Cải thiện sự phát triển và sống sót của tế bào thần kinh cảm giác thông qua việc điều tiết tiêu cực PTEN bởi các vesicles ngoại bào nhỏ chứa miR-21-5p từ tế bào Schwann có nguồn gốc từ precursor da

Cong Ma1, Mi Shen2, Xia Wu2, Yan Li2, Liting Wang3, Qianru He2, Haiyan Shi2, Fei Ding2
1School of Biology and Basic Medical Sciences, Soochow University, Suzhou, 215123, China
2Key Laboratory of Neuroregeneration of Jiangsu and Ministry of Education and Co-innovation Center of Neuroregeneration, Nantong University, 19 Qixiu Road, Nantong, 226001, China
3Department of Pathophysiology, School of Medicine, Nantong University, 19 Qixiu Road, Nantong, 226001, China

Tóm tắt

Tóm tắt Thông tin nền Bệnh nhân bị chấn thương dây thần kinh ngoại biên (PNI) thường gặp phải những tổn thương do thiếu oxy và thiếu máu, đặc biệt khi kết hợp với tổn thương mạch máu, làm gây tổn thương và chết tế bào thần kinh. Sự quan tâm ngày càng tăng đối với các tế bào Schwann có nguồn gốc từ precursor da (SKP-SCs), và nghiên cứu trước đó đã chỉ ra rằng SKP-SCs có thể thúc đẩy sự phục hồi cảm giác sau liệu pháp tế bào cho PNI, tương tự như tác dụng của các tế bào Schwann chưa trưởng thành, và các vesicles ngoại bào có nguồn gốc từ SKP-SC (SKP-SC-EVs) được cho là những tác nhân điều trị đầy hứa hẹn cho sự tái tạo thần kinh. Phương pháp Các SKP được khuyến khích phân hóa thành SKP-SCs với các yếu tố cocktail (N2, neuregulin-1β, và forskolin) in vitro. Các SKP-SC-EVs được tách ra bằng Bộ Kit ExoEasy Maxi và được đặc trưng hóa theo hình thái và các dấu hiệu kiểu hình của EVs. Các tế bào thần kinh cảm giác chuột từ các hạch rễ lưng (DRGs) được nuôi cấy ban đầu trong điều kiện bình thường hoặc bị tác động bởi tình huống thiếu oxy-thiếu glucose (OGD). SKP-SC-EVs được áp dụng cho DRGs hoặc tế bào thần kinh cảm giác, với LY294002 (một chất ức chế PI3K) được thêm vào; ảnh hưởng đến sự phát triển nhánh thần kinh và sự sống sót của tế bào được quan sát. Hơn nữa, microRNA (miR) ứng viên có trong SKP-SC-EVs đã được sàng lọc, và các mô hình miR được chuyển vào các tế bào thần kinh DRG; trong khi đó, sự điều chỉnh tiêu cực của trục PTEN/PI3K/Akt và các phân tử tín hiệu hạ lưu đã được xác định. Kết quả Các SKP-SC-EVs có thể cải thiện sự phát triển nhánh thần kinh của DRGs và các tế bào thần kinh cảm giác. Hơn nữa, SKP-SC-EVs đã tăng cường sự sống sót của các tế bào thần kinh cảm giác sau khi tiếp xúc với OGD bằng cách giảm thiểu sự chết tế bào thần kinh và củng cố khả năng sống sót của tế bào, và sự biểu hiện của GAP43 (một protein chức năng của tế bào thần kinh) trong các tế bào thần kinh đã được gia tăng. Thêm vào đó, vai trò phục hồi thần kinh của SKP-SC-EVs được gợi ý liên quan đến việc kích hoạt PI3K/Akt, mTOR, và p70S6k, cũng như việc giảm tỷ lệ Bax/Bcl-2, điều này bị suy giảm bởi LY294002 đến một mức độ nào đó. Ngoài ra, việc chuyển mô hình miR-21-5p vào các tế bào thần kinh cảm giác có thể bảo vệ một phần chúng khỏi tổn thương do OGD gây ra. Kết luận Tóm lại, SKP-SC-EVs có thể cải thiện sự phát triển nhánh thần kinh của các tế bào thần kinh cảm giác DRG trong điều kiện sinh lý và bệnh lý. Hơn nữa, tiềm năng điều trị in vitro của SKP-SC-EVs đối với sự sống sót và phục hồi của các tế bào thần kinh cảm giác bị tổn thương do OGD được cho là có liên quan đến miR-21-5p có trong các EV nhỏ và trục miR-21-5p/PTEN/PI3K/Akt. Tóm tắt đồ họa

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Gomez-Sanchez JA, Carty L, Iruarrizaga-Lejarreta M, Palomo-Irigoyen M, Varela-Rey M, Griffith M, et al. Schwann cell autophagy, myelinophagy, initiates myelin clearance from injured nerves. J Cell Biol. 2015;210:153–68.

