Sản xuất phage lai hiển thị epitop proteinase aspartyl được tiết ra của Candida albicans và ứng dụng của nó trong chẩn đoán căn bệnh nhiễm nấm toàn thân

Mycoses - Tập 50 Số 3 - Trang 165-171 - 2007
Qiong Yang1, Quan‐ping Su1, Guiyun Wang1, Dezhong Wen2, Yanhui Zhang1, Huizheng Bao3, Li Wang1
1Institute of Genetics and Cytology, School of Life Sciences, Northeast Normal University, Changchun City, Jilin Province
2School of Basic Medical Sciences, Jilin University, Changchun City, Jilin Province
3Jilin Provincial Tumor Hospital, Changchun, People's Republic of China

Tóm tắt

Tóm tắtCác proteinase aspartyl được tiết ra (Saps) của Candida albicans đã được xác định là các kháng nguyên miễn dịch áp đảo và yếu tố virulence liên quan đến khả năng bám dính và xâm nhập vào mô. Một phage lai hiển thị epitop Sap VKYTS đã được chế tạo bằng cách nhân bản các đoạn DNA tương ứng vào vec tơ pfd88. Tương tự như Sap bản địa, epitop được hiển thị bởi phage đã cho thấy khả năng phản ứng với huyết thanh từ chuột và bệnh nhân bị nhiễm C. albicans hệ thống, nhưng không phản ứng với những người mắc bệnh nấm miệng họng và những cá nhân khỏe mạnh trong thử nghiệm Western blot. Hơn nữa, một xét nghiệm miễn dịch liên kết enzyme mới đã được phát triển để phát hiện kháng thể chống Sap với phage lai hiển thị epitop Sap VKYTS mà có thể được nhận biết bởi các kháng thể chống Sap. Huyết thanh mẫu thu được tuần tự từ bệnh nhân và chuột mắc bệnh nấm toàn thân và nấm miệng họng, cũng như mẫu huyết thanh từ những cá nhân khỏe mạnh cũng đã được đưa vào nghiên cứu. Độ nhạy và độ đặc hiệu lần lượt là 77% và 88.3% đối với chuột thí nghiệm. Các giá trị này đạt 60% và 85% đối với bệnh nhân người. Những dữ liệu này cho thấy epitop được hiển thị bằng phage này như một tá chất hiệu quả và ít tốn kém sẽ là một công cụ quý giá để phát hiện kháng thể cụ thể đối với Sap trong huyết thanh của bệnh nhân và chuột bị nhiễm C. albicans hệ thống.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1186/1471-2334-6-21

10.1046/j.1439-0507.2002.00709.x

Sendid B, 2002, Combined detection of mannanaemia and antimannan antibodies as a strategy for the diagnosis of systemic infection caused by pathogenic Candida species, J Med Microbiol, 51, 433, 10.1099/0022-1317-51-5-433

10.1002/pro.5560050408

10.1128/MMBR.67.3.400-428.2003

10.1111/j.1439-0507.1988.tb03862.x

Na BK, 1999, Use of monoclonal antibody in diagnosis of candidiasis caused by Candida albicans: detection of circulating aspartyl proteinase antigen, Clin Diagn Lab Immunol, 6, 924, 10.1128/CDLI.6.6.924-929.1999

Morrison CJ, 2003, Competitive binding inhibition enzyme‐linked immunosorbent assay that uses the secreted aspartyl proteinase of Candida albicans as an antigenic marker for diagnosis of disseminated candidiasis, Clin Diagn Lab Immunol, 10, 835

10.1111/j.1574-695X.1997.tb01080.x

10.1016/j.vaccine.2004.07.005

10.1016/0003-2697(87)90587-2

10.1099/00221287-143-2-349

10.1128/AAC.45.11.3195-3197.2001

10.1016/S0022-1759(01)00494-X

10.1111/j.1365-2567.2004.01819.x

10.1001/jama.243.23.2409

De la Cruz VF, 1988, Immunogenicity and epitope mapping of foreign sequences via genetically engineered filamentous phage, J Biol Chem, 263, 4318, 10.1016/S0021-9258(18)68927-6

10.1126/science.4001944

10.1007/BF02883215