Biến đổi tế bào động vật có vú hiệu quả cao bằng DNA plasmid.

Chúng tôi mô tả một quy trình chuyển giao đơn giản sử dụng phosphat canxi và các vector neo marker, đạt được hiệu quả chuyển đổi cao cho tế bào động vật có vú. Trong quy trình này, phức hợp phosphat canxi-DNA hình thành dần dần trong môi trường trong quá trình ấp ủ với tế bào và lắng đọng trên tế bào. Các yếu tố quan trọng để đạt được sự chuyển đổi hiệu quả là pH (6.95) của dung dịch đệm được sử dụng để lắng đọng phosphat canxi, nồng độ CO2 (3%) trong suốt quá trình ấp ủ DNA với tế bào, và lượng (20 đến 30 microgam) cùng hình thức (hình tròn) của DNA. Với sự tương phản rõ rệt so với kết quả với DNA hình tròn, DNA dạng thẳng gần như không hoạt động. Dưới những điều kiện này, 50% tế bào L(A9) của chuột có thể được chuyển đổi ổn định bằng pcDneo, một vector neo marker dựa trên virus linh trưởng 40 (kháng neomycin). Các dòng tế bào NIH3T3, C127, CV1, BHK, CHO, và HeLa đã được chuyển đổi với hiệu suất từ 10 đến 50% với vector này và các vector pcD đã tích hợp marker neo được sử dụng để xây dựng và truyền dẫn các thư viện biểu hiện cDNA cũng như để biểu hiện cDNA đã được nhân bản trong tế bào động vật có vú.