Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Biểu hiện Fas ngăn chặn sự phát triển của khối u cholangiocarcinoma
Elsevier BV - 1999
Tóm tắt
Cholangiocarcinoma vẫn tiếp tục có tiên lượng xấu với tỷ lệ sống sót tổng thể dưới 10%. Cần phải hiểu rõ hơn về cơ chế sinh ung thư phân tử của khối u này. Thụ thể Fas/APO-1 (CD95) và ligand Fas đã được đề cập là các yếu tố chính trong quá trình apoptosis. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã xem xét vai trò của thụ thể Fas trong sự phát triển của cholangiocarcinoma. Mục tiêu của nghiên cứu là đánh giá vai trò của thụ thể Fas trong việc kích thích apoptosis trong cholangiocarcinoma và đánh giá vai trò của thụ thể Fas trong quá trình sinh khối u cholangiocarcinoma. Các tế bào cholangiocarcinoma người, SK-ChA-1, đã được đánh giá về sự biểu hiện của thụ thể Fas bằng phương pháp phân loại tế bào bằng huỳnh quang (FACS). Các quần thể tế bào khác nhau (dương tính với Fas và âm tính với Fas) đã được tách riêng bằng FACS và nhân bản từ các loãng tế bào đơn lẻ. Sự biểu hiện Fas đã được đánh giá bằng FACS và phản ứng chuỗi polymerase phiên mã ngược (RT-PCR). Các quần thể tế bào đã được phân loại thêm bởi độ nhạy cảm đối với kháng thể đơn dòng chống Fas ở 72 giờ. Sự sống sót của tế bào và chỉ số apoptosis đã được đánh giá bằng phương pháp đếm tế bào với màu trypan blue và thử nghiệm gắn nhãn đầu cuối deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate (TUNEL), tương ứng. Các quần thể tế bào khác nhau đã được đánh giá khả năng hình thành khối u trong chuột nude BALB/c (2.5 × 106 tế bào mỗi lần tiêm dưới da). Sau 4 tuần, các khối u đã được đánh giá về diện tích khối u bằng phương pháp đo thước caliper và sự biểu hiện Fas bằng RT-PCR. Việc duy trì kiểu hình đường mật được đảm bảo bằng phương pháp nhuộm miễn dịch AE-1 (cytokeratin). Các quần thể tế bào dương tính với Fas và âm tính với Fas đã được xác định, tách riêng và xác nhận bằng FACS và RT-PCR. Việc điều trị các tế bào dương tính với Fas bằng kháng thể đơn dòng chống Fas đã sản xuất ra sự giảm 80% trong sự sống sót của tế bào so với không có sự giảm trong tế bào âm tính với Fas qua phương pháp đếm tế bào với màu trypan blue. Nhuộm TUNEL cho thấy chỉ số apoptosis đạt 75% cho các tế bào dương tính với Fas ấp ủ với kháng thể đơn dòng chống Fas và không có bằng chứng đáng kể về apoptosis ở các tế bào âm tính với Fas. Khi các tế bào cholangiocarcinoma được tiêm dưới da vào chuột nude, chỉ có tế bào âm tính với Fas hình thành các nốt u; các tế bào dương tính với Fas không hình thành nốt u. Các khối u đã được phân tích thiếu RNA thông tin Fas qua RT-PCR nhưng duy trì cytokeratin biliary AE-1 qua nhuộm miễn dịch. Sự biểu hiện thụ thể Fas là một yếu tố trung gian quan trọng của apoptosis trong các tế bào cholangiocarcinoma người nuôi cấy và dường như là yếu tố quyết định quan trọng đến sự phát triển của khối u cholangiocarcinoma ở chuột nude.
Từ khóa
#cholangiocarcinoma #thụ thể Fas #apoptosis #kháng thể đơn dòng #chuột nude #RT-PCR #FACSTài liệu tham khảo
Perry RR, Kang Y, Greaves B. Effect of tamoxifen on growth and apoptosis of estrogen dependent and independent human breast cancer cells. Ann Surg Oncol 1995;2:238–245.
Kang Y, Cortina R, Perry RR. Role of c-myc in tamoxifen-in- duced apoptosis estrogen-independent breast cancer. J Nat Cancer Inst 1996;88:279–284.
Frankfurt OS, Sugarbaker EV, Robb JA, et al.. Synergistic in- duction of apoptosis in breast cancer cells by tamoxifen and calmodulin inhibitors. Cancer Lett 1995;97:149–154.
Love RR. Tamoxifen therapy in primary breast cancer: Biol- ogy, efficacy, and side effects. J Clin Oncol 1989;7:813–815.
Butta A, Maclennan K, Flanders KC, et al.. Induction of trans- forming growth factor beta 1 in human breast cancer in vivo following tamoxifen treatment. Cancer Res 1992;52:4261–4264.
Sampson LK, Vickers SM, Ying W, et al.. Tamoxifen-mediated growth inhibition of human cholangiocarcinoma. Cancer Res 1997;57:1574–1579.
