0. Karlstrom , and A. Munch-Peterson . 1973 . A deoxyuridine monophosphate phosphatase detected in mutants of Escherichia coli lacking alkaline phosphatase and 5'-nucleotidase . Mol. Gen. Genet. 121 : 337 - 346 .
Vogel , H. J. , and D. M. Bonner . 1956 . Acetylornithinase ofEscherichia coli: partial purification and some properties . J. Biol. Chem. 218 : 97 - 106 .