Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Tác động ức chế của việc chuyển gen cDNA antisense aminopeptidase N (APN/CD13) lên tiềm năng xâm lấn của tế bào osteosarcoma
Tóm tắt
Aminopeptidase N (APN/CD13), một ectopeptidase phụ thuộc vào Zn2+, được định vị trên bề mặt tế bào và hoạt động như một protein xuyên màng. Sự biểu hiện và hoạt động của APN tăng cao được giả định có tương quan với hành vi xâm lấn của một số loại u bướu. Trong nghiên cứu này, dòng tế bào osteosarcoma MNNG/HOS được chuyển gen ổn định với một vector biểu hiện có khả năng biểu hiện bản sao đối kháng của APN. Bốn clone chuyển gen ổn định, các clone đối chứng và tế bào nguồn đã được đặc trưng. Việc tích hợp ổn định của vector đối kháng đã được xác nhận thông qua phân tích PCR DNA gen. RT-PCR cạnh tranh cho thấy rằng biểu hiện mRNA của các tế bào chuyển gen đối kháng đã giảm xuống khoảng 37% so với dòng tế bào đối chứng. Thí nghiệm hoạt động enzyme cho thấy hoạt động enzym của APN được ức chế xuống khoảng 51% so với dòng tế bào đối chứng. Việc chuyển gen đối kháng không có tác động đến sự tăng sinh của tế bào được đo bằng phương pháp 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), đến khả năng di động trong các buồng Transwell, và đến khả năng bám dính với collagen I. Tuy nhiên, một thí nghiệm xâm lấn in vitro cho thấy sự giảm đáng kể trong số lượng tế bào di chuyển qua màng tái tạo (51% so với dòng tế bào đối chứng). Khả năng bám dính với Matrigel cũng bị ảnh hưởng (73% so với dòng tế bào đối chứng). Hơn nữa, trong điều kiện in vivo, một khả năng giảm để di căn đến phổi đã được chứng minh trong một thí nghiệm di căn thí nghiệm trên chuột nude. Những phát hiện này chứng minh rằng APN đóng vai trò tích cực trong việc gắn kết tế bào và phân hủy proteolytic ma trận ngoại bào trong quá trình di căn của osteosarcoma. Viết tắt: GAPDH – glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
Từ khóa
Tài liệu tham khảo
citation_journal_title=Cancer Matastasis Rev; citation_title=Paracrine and autocrine growth mechanisms in tumor metastasis to specific sites with particular emphasis on brain and lung metastasis; citation_author=GL Nicolson; citation_volume=12; citation_publication_date=1993; citation_pages=324-43; citation_id=CR1
citation_journal_title=Nature; citation_title=Metastatic potential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen; citation_author=LA Liotta, K Tryggvason, S Garbisa; citation_volume=284; citation_publication_date=1980; citation_pages=67-8; citation_doi=10.1038/284067a0; citation_id=CR2
citation_journal_title=Cancer Res; citation_title=Effect of plasminogen activator (Urokinase), plasmin, and thrombin on glycoprotein and collagenous components of basement membrane; citation_author=LA Liotta, RH Goldfarb, R Brundage; citation_volume=41; citation_publication_date=1981; citation_pages=4629-36; citation_id=CR3
citation_journal_title=Cancer Res; citation_title=Cathepsin B activity in B16 melanoma cells: A possible marker for metastatic potential; citation_author=BF Sloane, KV Honn, JG Sadler; citation_volume=42; citation_publication_date=1982; citation_pages=980-6; citation_id=CR4
citation_journal_title=Jpn J Cancer Res; citation_title=Inhibition of tumor cell invasion by ubenimex (bestatin) in vitro
; citation_author=I Saiki, J Murata, K Watanabe; citation_volume=80; citation_publication_date=1989; citation_pages=873-8; citation_id=CR5
citation_journal_title=J Clin Chem Clin Biochem; citation_title=Human aminopeptidases: A review of the literature; citation_author=GJ Sanderink, Y Artur, G Siest; citation_volume=26; citation_publication_date=1988; citation_pages=795-807; citation_id=CR6
