Tách và phân tích di truyền một đột biến làm giảm nhu cầu của các dòng Escherichia coli K12 thiếu hụt superoxide dismutase

Springer Science and Business Media LLC - Tập 228 - Trang 410-416 - 1991
James A. Imlay1, Irwin Fridovich1
1Department of Biochemistry, Duke University Medical Center, Durham, USA

Tóm tắt

Phenom lớn nhất liên quan đến sự thiếu hụt superoxide dismutase (SOD) ở Escherichia coli là inability to grow in aerobic minimal medium, nguyên nhân do độ nhạy của một số con đường tổng hợp axit amin đối với superoxide. Chúng tôi đã tách được hai loại pseudorevertants có khả năng phát triển trong môi trường tối thiểu với tốc độ khiêm tốn. Trong số đó, lớp có tốc độ phát triển nhanh hơn chứa các đột biến ở một locus duy nhất, được ký hiệu là ssa, đã được xác định tại vị trí 4 phút trên nhiễm sắc thể E. coli. Lớp này chiếm phần lớn các pseudorevertants tự phát được chọn thông qua việc chuyển giao các văn hóa độc lập thiếu SOD trong môi trường tối thiểu từ điều kiện tăng trưởng kỵ khí sang kỵ khí. Sự giả hồi của ssa đã giảm bớt nhu cầu cho một loạt các bổ sung axit amin không liên quan. Hơn nữa, các chủng thiếu SOD không thể tiếp nhận diaminopimelic acid từ môi trường tăng trưởng, trong khi các pseudorevertants ssa có thể làm như vậy. Độ sống sót của các pseudorevertants này cho thấy rằng các enzyme sinh tổng hợp nhạy cảm với superoxide vẫn duy trì một số chức năng trong các tế bào thiếu SOD trong điều kiện phát triển hiếu khí.

Từ khóa

#Escherichia coli #superoxide dismutase #pseudoreversion #axit amin #diaminopimelic acid

Tài liệu tham khảo

Bendiak DS, Friesen JD (1981) Organization of genes in the four minute region of the Escherichia coli chromosome: evidence that rpsB and tsf are co-transcribed. Mol Gen Genet 181:356–362 Bilinski T, Krawiec Z, Liczanski A, Litwinska J (1985) Is hydroxyl radical generated by the Fenton reaction in vivo? Biochem Biophys Res Commun 130:533–539 Bukhari AI, Taylor AL (1971) Genetic analysis of diaminopimelic acid- and lysine-requiring mutants of Escherichia coli. J Bacteriol 105:844–854 Carlioz A, Touati D (1986) Isolation of superoxide dismutase mutants in Escherichia coli: is superoxide dismutase necessary for aerobic life? EMBO J 5:623–630 Chang Y-Y, Cronan JE Jr (1982) Mapping nonselectable genes of Escherichia coli by using transposon Tn10: location of a gene affecting pyruvate oxidase. J Bacteriol 151:1279–1289 Clark D (1981) Regulation of fatty acid degradation in Escherichia coli: analysis by operon fusion. J Bacteriol 148:521–526 Coleman J, Raetz CRH (1988) First committed step of lipid A biosynthesis in Escherichia coli: sequence of the lpxA gene. J Bacteriol 170:1268–1274 Fee JA, Niederhoffer EC, Naranjo C (1988) First description of a variant of E. coli lacking superoxide dismutase activity yet able to grow efficiently on minimal, oxygenated medium. In: Hurley LS, Keen CL, Lonnerdal B, Rucker RB (eds) Trace elements in man and animals. Plenum Press, NY, pp 239–243 Foster TJ, Davis MA, Roberts DE, Takeshita K, Kleckner N (1981 a) Genetic organization of transposon Tn10. Cell 23:201–213 Foster TJ, Lundblad V, Hanley-Way S, Halling SM, Kleckner N (1981 b) Three Tn10-associated excision events: relationship to transposition and role of direct and inverted repeats. Cell 23:215–227 Fridovich I (1985) Superoxide dismutases: regularities and irregularities. The Harvey Lectures, Series 79. Academic Press, New York, pp 51–75 Icho T, Sparrow CP, Raetz CRH (1985) Molecular cloning and sequencing of the gene for CDP-diglyceride synthetase of Escherichia coli. J Biol Chem 260:12078–12083 Imlay JA, Fridovich I (1991) Assay of metabolic superoxide production in Escherichia coli. J Biol Chem 266:6957–6965 Imlay JA, Linn S (1987) Mutagenesis and stress responses induced in Escherichia coli by hydrogen peroxide. J Bacteriol 169:2967–2976 Kadner RJ, Heller K, Coulton JW, Braun V (1980) Genetic control of hydroxamate-mediated iron uptake in Escherichia coli. J Bacteriol 143:256–264 Kuo CF, Mashino T, Fridovich I (1987) α,β-Dihydroxy acid dehydratase: a superoxide-sensitive enzyme. J Biol Chem 262:4724–4727 Loewen PC (1984) Isolation of catalase-deficient Escherichia coli mutants and genetic mapping of katE, a locus that affects catalase activity. J Bacteriol 157:622–626 van Loon APGM, Pesold-Hurt B, Schatz G (1986) A yeast mutant lacking mitochondrial manganese-superoxide dismutase is hypersensitive to oxygen. Proc Natl Acad Sci USA 83:3820–3824 Low KB (1987) Mapping techniques and determination of chromosome size. In: Neidhardt FC (ed) Escherichia coli and Salmonella typhimurium. Am Soc Microbiol, Washington, DC, pp 1184–1189 Miller JH (1972) Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY Wu TT (1966) A model for three-point analysis of random general transduction. Genetics 54:405–410