Giữ Chất Urease Từ Đậu Rồng (Cajanus cajan L.) Trong Gel Polyacrylamide Và Hạt Calcium Alginate

Biotechnology and Applied Biochemistry - Tập 27 Số 1 - Trang 25-29 - 1998
Nilanjana Das1, Arvind M. Kayastha1, O.P. Malhotra1
1School of Biotechnology Faculty of Science Banaras Hindu University Varanasi 221 005, India

Tóm tắt

Urease từ đậu rồng đã được cố định trong gel polyacrylamide với tỷ lệ cố định 50% tại 10% tổng monomer (chứa 5% chất liên kết chéo) với độ ổn định cơ học cao của gel. Khoảng 0,61 mg protein có thể được nạp vào mỗi 5 ml gel. Enzyme được cố định có t1/2 khoảng 200 ngày khi được bảo quản trong đệm Tris/acetate 0,1 M, pH 6,5, ở 4 °C. Các dải gel đã được sử dụng 4×5 lần cho phép xét nghiệm ure trong thời gian 6 giờ với tổn thất hoạt động dưới 2%. Khoảng 50% sự cố định của urease trong calcium alginate được quan sát thấy ở nồng độ 3% alginate với 0,12 mg protein/ml alginate. Các hạt enzyme thu được cho thấy t1/2 khoảng 75 ngày khi được bảo quản trong đệm Tris/acetate 0,1 M, pH 6,5, ở 4 °C. Các hạt đã được sử dụng 4–5 lần cho phép xét nghiệm ure trong thời gian 6 giờ với khoảng 40% tổn thất hoạt động. Trong cả hai trường hợp, hoạt tính enzyme tỷ lệ thuận với lượng enzyme được cố định. Hầu như không có sự rò rỉ của enzyme bị giữ qua một thời gian 48 giờ từ bất kỳ polymer nào. Cả hai chế phẩm enzyme được cố định đều được sử dụng để phân tích hàm lượng ure huyết trong một số mẫu lâm sàng từ bệnh viện đại học. Các kết quả thu được so sánh tích cực với các kết quả đạt được từ phương pháp thông thường được sử dụng trong phòng thí nghiệm bệnh lý lâm sàng.

Từ khóa

#Urease; cố định enzyme; Polyacrylamide; calcium alginate; xét nghiệm ure

Tài liệu tham khảo