Nhận dạng, phân loại và truy xuất nguồn gốc của vi khuẩn lam từ các hồ chứa nước ngọt

Microbiology (United Kingdom) - Tập 155 Số 2 - Trang 642-656 - 2009
Elisabete Valério1,2, Lélia Chambel2, Sérgio Paulino1, Natália Faria1, Paulo Pereira1, Rogério Tenreiro2
1Laboratório de Microbiologia e Ecotoxicologia, Instituto Nacional de Saúde Dr Ricardo Jorge, Avenida Padre Cruz, 1649-016 Lisboa, Portugal
2Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, Centro de Biodiversidade, Genómica Integrativa e Funcional (BioFIG), Edifício ICAT, Campus da FCUL, Campo Grande, 1749-016 Lisboa, Portugal

Tóm tắt

Để đánh giá tiềm năng của một số mục tiêu phân tử trong việc xác định, phân loại và truy xuất nguồn gốc của vi khuẩn lam trong các hồ chứa nước ngọt, các kỹ thuật phân tử đã được áp dụng cho 118 thể vi khuẩn lam chủ yếu được thu thập từ các hồ chứa nước ngọt ở Bồ Đào Nha và đại diện cho ba bộ vi khuẩn lam: Chroococcales (54), Oscillatoriales (15) và Nostocales (49). Các thể vi khuẩn này đã được xác định trước đó bằng các phương pháp hình thái và sau đó được đặc trưng bởi phân tích cụm phân cấp tổng hợp dựa trên hồ sơ dấu vân tay PCR của STRR và LTRR (tương tác lặp lại ngắn và dài). Các thể vi khuẩn đại diện đã được chọn từ mỗi cụm và việc xác định phân tử của chúng, ở cấp độ loài, đã được thực hiện hoặc xác nhận thông qua việc định vị filogen bằng gene 16S rRNA và rpoC1. Một sự liên kết mạnh mẽ đã được quan sát giữa các cụm dựa trên STTR và LTRR và sự phân loại thuế tộc, cho thấy tính hữu ích của các hồ sơ dấu vân tay PCR trong việc xác định vi khuẩn lam. Phân tích tổng hợp của cụm phân cấp các vân tay PCR M13 và ERIC cũng phù hợp cho việc phân loại chủng và truy xuất nguồn gốc trong một hồ chứa, cho thấy tiềm năng của nó trong việc giám sát vi khuẩn lam như một công cụ kiểm soát chất lượng. Dựa trên các chỉ số Simpson (D) và Shannon–Wiener (J′), sự đa dạng cao đã được quan sát trong tất cả các loài, với Planktothrix agardhii cho thấy giá trị đa dạng thấp nhất (D=0.83; J′=0.88) và Aphanizomenon flos-aquae có giá trị cao nhất (D=J′=0.99). Một khóa chẩn đoán dựa trên 16S-ARDRA, khuếch đại ITS và ITS-ARDRA cũng được trình bày cho mục đích nhận dạng.

Từ khóa

#vi khuẩn lam #nước ngọt #chỉ thị phân tử #phân loại #truy xuất nguồn gốc

Tài liệu tham khảo

Baker, 1991, Identification of Common Noxious Cyanobacteria Part I – Nostocales : Urban Water Research Association of Australia, Research Report, no

Baker, 1992, Identification of Common Noxious Cyanobacteria Part II – Chroococales Oscillatoriales : Urban Water Research Association of Australia, Research Report, no

Bourrelly, 1970, Les Algues d'Eau Douce: Les Algues Bleus et Rouges, Les Eugléniens, Peridiniens, et Cryptomonadines

Bruno, 2006, Genetic characterization of epilithic cyanobacteria and their associated bacteria, Geomicrobiol J, 23, 293, 10.1080/01490450600760732

Castenholz, 2001, Phylum BX. Cyanobacteria., Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, vol. 1,, 473, 10.1007/978-0-387-21609-6_27

Cavalier-Smith, 2002, The neomuran origin of archaebacteria, the negibacterial root of the universal tree and bacterial megaclassification, Int J Syst Evol Microbiol, 52, 7, 10.1099/00207713-52-1-7

Choi, 2008, Induction of axenic culture of Arthrospira ( Spirulina ) platensis based on antibiotic sensitivity of contaminating bacteria, Biotechnol Lett, 30, 87, 10.1007/s10529-007-9523-2

Gkelis, 2005, Limnothrix redekei (Van Goor) Meffert (Cyanobacteria) strains from Lake Kastoria, Greece form a separate phylogenetic group, Microb Ecol, 49, 176, 10.1007/s00248-003-2030-7

Gugger, 2004, Polyphyly of true branching cyanobacteria (Stigonematales, Int J Syst Evol Microbiol, 54, 349, 10.1099/ijs.0.02744-0

