PCR định lượng thời gian thực.
Tóm tắt
Chúng tôi đã phát triển một phương pháp PCR định lượng "thời gian thực" mới. Phương pháp này đo sự tích lũy của sản phẩm PCR qua một đầu dò fluorogenic gắn nhãn kép (tức là, đầu dò TaqMan). Phương pháp này cung cấp phép đo định lượng số lượng bản sao gene rất chính xác và nghiêm ngặt. Không giống như các phương pháp PCR định lượng khác, PCR thời gian thực không yêu cầu xử lý mẫu sau PCR, ngăn ngừa sự lây nhiễm tiềm ẩn qua lại của sản phẩm PCR và dẫn đến các xét nghiệm nhanh hơn và hiệu suất cao hơn. Phương pháp PCR định lượng thời gian thực có một phạm vi động rất lớn trong việc xác định phân tử mục tiêu bắt đầu (ít nhất là năm bậc độ lớn). PCR định lượng thời gian thực cực kỳ chính xác và ít tốn công sức hơn các phương pháp PCR định lượng hiện tại.
Từ khóa
#PCR định lượng thời gian thực #đầu dò TaqMan #gen bản sao #nhiễm tiềm ẩn #phương pháp định lượng #tốc độ cao #phạm vi động.Tài liệu tham khảo
1995, Use of a fluorogenic probe in a PCR-based assay for the detection of Listeria monocytogenes., App. Environ. Microbiol., 61, 3724, 10.1128/aem.61.10.3724-3728.1995
1991, Quantitative evaluation of mRNA levels., Meth. Mol. Cell. Biol., 2, 189
1993, Increased viral burden and cytopathicity correlate temporally with CD4 + T-lymphocyte decline and clinical progression in human immunodeficiency virus type 1-infected individuals., J. Virol., 67, 1772, 10.1128/jvi.67.4.1772-1777.1993
1992, Quantitative or semi-quantitative PCR: Reality versus myth., PCR Methods Applic., 2, 1, 10.1101/gr.2.1.1
1995, Changes in the viral mRNA expression pattern correlate with a rapid rate of CD4 + T-cell number decline in human immunodeficiency virus type 1-infected individuals., J. Virol., 69, 2092, 10.1128/jvi.69.4.2092-2100.1995
Gibson, U.E.M., C.A. Heid, and P.M. Williams. 1996. A novel method for real time quantitative competitive RT-PCR. Genome Res. (this issue).
1990, Transient production of proteins using an adenovirus transformed cell line., DNA Prot. Engin. Tech., 2, 3
1995, IL-13 expression at the sites of allergen challenge in patients with asthma., J. Immun., 155, 2688, 10.4049/jimmunol.155.5.2688
1995, A dominant T cell receptor beta-chain in response to a short ragweed allergen, Amb a 5., J. Immun., 154, 6157, 10.4049/jimmunol.154.11.6157
1995, Oligonucleotides with fluorescent dyes at opposite ends provide a quenched probe system useful for detecting PCR product and nucleic acid hybridization., PCR Methods Applic., 4, 357, 10.1101/gr.4.6.357
1994, Rapid and simple PCR assay for quantitation of human immunodeficiency virus type 1 RNA in plasma: Application to acute retroviral infection., J. Clin. Microbiol., 32, 292, 10.1128/jcm.32.2.292-300.1994
1993, Quantitative competitive polymerase chain reaction for accurate quantitation of HIV DNA and RNA species., BioTechniques, 14, 70
1994, PAF and TNF increase the precursor of NF-kappa B p50 mRNA in mouse intestine: Quantitative analysis by competitive PCR., Biochim. Biophys. Acta, 1215, 157, 10.1016/0005-2760(94)90105-8