Đo chỉ số khúc xạ trong các tế bào sống bằng kính hiển vi pha-độ lớn định lượng và kính hiển vi huỳnh quang

Chỉ số khúc xạ (RI) của vật liệu tế bào cung cấp thông tin sinh lý học cơ bản về thành phần và cấu trúc tổ chức của tế bào. Những nỗ lực mô tả tính chất khúc xạ của tế bào đã bị cản trở đáng kể bởi những khó khăn thực nghiệm trong việc đo chỉ số khúc xạ của tế bào sống. Trong báo cáo này, chúng tôi mô tả một thủ tục ứng dụng kính hiển vi pha định lượng kết hợp với kính hiển vi huỳnh quang để đo chỉ số khúc xạ của một mẫu tế bào cơ nuôi cấy.

Chiến lược thí nghiệm bao gồm việc tính toán độ dày của tế bào bằng cách sử dụng quy trình cắt lớp quang học huỳnh quang, xây dựng bản đồ pha của cùng một tế bào bằng kính hiển vi pha định lượng, và lựa chọn các vùng tế bào quan tâm để giải quyết chỉ số khúc xạ tế bào.

Giá trị độ dày trung bình của tế bào và giá trị pha cho sáu vùng tế bào (năm vùng tế bào chất và một vùng nhân) đã được xác định. Giá trị chỉ số khúc xạ trung bình tính toán cho các vùng tế bào chất và nhân là 1.360 ± 0.004. Sự không chắc chắn trong giá trị chỉ số khúc xạ cuối cùng đại diện cho sai số đo lường kỹ thuật.

Phương pháp mà chúng tôi mô tả để đo chỉ số khúc xạ của tế bào sống với mẫu tế bào nguyên mẫu này có ứng dụng rộng rãi trong nghiên cứu sự phát triển và phản ứng chức năng của tế bào. Giá trị chỉ số khúc xạ mà chúng tôi báo cáo có thể được sử dụng trong phân tích quang học cấu trúc và hình thái tế bào nuôi cấy. © 2005 Wiley‐Liss, Inc.