Gugger, 2002, Phylogenetic comparison of the cyanobacterial genera Anabaena and Aphanizomenon, Int J Syst Evol Microbiol, 52, 1867

Huelsenbeck, 2001, MrBayes: Bayesian inference of phylogenetic trees, Bioinformatics, 17, 754, 10.1093/bioinformatics/17.8.754

Huey, 1989, Hypervariable DNA fingerprinting in Escherichia coli : minisatellite probe from bacteriophage M13, J Bacteriol, 171, 2528, 10.1128/jb.171.5.2528-2532.1989

Hunter, 1988, Numerical index of the discriminatory ability of typing systems: an application of Simpson's index of diversity, J Clin Microbiol, 26, 2465, 10.1128/jcm.26.11.2465-2466.1988

Ishida, 2001, Evidence for polyphyletic origin of the members of the orders of Oscillatoriales and Pleurocapsales as determined by 16S rDNA analysis, FEMS Microbiol Lett, 201, 79, 10.1111/j.1574-6968.2001.tb10736.x

Iteman, 2002, rDNA analyses of planktonic heterocystous cyanobacteria, including members of the genera Anabaenopsis and Cyanospira, Microbiology, 148, 481, 10.1099/00221287-148-2-481

Joyner, 2008, Morphological and genetic evidence that the cyanobacterium Lyngbya wollei (Farlow ex Gomont) Spexiale and Dyck encompasses at least two species, Appl Environ Microbiol, 74, 3710, 10.1128/AEM.02645-07

Kaneko, 1996, Sequence analysis of the genome of the unicellular cyanobacterium Synechocystis sp. strain PCC 6803. II. Sequence determination of the entire genome and assignment of potential protein-coding regions, DNA Res, 3, 109, 10.1093/dnares/3.3.109

Kaneko, 2001, Complete genomic sequence of the filamentous nitrogen-fixing cyanobacterium Anabaena sp. strain PCC 7120, DNA Res, 8, 205, 10.1093/dnares/8.5.205

Komárek, 1986, Modern approach to the classification system of Cyanophytes, Algol Stud, 43, 157

Komárek, 1989, Modern approach to the classification system of Cyanophytes. 4. Nostocales, Algol Stud, 56, 247

Kondo, 2000, DNA–DNA reassociation among a bloom-forming cyanobacterial genus, Microcystis, Int J Syst Evol Microbiol, 50, 767, 10.1099/00207713-50-2-767

Laloui, 2002, Genotyping of axenic and non-axenic isolates of the genus Prochlorococcus and the OMF-‘ Synechococcus ’ clade by size, sequence analysis or RFLP of the internal transcribed spacer of the ribosomal operon, Microbiology, 148, 453, 10.1099/00221287-148-2-453

Litvaitis, 2002, A molecular test of cyanobacterial phylogeny: inferences from constraint analyses, Hydrobiologia, 468, 135, 10.1023/A:1015262621848

Lu, 1997, Identification of cyanobacteria by polymorphisms of PCR-amplified ribosomal DNA spacer region, FEMS Microbiol Lett, 153, 141, 10.1111/j.1574-6968.1997.tb10475.x

Lyra, 1997, Characterization of cyanobacteria by SDS-PAGE of whole-cell proteins and PCR/RFLP of the 16S rRNA gene, Arch Microbiol, 168, 176, 10.1007/s002030050485

Lyra, 2001, Molecular characterization of planktic cyanobacteria of Anabaena , Aphanizomenon , Microcystis and Planktothrix genera, Int J Syst Evol Microbiol, 51, 513, 10.1099/00207713-51-2-513

Lyra, 2005, Benthic cyanobacteria of the genus Nodularia are non-toxic, without gas vacuoles, able to glide and genetically more diverse than planktonic Nodularia, Int J Syst Evol Microbiol, 55, 555, 10.1099/ijs.0.63288-0

Marquardt, 2007, Genotypic and phenotypic diversity of cyanobacteria assigned to the genus Phormidium (Oscillatoriales) from different habitats and geographical sites, Arch Microbiol, 187, 397, 10.1007/s00203-006-0204-7

Masepohl, 1996, Long tandemly repeated repetitive (LTRR) sequences in the filamentous cyanobacterium Anabaena sp. PCC 7120, 26

Mazel, 1990, Highly repetitive DNA sequences in cyanobacterial genomes, J Bacteriol, 172, 2755, 10.1128/jb.172.5.2755-2761.1990

Neilan, 2002, The molecular evolution and DNA profiling of toxic cyanobacteria, Curr Issues Mol Biol, 4, 1

Nilsson, 2000, Cyanobacterial diversity in geographically related and distant host plants of the genus Gunnera, Arch Microbiol, 173, 97, 10.1007/s002039900113

Nübel, 1997, PCR primers to amplify 16S rRNA genes from Cyanobacteria, Appl Environ Microbiol, 63, 3327, 10.1128/aem.63.8.3327-3332.1997

