Định vị FISH của CML dương tính với BCR/ABL1 âm tính Philadelphia

Molecular Cytogenetics - Tập 1 Số 1 - 2008
Anna Virgili1, Diana Brazma1, Alistair Reid2, Julie Howard-Reeves1, Mikel Valgañón1, Anastasios Chanalaris1, Valeria Melo2, David Marín2, Jane F. Apperley2, Colin Grace1, E. Nacheva1
1Molecular Cytogenetics, Academic Haematology, Royal Free and UCL Medical School, Rowland Hill Street, London, NW3 2PF, UK
2Imperial College, Faculty Medicine, Dept of Haematology, Hammersmith Hospital, Du Cane Road, London, W12 ONN, UK

Tóm tắt

Tóm tắt Thông tin nền

Bệnh bạch cầu tủy mãn tính (CML) là một rối loạn tế bào gốc huyết học, gần như luôn luôn được xác định bởi sự hiện diện của nhiễm sắc thể Philadelphia (Ph), thường do translocation t(9;22)(q34;q11) hoặc các biến thể của nó. Ph dẫn đến sự hình thành của gen hợp nhất BCR/ABL1, là một tyrosine kinase được hoạt hóa liên tục. Khoảng 1% bệnh nhân CML có kiểu hình âm tính với Ph nhưng mang một gen hợp nhất BCR/ABL1 ngầm mà có thể được xác định bằng kỹ thuật lai huỳnh quang tại chỗ (FISH) tại vị trí nhiễm sắc thể 22q11, 9q34 hoặc một nhiễm sắc thể thứ ba. Ở đây, chúng tôi trình bày dữ liệu lập bản đồ FISH của các vùng lân cận BCR và ABL1 và các tái sắp xếp nhiễm sắc thể liên quan trong 9 bệnh nhân CML dương tính với BCR/ABL1 âm tính với Ph cộng với dòng tế bào CML-T1.

 Kết quả

BCR/ABL1 được xác định tại vị trí 9q34 ở 3 bệnh nhân, 22q11 ở 5 bệnh nhân và CML-T1 tại 22p11 ở 1 bệnh nhân. Trong 3 trong số 6 trường hợp có sự hợp nhất tại 22q11, một cụm điểm đứt gãy xa đã được tìm thấy trong một vùng 280 Kb chứa gen RAPGEF1, trong khi một bệnh nhân khác và CML-T1 có điểm đứt gãy xa nằm trong một BAC clone đơn chứa gen RXRA 3'. Hai trường hợp có sự sao chép của Ph bị che giấu trong khi các mất đoạn gen ở các vùng lân cận đã được xác định trong 3 trường hợp. Những tái sắp xếp phức tạp hơn còn được tìm thấy ở 3 trường hợp khác.

 Kết luận

Sự hình thành BCR/ABL1 là kết quả của một sự chèn trực tiếp (cơ chế một bước) ở 6 bệnh nhân và CML-T1, trong khi ở 3 bệnh nhân còn lại, gen hợp nhất bắt nguồn từ một chuỗi các tái sắp xếp (nhiều bước). Sự hiện diện của các biến thể khác nhau ở cả vùng 9q34 và 22q11 nhấn mạnh tính đa dạng di truyền của nhóm CML này. Các nghiên cứu trong tương lai nên được thực hiện để xác nhận sự hiện diện của các điểm nóng đứt gãy thực sự và đánh giá ý nghĩa của chúng trong CML dương tính với BCR/ABL1 âm tính với Ph.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Melo JV, Barnes DJ: Chronic myeloid leukaemia as a model of disease evolution in human cancer. Nat Rev Cancer 2007, 7: 441–53. 10.1038/nrc2147

Hagemeijer A, de Klein A, Godde-Salz E, Turc-Carel C, Smit EM, van Agthoven AJ, Grosveld GC: Translocation of c-abl to "masked" Ph in chronic myeloid leukemia. Cancer Genet Cytogenet 1985, 18: 95–104. 10.1016/0165-4608(85)90059-7

Morris CM, Reeve AE, Fitzgerald PH, Hollings PE, Beard ME, Heaton DC: Genomic diversity correlates with clinical variation in Ph'-negative chronic myeloid leukaemia. Nature 1986, 320: 281–3. 10.1038/320281a0

