Xác định quá trình chết tế bào được lập trình tại chỗ thông qua việc đánh dấu đặc hiệu sự phân mảnh DNA hạt nhân.

Chết tế bào được lập trình (PCD) đóng vai trò quan trọng trong sinh học phát triển và duy trì trạng thái ổn định trong các mô liên tục tái tạo. Hiện tại, sự tồn tại của nó chủ yếu được suy ra từ điện di gel của một mẫu DNA cộng gộp, vì PCD đã được chứng minh là liên quan đến sự phân mảnh DNA. Dựa trên quan sát này, chúng tôi mô tả ở đây sự phát triển của một phương pháp để hình dung PCD tại mức độ tế bào đơn lẻ, trong khi vẫn bảo tồn kiến trúc mô. Các lát cắt mô học thông thường, được xử lý trước bằng protease, đã được đánh dấu ở đầu nick bằng poly dU biotinylated, sử dụng bởi enzym chuyển vị deoxy terminal, và sau đó được nhuộm bằng peroxidase liên hợp avidin. Phản ứng này là cụ thể, chỉ những nhân ở vị trí mà PCD được dự kiến xảy ra mới được nhuộm. Sàng lọc ban đầu bao gồm: ruột non và ruột già, biểu bì, mô lympho, buồng trứng, và các cơ quan khác. Phân tích chi tiết cho thấy quá trình này bắt đầu ở ngoại vi hạt nhân, tương đối ngắn (1-3 giờ từ khi bắt đầu đến khi loại bỏ tế bào) và PCD xuất hiện trong các mô theo từng cụm. Quy mô của PCD trong mô được phương pháp này tiết lộ lớn hơn đáng kể so với chết tế bào theo chế độ hình thái hạt nhân, và do đó mở ra con đường cho nhiều nghiên cứu đa dạng.