citation_journal_title=J Clin Invest; citation_title=Human myeloid plasma membrane glycoprotein CD13 (gp150) is identical to aminopeptidase N; citation_author=AT Look, RA Ashmun, LH Shapiro; citation_volume=83; citation_publication_date=1989; citation_pages=1299-307; citation_doi=10.1172/JCI114015; citation_id=CR7
citation_journal_title=Neuroscience; citation_title=Major localization of aminopeptidase M in rat brain; citation_author=B Solhonne, C Gros, H Pollard; citation_volume=22; citation_publication_date=1987; citation_pages=225-32; citation_doi=10.1016/0306-4522(87)90212-0; citation_id=CR8
citation_title=Metabolism of neutropeptides; citation_inbook_title=Mammalian Ectoenzymes; citation_publication_date=1984; citation_pages=211-42; citation_id=CR9; citation_author=AJ Turner; citation_author=NM Hooper; citation_author=AJ Kenny; citation_publisher=Elesevier Scientific Publishing
citation_journal_title=Biochem Pharmacol; citation_title=Metabolism of vasoactive peptides by plasma and purified renal aminopeptidase M; citation_author=PE Ward, IF Benter, L Dick; citation_volume=40; citation_publication_date=1990; citation_pages=1725-32; citation_doi=10.1016/0006-2952(90)90348-O; citation_id=CR10
citation_journal_title=Immnogenetics; citation_title=Pool sequencing of natural HLA-DR,-DQ, and-DP ligands reveals detailed peptide motifs, constraints of processing, and general rules; citation_author=K Falk, O. S Rotzschke, S tevanovic; citation_volume=39; citation_publication_date=1994; citation_pages=230-42; citation_id=CR11
citation_journal_title=Am J Pathol; citation_title=Monoclonal antibodies detect monocyte/macrophage activation and differentiation antigens and identify functionally distinct subpopulations of human rheumatoid synovial tissue macropharges; citation_author=AE Koch, JC Burrows, A Skoutelis; citation_volume=138; citation_publication_date=1991; citation_pages=165-3; citation_id=CR12
citation_journal_title=J Immunol; citation_title=Surface aminopeptidase activity of human lymphocytes. I. Biochemical and biologic properties of intact cells; citation_author=AA Amoscato, JW Alexander, GF Babcock; citation_volume=142; citation_publication_date=1989; citation_pages=1245-52; citation_id=CR13
citation_journal_title=Nature; citation_title=Human aminopeptidase N is a receptor for human coronavirus 229E; citation_author=C Yeager, RA Ashmun, RK Williams; citation_volume=357; citation_publication_date=1992; citation_pages=420-2; citation_doi=10.1038/357420a0; citation_id=CR14
citation_journal_title=Biochem Biophys Res Commun; citation_title=Inhibition of alanyl aminopeptidase induces MAP-kinase p43/ERK2 in the human T cell line KARPAS-2 99; citation_author=U Lendeckel, T Kahne, M Arndt; citation_volume=9; citation_publication_date=1998; citation_pages=5-9; citation_doi=10.1006/bbrc.1998.9585; citation_id=CR15
citation_journal_title=Int J Cancer; citation_title=Role of aminopeptidase N (CD13) in tumor-cell invasion and extracellular matrix degradation; citation_author=I Saiki, H Fujii, J Yoneda; citation_volume=54; citation_publication_date=1993; citation_pages=137-43; citation_id=CR16
citation_journal_title=Cancer Res; citation_title=Biochemical and functional characterization of aminopeptidase N expressed by human melanoma cells; citation_author=A Menrad, D Speicher, J Wacker; citation_volume=53; citation_publication_date=1993; citation_pages=1450-5; citation_id=CR17
citation_journal_title=Clin Exp Metastasis; citation_title=Human melanoma invasion and metastasis enhancement by high expression of aminopeptidase N/CD 13; citation_author=H Fujii, M Nakajima, I Saiki; citation_volume=13; citation_publication_date=1995; citation_pages=337-44; citation_doi=10.1007/BF00121910; citation_id=CR18
