Những thay đổi nhanh chóng trong biểu hiện kháng nguyên bề mặt của các bạch cầu đơn nhân máu được nuôi cấy trong môi trường lơ lửng hoặc dính vào nhựa

Kháng nguyên bề mặt tế bào được sử dụng như dấu hiệu phân hóa in vivo có thể không ổn định trên các bạch cầu đơn nhân được duy trì dưới các điều kiện nuôi cấy in vitro khác nhau. Bạch cầu đơn nhân được tách ra từ máu bằng cách ly tâm trên Percoll hoặc bằng cách bám vào các đĩa nhựa, và các tế bào được nuôi cấy trong môi trường lơ lửng hoặc dưới dạng lớp đơn bám dính. Ban đầu, các bạch cầu đơn nhân thu được bằng cả hai phương pháp có kích thước, hình thái và sự biểu hiện kháng nguyên bề mặt tương tự, được phát hiện bằng các kháng thể đơn dòng kháng bạch cầu đơn nhân OKM1, FMC17, PHM2 và PHM3. Sau khi nuôi cấy, các tế bào duy trì trong môi trường lơ lửng chủ yếu là nhỏ, trong khi các tế bào bám dính vào nhựa nhanh chóng tăng kích thước; tuy nhiên, nhuộm hóa học tế bào đối với esterase không đặc hiệu và phosphatase acid cho thấy hoạt động enzym tăng lên của các bạch cầu đơn nhân trong cả hai hệ thống, có thể phản ánh sự trưởng thành của tế bào tăng lên. Sự khác biệt nổi bật nhất là sự mất mát đáng kể kháng nguyên FMC17 của hầu hết các bạch cầu đơn nhân trong vòng bốn giờ ở môi trường nuôi cấy lơ lửng, so với sự gia tăng về chất lượng và số lượng trong biểu hiện của các tế bào bám vào nhựa trong vòng hai giờ. Những thay đổi này xảy ra ngay cả khi các tế bào được phản ứng trước với lipopolysaccharide. Các bạch cầu đơn nhân lấy từ môi trường nuôi cấy lơ lửng và để bám dính vào nhựa nhanh chóng tổng hợp được kháng nguyên, một quá trình bị ức chế bởi cycloheximide, và ngược lại, các tế bào được loại bỏ khỏi nhựa cho thấy sự giảm dần trong biểu hiện kháng nguyên FMC17 khi chuyển sang nuôi cấy lơ lửng. Không có vai trò chức năng nào trong sự bám dính hay thực bào đã được tìm thấy cho kháng nguyên FMC17. Các kết quả cho thấy rằng sự biểu hiện kháng nguyên có thể phụ thuộc nhiều vào trạng thái thể chất của các tế bào cũng như vào các sự kiện kích hoạt hoặc trưởng thành rõ ràng.