Purification nhanh protease hoạt hóa bởi canxi bằng phương pháp sắc ký tương tác thủy phân phụ thuộc vào canxi

FEBS Letters - Tập 186 - Trang 246-250 - 1985
Rayudu Gopalakrishna1, James F. Head1
1Department of Physiology, Boston University School of Medicine, 80 East Concord St., Boston, MA 02118, USA

Tóm tắt

Cả hai dạng protease hoạt hóa bởi canxi cần ít Ca2+ và nhiều Ca2+ (calpain I và II) đều được phát hiện có khả năng gắn kết với phenyl‐Sepharose theo cách phụ thuộc vào canxi, gợi ý rằng cả hai enzyme đều phơi bày một vùng bề mặt kỵ nước trong sự hiện diện của Ca2+. Sự có mặt của leupeptin trong dung dịch đệm cột đã ngăn ngừa sự mất hoạt tính trong quá trình sắc ký tương tác thủy phân và sắc ký hấp phụ trên cơ chất. Dưới các điều kiện này, calpain II (dạng yêu cầu nhiều canxi) đã được tinh sạch nhanh chóng từ não bò và cơ xương thỏ bằng cách sử dụng các cột phenyl‐Sepharose liên tiếp và casein‐Sepharose.

Từ khóa

#calpain #protease #sắc ký tương tác thủy phân #canxi #phenyl‐Sepharose

Tài liệu tham khảo

10.1016/0065-2571(81)90026-1 10.1021/bi00655a020 10.1093/oxfordjournals.jbchem.a132111 10.1016/0014-5793(80)81326-3 10.1021/bi00260a012 10.1016/S0021-9258(17)41010-6 10.1021/bi00846a014 10.1016/S0021-9258(17)40664-8 10.1021/bi00543a014 10.1016/0005-2744(81)90270-9 10.1016/0014-5793(82)80933-2 10.1016/S0021-9258(20)81943-7 10.1016/S0021-9258(18)33173-9 10.1016/S0021-9258(18)32150-1 10.1016/S0021-9258(18)34244-3 10.1016/S0021-9258(18)34557-5 10.1016/S0021-9258(18)32139-2 10.1042/bj1830339 Shigeta K., 1980, Biochem. Int., 9, 327 10.1016/S0021-9258(19)70253-1 10.1021/bi00557a025 10.1016/0006-291X(82)90712-4 10.1016/S0021-9258(18)32939-9 Anderson W.B., 1985, Curr. Top. Cell. Reg. 10.1016/0003-2697(74)90139-0 10.1016/0003-2697(73)90280-7 10.1038/227680a0 10.1016/0003-2697(76)90527-3 10.1093/oxfordjournals.jbchem.a134166 10.3109/10409238009105467 10.1038/312566a0
Thông tin
Thông tin xuất bản

FEBS Letters

Tập 186

246-250

Thông tin tác giả