Edward Parker1, Jeffrey R MacDonald2, Chen Wang1
1Mount Sinai Hospital, Toronto ON, Canada
2The Centre for Applied Genomics, The Hospital for Sick Children, Toronto, ON, Canada;
Tóm tắt
Tóm tắt
Tóm tắt 1191
Các nỗ lực để giải mã cơ sở sinh học của bệnh ác tính lympho đã gần đây được nhấn mạnh bởi sự phát hiện ra các tế bào B đơn dòng trong những cá nhân khỏe mạnh, một thực thể hiện được gọi là lymphocytosis B đơn dòng (MBL). Tuy nhiên, trong khi có nhiều sự quan tâm dành cho việc đặc trưng hóa tình trạng lan rộng này, nhóm phụ của MBL thiếu biểu hiện CD5 đã bị bỏ qua phần lớn. Để giải quyết sự mất cân bằng này, nhóm nghiên cứu của chúng tôi đã trước đây khảo sát một loạt các trường hợp trình bày với lymphocytosis B đơn dòng CD5- kéo dài nhưng không tiến triển (Amato D et al, Am J Clin Pathol 2007). Trong nghiên cứu này, phân tích karyotyp đã tiết lộ một trường hợp độc đáo mang chuyển vị t(2;7)(p11;q22), một đột biến di truyền đã được ghi nhận liên quan đến u lympho vùng rìa lách (SMZL). Nghiên cứu hiện tại nhằm mục đích để đặc trưng hóa thêm điểm đột biến t(2;7) của trường hợp nghiên cứu mới này nhằm kiểm tra xem chuyển vị có phải là một liên kết di truyền phổ biến giữa MBL CD5- và SMZL hay không. Sử dụng phương pháp lai phân tử huỳnh quang (FISH), điểm phá vỡ trên nhiễm sắc thể 7 ban đầu được thu hẹp xuống một vùng ứng viên dài 41 kilobase (kb) tại 7q21.2, như được suy ra từ tín hiệu tách biệt từ probe cosmid cos130a6. Dựa trên sự gần gũi của điểm phá vỡ trên nhiễm sắc thể 2 với locus immunoglobulin kappa (IGK) trên 2p11, phản ứng chuỗi polymerase dài (L-PCR) sau đó đã được thực hiện theo giả thuyết rằng chuyển vị t(2;7) đã xảy ra từ sự tái tổ hợp VJ bất thường. Các mồi nhắm vào các trình tự bảo tồn trong các gen biến thể IGK đã được xếp chồng lên nhau với các mồi trên nhiễm sắc thể 7 nằm ở các khoảng cách 6 kb xuyên suốt vùng ứng viên 41 kb, và L-PCR được thực hiện sử dụng DNA của cả bệnh nhân và tham chiếu làm mẫu. Quá trình này đã tạo ra một trường hợp cụ thể của sự khuếch đại mạnh mẽ theo chiều hướng bệnh nhân, từ đó chỉ ra việc nhắm mục tiêu thành công vào điểm đột biến t(2;7). Phân tích giải trình tự Sanger của sản phẩm PCR tương ứng đã xác nhận kết quả này, tiết lộ một điểm phá vỡ tại 2p11.2 nằm ở trình tự tín hiệu tái tổ hợp heptamer (RSS) của gen biến thể IGK V3-15, cùng với một điểm phá vỡ tại 7q21.2 nằm cách 3.6 kb ở thượng nguồn của điểm khởi đầu phiên mã của điều hòa chu kỳ tế bào cyclin dependent kinase 6 (CDK6). Đáng chú ý, điểm phá vỡ trên nhiễm sắc thể 7 cho thấy sự đồng nhất hoàn hảo về trình tự với heptamer RSS immunoglobulin, và nằm trong khoảng 3 cặp base của một điểm phá vỡ đã được đặc trưng trước đó liên quan đến SMZL (Corcoran M et al, Oncogene 1999). Do đó, kết quả này ngụ ý sự điều hòa sai của CDK6 trong quá trình khuếch đại đơn dòng quan sát được trong MBL CD5-, và làm nổi bật vai trò tiềm năng của sự tái tổ hợp VJ bất thường trong quá trình hình thành đột biến di truyền này. Bằng cách thiết lập một liên kết di truyền rõ ràng giữa MBL CD5- và SMZL, nghiên cứu này ủng hộ quan điểm rằng MBL CD5- là một tiền thân của bệnh ác tính rõ rệt trong mô hình áp dụng đa hit trong sinh ung thư. Cuối cùng, việc đặc trưng hóa ở cấp độ trình tự của một điểm phá vỡ chuyển vị mới bằng L-PCR mạnh mẽ xác nhận tính khả thi của phương pháp này trong các nghiên cứu tương lai về chuyển vị liên quan đến immunoglobulin.
Các công bố:
Không có xung đột lợi ích nào liên quan để công bố.