Taylor OM, Benson EA, McMahon MJ. Clinical trial of ta- moxifen in patients with irresectable pancreatic adenocarci- noma. The Yorkshine Gastrointestinal Tumor Group. Br J Surg 1993;80:384–386.
Pollack IF, Randall MS, Kristofik MP, et al.. Effects of tamox- ifen on DNA synthesis and proliferation of human malignant glioma lines in vitro. Cancer Res 1990;50:7134–7138.
Couldwell WT, Weiss MH, DiGiorgio LM, et al.. Clinical and radiographic response in a minority of patients with recurrent malignant gliomas treated with high-dose tamoxifen. Neuro- surgery 1993;32:485–490.
Gelmann EP. Tamoxifen for the treatment of malignancies other than breast and endometrial carcinoma. Semin Oncol 1997;24(Suppl l):65–70.
Ward RL, Morgan G, Dalley D, et al.. Tamoxifen reduces bone turnover and prevents lumbar spine and proximal femoral bone loss in early postmenopausal women. Bone Miner 1993;22:87–94.
Recker RR. Clinical review 41: Current therapy for osteo- porosis [review]. J Clin Endocrinol Metab 1993;76:14–16.
Stanton MJ, Gaffhey EF. Apoptosis: Basic concepts and po- tential significance in human cancer. Arch Pathol Lab Med 1998;122:310–319.
Pan ZQ, Radding W, Zhau T, et al.. Role of calmodulin in HlV-potentiated Fas-mediated apoptosis. Am J Pathol 1996; 149:903–910.
Laine J, Etelamaki P, Holmberg C, Dunkel C. Apoptotic cell death in human chronic renal allograft rejection. Transplan- tation 1997;63:101–105.
Bellamy COC, Malcomson R, Wyllie AH. The role of p53 in apoptosis and cancer. In Martin SJ, ed. Apoptosis and Cancer. Basel: Karger Landes Systems, 1997, pp 132–133.
Wu JX. Apoptosis and angiogenesis: Two promising tumor markers in breast cancer [review]. Anticancer Res 1996;16:2233–2240.
Thompson CB. Apoptosis in the pathogenesis and treatment of disease. Science 1995;267:1456–1462.
Trauth BC, Klas C, Peter AM, et al.. Monoclonal antibody- mediated tumor regression by induction of apoptosis. Science 1989;245:301–305.
Dhein J, Daniel PT, Trauth BC, et al.. Induction of apoptosis by monoclonal anti-APO-1 class switch variants is dependent on cross-linking of APO-1 cell surface antigens. J Immunol 1992;149:3166–3173.
Leithauser F, Dhein J, Mechtersheimer G, et al.. Constitutive and induced expression of APO-1, a new member of the nerve growth factor/tumor necrosis factor receptor super- family in normal and neoplastic cells. Lab Invest 1993;69:415–429.
Midis GP, Shen Y, Owen-Schaub LB. Elevated soluble Fas (sFas) levels in nonhematopoietic human malignancy. Cancer Res 1996;56:3870–3874.
Pan ZQ, Radding W, Zhou T, et al.. Role of calmodulin in HlV-potentiated Fas-mediated apoptosis. Am J Pathol 1996;149:903–910.
Kawamura K, Grabowski D, Krivacic K, et al.. Cellular events involved in the sensitization of etoposide-resistant cells by in- hibitors of calcium-calmodulin-dependent processes: Role for effects on apoptosis, DNA cleavable complex, and phosphor- ylation. Biochem Pharmacol 1996;52:1903–1909.
Nagata S, Golstein P. The Fas death factor. Science 1995;267:1449–1456.
Inbal B, Cohen O, Polak-Charcon S, et al.. DAP kinase links the control of apoptosis to metastasis. Nature 1997;390:180–184.
Itoh N, Yonehara S, Ishii A, et al.. The polypeptide encoded by the cDNA for human cell surface antigen Fas can mediate apoptosis. Cell 1991;66:233–243.
Melino G, Annicchiarico-Petruzzeli M, Piredda L, et al.. Tis- sue transglutaminase and apoptosis: Sense and antisense trans- fection studies with human neuroblastoma cells. Mol Cell Biol 1994;14:6584–6596.
Martinez-Lorenzo MJ, Alava MA, Anel A, et al.. Release of preformed Fas ligand in soluble form is the major factor for activation-induced death of Jurkat T cells. Immunology 1996;89:511–517.
Mori T, Xu JP, Mori E, et al.. Expression of Fas-ligand system associated with atresia through apoptosis in murine ovary. Horm Res 1997;48(Suppl 3):11–19.
Wilson SE, Li Q, Weng J, et al.. The Fas-Fas ligand system and other modulators of apoptosis in the cornea. Invest Oph- thalmol Vis Sci 1996;37:1582–1592.
Martinez-Lorenzo MJ, Alava MA, Anel A, et al.. Release of performed Fas ligand in soluble form is the major factor for activation-induced death of Jurkat T cells. Immunology 1996;89:511–517.
Pan G, Vickers SM, Pickens A, et al. Apoptosis and tumori- genesis in human cholangiocarcinoma cells: Involvement of Fas/APO-1 (CD95) and calmodulin. Am J Pathol (in press).