Sự thu hút các đại thực bào được đánh dấu bởi các huyết khối tĩnh mạch thí nghiệm

Mục tiêu. Tiêm các đại thực bào đã được kích thích sản xuất các chất hoạt hóa tiêu fibrin và các yếu tố điều hòa sự phân chia tế bào, di chuyển và trưởng thành, có thể tăng cường sự giải quyết huyết khối tĩnh mạch. Mục tiêu của nghiên cứu này là xác định quá trình thu hút các đại thực bào tiêm vào huyết khối tĩnh mạch trong một mô hình thích hợp của bệnh này. Thiết kế và phương pháp. Huyết khối được sinh ra ở tĩnh mạch chủ dưới của chuột đực Wistar bằng cách giảm lưu lượng (hẹp 80-90%). Thành mạch đã được xem xét ở thời điểm 1 giờ bằng kính hiển vi điện tử quét. Các huyết khối đang giải quyết với tĩnh mạch chủ xung quanh được thu thập sau 1, 7, 14 và 21 ngày sau khi gây ra (n = 8). Các mẫu, được lấy cách nhau 0.5 mm (10-15 mẫu cho mỗi huyết khối), đã được nhuộm bằng hematoxylin, Martius Scarlet Blue và kháng thể chống lại đại thực bào, tiểu cầu và fibrin. Các mẫu từ huyết khối tĩnh mạch người (n = 4) cũng được nhuộm tương tự. Khu vực chiếm đóng bởi đại thực bào (tính bằng đơn vị pixel tương đối, RPU) được xác định bằng phân tích hình ảnh hỗ trợ máy tính. Các đại thực bào máu ngoại biên của chuột đã được chiết xuất, gắn nhãn huỳnh quang và tiêm tĩnh mạch vào 7 con chuột trước khi gây huyết khối. Tĩnh mạch chủ có huyết khối đã được thu hoạch 1 h, 2, 3, 4, 7, 14 và 25 ngày sau khi gây ra và độ huỳnh quang của chúng được đo. Thành phần huỳnh quang của thành tĩnh mạch và huyết khối đã được phân tích chi tiết hơn vào 2 và 25 ngày sau khi gây huyết khối (n = 4 tại mỗi khoảng thời gian). Kết quả. Huyết khối thí nghiệm có cấu trúc tương tự như huyết khối ở người và đã giải quyết trong khoảng thời gian 14-21 ngày. Kính hiển vi điện tử quét cho thấy tổn thương nội mạc tối thiểu ở 1 giờ với các dấu hiệu hình thành huyết khối sớm (sự lắng đọng của tiểu cầu, tế bào hồng cầu, bạch cầu và fibrin). Bạch cầu trung tính là bạch cầu chiếm ưu thế trong huyết khối vào ngày thứ nhất, trong khi đó đại thực bào chỉ chiếm 0.3% (0.04% sem) của diện tích huyết khối. Có sự gia tăng ổn định về số lượng đại thực bào trong huyết khối và đến 21 ngày, phần trăm diện tích huyết khối được đại thực bào bao phủ đã tăng hơn 35 lần lên 11.5% (2.3% sem) (p <0.001). Ban đầu, các đại thực bào xuất hiện xung quanh rìa của huyết khối và trở nên phân bố đều hơn trong huyết khối khi quá trình giải quyết diễn tiến. Các đại thực bào đã được gắn nhãn có thể được tìm thấy trong tuần hoàn lên đến 1 tuần sau khi tiêm. Thành phần huỳnh quang (RPU) của huyết khối đã tăng lên trong 25 ngày (RPU trung bình tại 2 ngày 0.012, sem 0.005; RPU trung bình tại 25 ngày 1.062, sem 0.252, p = 0.008). Số lượng đại thực bào được gắn nhãn ở thành mạch đạt đỉnh vào ngày thứ 2 và sau đó giảm xuống.