Jessen KR, Mirsky R. The repair Schwann cell and its function in regenerating nerves. J Physiol. 2016;594:3521–31.

Rotshenker S. Wallerian degeneration: the innate-immune response to traumatic nerve injury. J Neuroinflammation. 2011;8:109.

Griffin JW, Hogan MV, Chhabra AB, Deal DN. Peripheral nerve repair and reconstruction. J Bone Joint Surg Am. 2013;95:2144–51.

De la Rosa MB, Kozik EM, Sakaguchi DS. Adult stem cell-based strategies for peripheral nerve regeneration. Adv Exp Med Biol. 2018;1119:41–71.

Wakao S, Matsuse D, Dezawa M. Mesenchymal stem cells as a source of Schwann cells: their anticipated use in peripheral nerve regeneration. Cells Tissues Organs. 2014;200:31–41.

Mehrotra P, Tseropoulos G, Bronner ME, Andreadis ST. Adult tissue-derived neural crest-like stem cells: sources, regulatory networks, and translational potential. Stem Cells Transl Med. 2020;9:328–41.

Jahromi HK, Farzin A, Hasanzadeh E, Barough SE, Mahmoodi N, Najafabadi MRH, et al. Enhanced sciatic nerve regeneration by poly-L-lactic acid/multi-wall carbon nanotube neural guidance conduit containing Schwann cells and curcumin encapsulated chitosan nanoparticles in rat. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2020;109:110564.

Shi H, Li X, Yang J, Zhao Y, Xue C, Wang Y, et al. Bone marrow-derived neural crest precursors improve nerve defect repair partially through secreted trophic factors. Stem Cell Res Ther. 2019;10:397.

Krause MP, Dworski S, Feinberg K, Jones K, Johnston AP, Paul S, et al. Direct genesis of functional rodent and human schwann cells from skin mesenchymal precursors. Stem Cell Reports. 2014;3:85–100.

Assinck P, Sparling JS, Dworski S, Duncan GJ, Wu DL, Liu J, et al. Transplantation of skin precursor-derived Schwann cells yields better locomotor outcomes and reduces bladder pathology in rats with chronic spinal cord injury. Stem Cell Reports. 2020;15:140–55.

McKenzie IA, Biernaskie J, Toma JG, Midha R, Miller FD. Skin-derived precursors generate myelinating Schwann cells for the injured and dysmyelinated nervous system. J Neurosci. 2006;26:6651–60.

Khuong HT, Kumar R, Senjaya F, Grochmal J, Ivanovic A, Shakhbazau A, et al. Skin derived precursor Schwann cells improve behavioral recovery for acute and delayed nerve repair. Exp Neurol. 2014;254:168–79.

Stratton JA, Shah PT, Kumar R, Stykel MG, Shapira Y, Grochmal J, et al. The immunomodulatory properties of adult skin-derived precursor Schwann cells: implications for peripheral nerve injury therapy. Eur J Neurosci. 2016;43:365–75.

Harrell CR, Fellabaum C, Jovicic N, Djonov V, Arsenijevic N, Volarevic V. Molecular mechanisms responsible for therapeutic potential of mesenchymal stem cell-derived secretome. Cells. 2019;8:467–501.

Kumar LP, Kandoi S, Misra R, Vijayalakshmi S, Rajagopal K, Verma RS. The mesenchymal stem cell secretome: a new paradigm towards cell-free therapeutic mode in regenerative medicine. Cytokine Growth Factor Rev. 2019;46:1–9.

van Niel G, D'Angelo G, Raposo G. Shedding light on the cell biology of extracellular vesicles. Nat Rev Mol Cell Biol. 2018;19:213–28.

Eirin A, Riester SM, Zhu XY, Tang H, Evans JM, O'Brien D, et al. MicroRNA and mRNA cargo of extracellular vesicles from porcine adipose tissue-derived mesenchymal stem cells. Gene. 2014;551:55–64.

Qing L, Chen H, Tang J, Jia X. Exosomes and their microRNA cargo: new players in peripheral nerve regeneration. Neurorehabil Neural Repair. 2018;32:765–76.

Nooshabadi VT, Mardpour S, Yousefi-Ahmadipour A, Allahverdi A, Izadpanah M, Daneshimehr F, et al. The extracellular vesicles-derived from mesenchymal stromal cells: a new therapeutic option in regenerative medicine. J Cell Biochem. 2018;119:8048–73.

Shao H, Im H, Castro CM, Breakefield X, Weissleder R, Lee H. New technologies for analysis of extracellular vesicles. Chem Rev. 2018;118:1917–50.

Jing H, He X, Zheng J. Exosomes and regenerative medicine: state of the art and perspectives. Transl Res. 2018;196:1–16.

