Sự biến đổi của một cysteine phản ứng giải thích sự khác biệt giữa rasburicase và Uricozyme®, một loại uricase tự nhiên từ Aspergillus flavus

Biotechnology and Applied Biochemistry - Tập 36 Số 1 - Trang 21-31 - 2002
Alain Bayol1, Joël Capdevielle2, Pascal Malazzi1, Armelle Buzy2, Marie Claude Bonnet1, N. Colloc’h3, Jean‐Paul Mornon4, Denis Loyaux2, Pascual Ferrara2
1Analysis and Quality Control Unit, Sanofi‐Synthelabo Recherche, Innopole, Voie no. 1, BP 137, 31676 Labège Cédex, France
2Protein Structure Group, Molecular and Functional Department, Sanofi‐Synthelabo Recherche, Innopole, Voie no. 1 BP 137, 31676 Labège Cédex, France
3Université de Caen, CNRS UMR6551, BP 14074, Boulevard Becquerel, 14074 Caen Cédex, France
4LMCP, UP6 and UP7, CNRS UMR 7590, case 115, 4 Place Jussieu, 75252 Paris Cédex 05, France

Tóm tắt

Urate oxidase được sử dụng ở người để kiểm soát axit uric ở bệnh nhân nhận hóa trị. Rasburicase (Fasturtec®/Elitek®), một loại urate oxidase tái tổ hợp được biểu hiện trong Saccharomyces cerevisiae, đã được so sánh với Uricozyme®, enzyme tự nhiên được sản xuất bởi Aspergillus flavus. Rasburicase có độ tinh khiết cao hơn, được chứng minh qua phân tích SDS/PAGE và sắc ký, và hoạt tính đặc hiệu tốt hơn. Những khác biệt quan sát được đối với Uricozyme® có thể là do quá trình tinh chế trước đó, điều này làm biến đổi enzyme. Ngược lại, quá trình sản xuất rasburicase giữ gìn cấu trúc của phân tử. Phân tích MS cho thấy Uricozyme® chứa một adduct cysteine tại Cys103. Trong cấu trúc tinh thể, nguyên tử lưu huỳnh của residu cysteine tại vị trí 103 được định hướng về bề mặt bên ngoài của tetramer, trong khi nguyên tử lưu huỳnh của hai residu cysteine khác (Cys35 và Cys290) được định hướng về trung tâm của kênh hình thành bởi tetramer. Cùng một adduct được tạo ra bằng cách ủ đơn giản rasburicase với cysteine.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Laboureur P., 1968, Bull, Soc. Chim. Biol., 50, 811

Legoux R., 1992, Biol, Chem., 267, 8565

10.1038/nsb1197-947

10.1042/bj1870727

Bayol A., 1995, Biophys, Chem., 54, 229

10.1038/sj.leu.2400850

10.1038/sj.leu.2402235

Pui C. H., 2000, J, Clin. Oncol., 19, 697

10.1038/227680a0

Nishimura H., 1982, J, Biochem., 91, 41

Thông tin
Thông tin xuất bản

Biotechnology and Applied Biochemistry

Tập 36 Số 1

21-31

Thông tin tác giả