Phương Pháp Thử Nghiệm Multiplex PCR Để Phát Hiện Đồng Thời Chín Gene Kháng Kháng Sinh Liên Quan Lâm Sàng TrongStaphylococcus aureus

Journal of Clinical Microbiology - Tập 41 Số 9 - Trang 4089-4094 - 2003
Birgit Strommenger1, Christiane Kettlitz1, Guido Werner1, Wolfgang Witte1
1Robert Koch Institute, Wernigerode Branch, D-38855 Wernigerode, Germany

Tóm tắt

TÓM TẮT

Trong nghiên cứu này, chúng tôi mô tả một phương pháp thử nghiệm multiplex PCR để phát hiện chín gene kháng kháng sinh có liên quan lâm sàng củaStaphylococcus aureus. Các điều kiện đã được tối ưu hóa để khuếch đại các đoạn củamecA (mã hóa khả năng kháng methicillin),aacA-aphD (kháng aminoglycoside),tetK,tetM (kháng tetracycline),erm (A),erm (C) (kháng macrolide-lincosamide-streptogramin B),vat (A),vat (B), vàvat (C) (kháng streptogramin A) đồng thời trong một lần khuếch đại PCR. Một cặp mồi bổ sung để khuếch đại một đoạn của 16S rDNA của vi khuẩn tụ cầu đã được đưa vào như một đối chứng dương tính. Phương pháp multiplex PCR đã được đánh giá trên 30 chủng khác nhau củaS. aureus, và các kết quả PCR tương quan với dữ liệu kháng kháng sinh kiểu hình thu được từ phương pháp pha loãng vi sinh trong môi trường. Phương pháp multiplex PCR cung cấp một phương pháp nhận diện nhanh chóng, đơn giản và chính xác về các mẫu kháng kháng sinh và có thể được sử dụng trong chẩn đoán lâm sàng cũng như để giám sát sự lây lan của các yếu tố xác định kháng kháng sinh trong các nghiên cứu dịch tễ học.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1128/AAC.39.9.2027

10.1016/S0378-1119(97)00464-2

10.1128/AAC.42.7.1794

10.1016/0378-1119(92)90488-B

10.1016/0378-1119(93)90350-C

10.1128/JCM.36.8.2169-2172.1998

10.1086/520182

10.1128/CMR.10.4.781

10.1128/AEM.67.7.3258-3263.2001

10.1086/345476

10.1128/JB.183.24.7341-7353.2001

10.1073/pnas.122108599

10.1128/JCM.41.1.254-260.2003

10.1128/jcm.32.7.1768-1772.1994

10.1128/JCM.38.8.2985-2988.2000

10.2144/97233rr01

10.1053/jhin.1999.0631

10.1016/S0025-7125(05)70307-2

Lee, Y., C. S. Lee, Y. J. Kim, S. Chun, S. Park, Y. S. Kim, and B. D. Han. 2002. Development of DNA chip for the simultaneous detection of various beta-lactam antibiotic-resistant genes. Mol. Cell14:192-197.

10.1128/JCM.37.11.3452-3457.1999

10.1128/AAC.43.5.1062

10.1128/JCM.40.8.2786-2790.2002

10.1128/AAC.44.2.231-238.2000

10.1128/JCM.36.3.618-623.1998

National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2001. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. Approved standard M7-A4 4th ed. National Committee for Clinical Laboratory Standards Wayne Pa.

Schmitz, F. J., A. C. Fluit, M. Gondolf, R. Beyrau, E. Lindenlauf, J. Verhoef, H. P. Heinz, and M. E. Jones. 1999. The prevalence of aminoglycoside resistance and corresponding resistance genes in clinical isolates of staphylococci from 19 European hospitals. J. Antimicrob. Chemother.43:253-259.

10.1093/jac/47.2.239

10.1099/00222615-46-9-773

10.1007/s100960050500

Sievert, M. 2002. Staphylococcus aureus resistant to vancomycin — United States, 2002. Morb. Mortal. Wkly. Rep.51:565-567.

10.1016/S0934-8840(96)80154-X

10.1093/jac/45.6.763

10.1016/S0140-6736(01)05410-1

10.1099/00222615-41-4-282

10.1128/jcm.33.11.2864-2867.1995

10.1128/JCM.39.10.3586-3590.2001

10.1093/jac/dkg104

Witte, W. 1999. Antibiotic resistance in gram-positive bacteria: epidemiological aspects. J. Antimicrob. Chemother.44(Suppl. A):1-9.

10.1086/501845