Ching RC, Kingham PJ. The role of exosomes in peripheral nerve regeneration. Neural Regen Res. 2015;10:743–7.

Lopez-Verrilli MA, Picou F, Court FA. Schwann cell-derived exosomes enhance axonal regeneration in the peripheral nervous system. Glia. 2013;61:1795–806.

Dong R, Liu Y, Yang Y, Wang H, Xu Y, Zhang Z. MSC-derived exosomes-based therapy for peripheral nerve injury: a novel therapeutic strategy. Biomed Res Int. 2019;2019:6458237.

Shakhbazau A, Mohanty C, Kumar R, Midha R. Sensory recovery after cell therapy in peripheral nerve repair: effects of naive and skin precursor-derived Schwann cells. J Neurosurg. 2014;121:423–31.

Melli G, Hoke A. Dorsal root ganglia sensory neuronal cultures: a tool for drug discovery for peripheral neuropathies. Expert Opin Drug Discov. 2009;4:1035–45.

Ratajczak MZ, Ratajczak J. Horizontal transfer of RNA and proteins between cells by extracellular microvesicles: 14 years later. Clin Transl Med. 2016;5:7.

Friedman RC, Farh KK, Burge CB, Bartel DP. Most mammalian mRNAs are conserved targets of microRNAs. Genome Res. 2009;19:92–105.

Biernaskie JA, McKenzie IA, Toma JG, Miller FD. Isolation of skin-derived precursors (SKPs) and differentiation and enrichment of their Schwann cell progeny. Nat Protoc. 2006;1:2803–12.

Shi H, Gong Y, Qiang L, Li X, Zhang S, Gao J, et al. Derivation of Schwann cell precursors from neural crest cells resident in bone marrow for cell therapy to improve peripheral nerve regeneration. Biomaterials. 2016;89:25–37.

Enderle D, Spiel A, Coticchia CM, Berghoff E, Mueller R, Schlumpberger M, et al. Characterization of RNA from exosomes and other extracellular vesicles isolated by a novel spin column-based method. PLoS One. 2015;10:e0136133.

Wiklander OPB, Brennan MA, Lotvall J, Breakefield XO, El Andaloussi S. Advances in therapeutic applications of extracellular vesicles. Sci Transl Med. 2019;11:492–526.

Witwer KW, Van Balkom BWM, Bruno S, Choo A, Dominici M, Gimona M, et al. Defining mesenchymal stromal cell (MSC)-derived small extracellular vesicles for therapeutic applications. J Extracell Vesicles. 2019;8:1609206.

Liu W, Takahashi Y, Morishita M, Nishikawa M, Takakura Y. Development of CD40L-modified tumor small extracellular vesicles for effective induction of antitumor immune response. Nanomedicine. 2020;15:1641–52.

Hao F, Ku T, Yang X, Liu QS, Zhao X, Faiola F, et al. Gold nanoparticles change small extracellular vesicle attributes of mouse embryonic stem cells. Nanoscale. 2020;12:15631–7.

Lopez-Verrilli MA, Court FA. Transfer of vesicles from schwann cells to axons: a novel mechanism of communication in the peripheral nervous system. Front Physiol. 2012;3:205.

Lopez-Leal R, Court FA. Schwann cell exosomes mediate neuron-glia communication and enhance axonal regeneration. Cell Mol Neurobiol. 2016;36:429–36.

Wang L, Chopp M, Szalad A, Lu X, Zhang Y, Wang X, et al. Exosomes derived from Schwann cells ameliorate peripheral neuropathy in type 2 diabetic mice. Diabetes. 2020;69:749–59.

Lopez-Leal R, Diaz-Viraque F, Catalan RJ, Saquel C, Enright A, Iraola G, et al. Schwann cell reprogramming into repair cells increases miRNA-21 expression in exosomes promoting axonal growth. J Cell Sci. 2020;133:133–68.

Ching RC, Wiberg M, Kingham PJ. Schwann cell-like differentiated adipose stem cells promote neurite outgrowth via secreted exosomes and RNA transfer. Stem Cell Res Ther. 2018;9:266.

Christie KJ, Webber CA, Martinez JA, Singh B, Zochodne DW. PTEN inhibition to facilitate intrinsic regenerative outgrowth of adult peripheral axons. J Neurosci. 2010;30:9306–15.

Liu WG, Han LL, Xiang R. Protection of miR-19b in hypoxia/reoxygenation-induced injury by targeting PTEN. J Cell Physiol. 2019;1–12. https://doi.org/10.1002/jcp.28286.

Hou K, Li G, Zhao J, Xu B, Zhang Y, Yu J, et al. Bone mesenchymal stem cell-derived exosomal microRNA-29b-3p prevents hypoxic-ischemic injury in rat brain by activating the PTEN-mediated Akt signaling pathway. J Neuroinflammation. 2020;17:46.