Otsuka, 2001, A proposal for the unification of five species of the cyanobacterial genus Microcystis Kützing ex Lemmermann 1907 under the rules of the bacteriological code, Int J Syst Evol Microbiol, 51, 873, 10.1099/00207713-51-3-873

Pitcher, 1989, Rapid extraction of bacterial DNA with guanidium thyocinate, Lett Appl Microbiol, 8, 151, 10.1111/j.1472-765X.1989.tb00262.x

Prasanna, 2006, Morphological, physiochemical and molecular characterization of Anabaena strains, Microbiol Res, 161, 187, 10.1016/j.micres.2005.08.001

Priest, 1993, Classification, Modern Bacterial Taxonomy, 1

Rajaniemi, 2005, Phylogenetic and morphological evaluation of the genera Anabaena , Aphanizomenon , Trichormus and Nostoc (Nostocales, Cyanobacteria, Int J Syst Evol Microbiol, 55, 11, 10.1099/ijs.0.63276-0

Rasmussen, 1998, Fingerprinting of cyanobacteria based on PCR with primers derived from short and long tandemly repeated repetitive sequences, Appl Environ Microbiol, 64, 265, 10.1128/AEM.64.1.265-272.1998

Robertson, 2001, Phylogenetic analyses of Synechococcus strains (cyanobacteria) using sequences of 16S rDNA and part of the phycocyanin operon reveal multiple evolutionary lines and reflect phycobilin content, Int J Syst Evol Microbiol, 51, 861, 10.1099/00207713-51-3-861

Rocap, 2002, Resolution of Prochlorococcus and Synechococcus ecotypes by using 16S–23S ribosomal DNA internal transcribed spacer sequences, Appl Environ Microbiol, 68, 1180, 10.1128/AEM.68.3.1180-1191.2002

Rudi, 1997, Strain characterization and classification of oxyphotobacteria in clone cultures on the basis of 16S rRNA sequences from the variable regions V6, V7, and V8, Appl Environ Microbiol, 63, 2593, 10.1128/aem.63.7.2593-2599.1997

Saker, 2003, First report and toxicological assessment of the cyanobacterium Cylindrospermopsis raciborskii from Portuguese freshwaters, Ecotoxicol Environ Saf, 55, 243, 10.1016/S0147-6513(02)00043-X

Seo, 2003, The phylogenetic relationships of cyanobacteria inferred from 16S rRNA, gyrB , rpoC1 and rpoD1 gene sequences, J Gen Appl Microbiol, 49, 191, 10.2323/jgam.49.191

Skulberg, 1990, Forskning med Algekulturer NIVAs Kultursampling av Alger ( Research with Algal Cultures. NIVA's Culture Collection of Algae

Sneath, 1972, The influence on numerical taxonomic similarities of errors in microbiological tests, J Gen Microbiol, 72, 377, 10.1099/00221287-72-2-377

Suda, 2002, Taxonomic revision of water-bloom-forming species of oscillatorioid cyanobacteria, Int J Syst Evol Microbiol, 52, 1577

Swofford, 2003, paup. Phylogenetic analysis using parsimony (and other methods). Version 4.0b10

Teaumroong, 2002, Diversity of nitrogen-fixing cyanobacteria under various ecosystems of Thailand, I. Morphology, physiology and genetic diversity. World J Microbiol Biotechnol, 18, 673, 10.1023/A:1016812116538

Valério, 2005, Molecular characterization of Cylindrospermopsis raciborskii strains isolated from Portuguese freshwaters, Harmful Algae, 4, 1044, 10.1016/j.hal.2005.03.002

van Belkum, 1998, Short-sequence DNA repeats in prokaryotic genomes, Microbiol Mol Biol Rev, 62, 275, 10.1128/MMBR.62.2.275-293.1998

Versalovic, 1991, Distribution of repetitive DNA sequences in eubacteria and application to fingerprinting of bacterial genomes, Nucleic Acids Res, 19, 6823, 10.1093/nar/19.24.6823

Vincze, 2003, NEBcutter: a program to cleave DNA with restriction enzymes, Nucleic Acids Res, 31, 3688, 10.1093/nar/gkg526

West, 1997, Phenotypic and genotypic comparison of symbiotic and free-living cyanobacteria from a single field site, Appl Environ Microbiol, 63, 4479, 10.1128/aem.63.11.4479-4484.1997

Wilson, 2000, Molecular characterization of the toxic cyanobacterium Cylindrospermopsis raciborskii and design of a species-specific PCR, Appl Environ Microbiol, 66, 332, 10.1128/AEM.66.1.332-338.2000

Zar, 1996, Biostatistical Analysis

Zheng, 1999, Genetic diversity and classification of cyanobacteria in different Azolla species by the use of PCR fingerprinting, Theor Appl Genet, 99, 1187, 10.1007/s001220051323