citation_journal_title=Clin Exp Metastasis; citation_title=Possible contribution of aminopeptidase N (APN/CD13) to invasive potential enhanced by interleukin-6 and soluble interleukin-6 receptor in human osteosarcoma cell lines; citation_author=A Kido, S Krueger, C Haeckel; citation_volume=17; citation_publication_date=1999; citation_pages=857-63; citation_doi=10.1023/A:1006794617406; citation_id=CR19
citation_journal_title=Am J Pathol; citation_title=Expression of aminopeptidase N (CD13) in mesenchymal tumors; citation_author=G Mechtersheimer, P Moller; citation_volume=137; citation_publication_date=1990; citation_pages=1215-22; citation_id=CR20
citation_journal_title=Clin Exp Immunol; citation_title=Regulation of the expression of aminopeptidase A, aminopeptidase N/CD13 and dipeptidylpeptidase IV/CD26 in renal carcinoma cells and renal tubular epitherial cells by cytokines and cAMP-increaing mediators; citation_author=A Kehlen, B Gohring, J Langner; citation_volume=111; citation_publication_date=1998; citation_pages=435-41; citation_doi=10.1046/j.1365-2249.1998.00513.x; citation_id=CR21
citation_journal_title=J Virol; citation_title=CD13 (human aminopeptidase N) mediates human cytomegalovirus infection; citation_author=C Soderberg, TD Giugni, JA Zaia; citation_volume=67; citation_publication_date=1993; citation_pages=6576-85; citation_id=CR22
citation_title=Membrane alanyl aminopeptidase; citation_inbook_title=Handbook of Proteolytic Enzymes; citation_publication_date=1998; citation_pages=996-1000; citation_id=CR23; citation_author=AJ Turner; citation_publisher=Academic Press
citation_journal_title=Biochim Biophys Acta; citation_title=Specific regulation by antisense, sense and antigene nucleic acids; citation_author=C Helene, JJ Toulme; citation_volume=1049; citation_publication_date=1990; citation_pages=99-125; citation_id=CR24
citation_journal_title=Jpn J Cancer Res; citation_title=Expression of aminopeptidase N on human choriocarcinoma cells and cell growth suppression by inhibition of aminopeptidase N activity; citation_author=K Ino, S Goto, T Okamoto; citation_volume=85; citation_publication_date=1994; citation_pages=923-33; citation_id=CR25
citation_journal_title=Leukemia; citation_title=Effect of ubenimex on the proliferation and differentiation of U937 human histiocytic lymphoma cells; citation_author=M Murata, Y Kubota, T Tanaka; citation_volume=8; citation_publication_date=1994; citation_pages=2188-93; citation_id=CR26
citation_journal_title=Adv ExpMed Biol; citation_title=Aminopeptidase N-mediated signal transduction and inhibition of human myeloid cells; citation_author=M Lohn, C Mueller, K Thiele; citation_volume=421; citation_publication_date=1997; citation_pages=85-91; citation_id=CR27
citation_journal_title=Cancer Immunolo Immunother; citation_title=Immunotherapy with bestatin for acute nonlymphocytic leukemia in adults; citation_author=K Ota, S Kurita, K Yamada; citation_volume=23; citation_publication_date=1986; citation_pages=5-10; citation_id=CR28
citation_journal_title=Leukemia; citation_title=Induction of apoptosis by bestatin (ubenimex) in human leukemic cell lines; citation_author=K Sekine, H Fujii, F Abe; citation_volume=13; citation_publication_date=1999; citation_pages=729-34; citation_doi=10.1038/sj/leu/2401388; citation_id=CR29
citation_journal_title=Clin Cancer Res; citation_title=Antitumor activity of actinonin in vitro and in vivo
; citation_author=Y Xu, LT Lai, JL Gabrilove; citation_volume=4; citation_publication_date=1998; citation_pages=171-6; citation_id=CR30
citation_journal_title=Cancer Res; citation_title=Aminopeptidase N is a receptor for tumor-homing peptides and a target for inhibiting angiogenesis; citation_author=R Pasqualini, E Koivunen, R Kain; citation_volume=60; citation_publication_date=2000; citation_pages=722-7; citation_id=CR31