Wei H, Xu Y, Chen Q, Chen H, Zhu X, Li Y. Mesenchymal stem cell-derived exosomal miR-223 regulates neuronal cell apoptosis. Cell Death Dis. 2020;11:290.

Zheng Y, Zhao P, Lian Y, Li S, Chen Y, Li L. MiR-340-5p alleviates oxygen-glucose deprivation/reoxygenation-induced neuronal injury via PI3K/Akt activation by targeting PDCD4. Neurochem Int. 2020;134:104650.

Bao H, Sun D, Qi P, Jiang S. Astragaloside protects oxygen and glucose deprivation induced injury by regulation of microRNA-21 in retinal ganglion cell line RGC-5. Biomed Pharmacother. 2019;109:1826–33.

Tang C, Gu Y, Wang H, Wu H, Wang Y, Meng Y, et al. Targeting of microRNA-21-5p protects against seizure damage in a kainic acid-induced status epilepticus model via PTEN-mTOR. Epilepsy Res. 2018;144:34–42.

Gao X, Xiong Y, Li Q, Han M, Shan D, Yang G, et al. Extracellular vesicle-mediated transfer of miR-21-5p from mesenchymal stromal cells to neurons alleviates early brain injury to improve cognitive function via the PTEN/Akt pathway after subarachnoid hemorrhage. Cell Death Dis. 2020;11:363.

Li J, Lv H, Che YQ. Long non-coding RNA Gas5 potentiates the effects of microRNA-21 downregulation in response to ischaemic brain injury. Neuroscience. 2020;437:87–97.

Li D, Huang S, Zhu J, Hu T, Han Z, Zhang S, et al. Exosomes from MiR-21-5p-increased neurons play a role in neuroprotection by suppressing Rab11a-mediated neuronal autophagy in vitro after traumatic brain injury. Med Sci Monit. 2019;25:1871–85.

Zhou X, Chu X, Yuan H, Qiu J, Zhao C, Xin D, et al. Mesenchymal stem cell derived EVs mediate neuroprotection after spinal cord injury in rats via the microRNA-21-5p/FasL gene axis. Biomed Pharmacother. 2019;115:108818.

Zhang Z, Xu P, Yu H, Shi L. Luteolin protects PC-12 cells from H2O2-induced injury by up-regulation of microRNA-21. Biomed Pharmacother. 2019;112:108698.

Liu X, Chen M, Chen B, Feng B. Advance in research of microRNA-21-5p regulate autophagy by targeting gene. Zhonghua Wei Zhong Bing Ji Jiu Yi Xue. 2020;32:112–7.

Yuan M, Yang X, Duscher D, Xiong H, Ren S, Xu X, et al. Overexpression of microRNA-21-5p prevents the oxidative stress-induced apoptosis of RSC96 cells by suppressing autophagy. Life Sci. 2020;256:118022.

Simeoli R, Montague K, Jones HR, Castaldi L, Chambers D, Kelleher JH, et al. Exosomal cargo including microRNA regulates sensory neuron to macrophage communication after nerve trauma. Nat Commun. 2017;8:1778.

de Abreu RC, Fernandes H, da Costa Martins PA, Sahoo S, Emanueli C, Ferreira L. Native and bioengineered extracellular vesicles for cardiovascular therapeutics. Nat Rev Cardiol. 2020;17:685–97.

Cattin AL, Lloyd AC. The multicellular complexity of peripheral nerve regeneration. Curr Opin Neurobiol. 2016;39:38–46.

Shabbir A, Cox A, Rodriguez-Menocal L, Salgado M, Van Badiavas E. Mesenchymal stem cell exosomes induce proliferation and migration of normal and chronic wound fibroblasts, and enhance angiogenesis in vitro. Stem Cells Dev. 2015;24:1635–47.

Zhang L, Wang H. Long non-coding RNA in CNS injuries: a new target for therapeutic intervention. Mol Ther Nucleic Acids. 2019;17:754–66.

Yao C, Chen Y, Wang J, Qian T, Feng W, Chen Y, et al. LncRNA BC088259 promotes Schwann cell migration through Vimentin following peripheral nerve injury. Glia. 2020;68:670–9.

Wang H, Wu J, Zhang X, Ding L, Zeng Q. Microarray analysis of the expression profile of lncRNAs reveals the key role of lncRNA BC088327 as an agonist to heregulin1betainduced cell proliferation in peripheral nerve injury. Int J Mol Med. 2018;41:3477–84.

Wei Z, Fan B, Ding H, Liu Y, Tang H, Pan D, et al. Proteomics analysis of Schwann cell-derived exosomes: a novel therapeutic strategy for central nervous system injury. Mol Cell Biochem. 2019;457:51–9.