Hagemeijer A, Buijs A, Smit E, Janssen B, Creemers GJ, Plas D, Grosveld G: Translocation of BCR to chromosome 9: a new cytogenetic variant detected by FISH in two Ph-negative, BCR-positive patients with chronic myeloid leukemia. Genes Chromosomes Cancer 1993, 8: 237–45. 10.1002/gcc.2870080406

Nacheva E, Holloway T, Brown K, Bloxham D, Green AR: Philadelphia-negative chronic myeloid leukaemia: detection by FISH of BCR-ABL fusion gene localized either to chromosome 9 or chromosome 22. Br J Haematol 1994, 87: 409–12. 10.1111/j.1365-2141.1994.tb04933.x

Morris CM, Heisterkamp N, Kennedy MA, Fitzgerald PH, Groffen J: Ph-negative chronic myeloid leukemia: molecular analysis of ABL insertion into M-BCR on chromosome 22. Blood 1990, 76: 1812–8.

Valle L, Fernandez V, Perez-Pons C, Sanchez FG, Benitez J, Urioste M: Generation of the BCR/ABL fusion gene in a Philadelphia chromosome-negative chronic myeloid leukaemia: insertion of 5.6 Mb of 9q34 into the BCR region of chromosome 22. Hematol Oncol 2006, 24: 86–8. 10.1002/hon.775

Zagaria A, Anelli L, Albano F, Vicari L, Schiavone EM, Annunziata M, Pane F, Liso V, Rocchi M, Specchia G: Molecular cytogenetic characterization of deletions on der(9) in chronic myelocytic leukemia. Cancer Genet Cytogenet 2006, 167: 97–102. 10.1016/j.cancergencyto.2006.01.011

Storlazzi CT, Anelli L, Surace C, Lonoce A, Zagaria A, Nanni M, Curzi P, Rocchi M: Molecular cytogenetic characterization of a complex rearrangement involving chromosomes 9 and 22 in a case of Ph-negative chronic myeloid leukemia. Cancer Genet Cytogenet 2002, 136: 141–5. 10.1016/S0165-4608(02)00530-7

Todoric-Zivanovic B, Marisavljevic D, Surace C, Cemerikic V, Markovic O, Krtolica K, Tatomirovic Z, Cikota B, Magic Z, Rocchi M: A Ph-negative chronic myeloid leukemia with a complex BCR/ABL rearrangement and a t(6;9)(p21;q34.1). Cancer Genet Cytogenet 2006, 166: 180–5. 10.1016/j.cancergencyto.2005.11.008

Kuriyama K, Gale RP, Tomonaga M, Ikeda S, Yao E, Klisak I, Whelan K, Yakir H, Ichimaru M, Sparkes RS, Dreazen O: CML-T1: a cell line derived from T-lymphocyte acute phase of chronic myelogenous leukemia. Blood 1989, 74: 1381–7.

Gribble SM, Reid AG, Roberts I, Grace C, Green AR, Nacheva EP: Genomic imbalances in CML blast crisis: 8q24.12-q24.13 segment identified as a common region of over-representation. Genes Chromosomes Cancer 2003, 37: 346–58. 10.1002/gcc.10173

De Melo VA, Milojkovic D, Marin D, Apperley JF, Nacheva EP, Reid AG: Deletions adjacent to BCR and ABL1 breakpoints occur in a substantial minority of chronic myeloid leukemia patients with masked Philadelphia rearrangements. Cancer Genet Cytogenet 2008, 182: 111–5. 10.1016/j.cancergencyto.2008.01.007

UCSC Human Genome Browser Gateway[http://genome.ucsc.edu]

Human 32K BAC Re-Array[http://bacpac.chori.org/genomicRearrays.php]

Spectral Genomics[http://www.spectralgenomics.com]

Agilent[http://www.agilent.com]

Brazma D, Grace C, Howard J, Melo JV, Holyoke T, Apperley JF, Nacheva EP: Genomic profile of chronic myelogenous leukemia: Imbalances associated with disease progression. Genes Chromosomes Cancer 2007, 46: 1039–50. 10.1002/gcc.20487

Molecular Cytogenetics of Haematological Disorders[http://www.ucl.ac.uk/leukemia-cytogenetics]

Guerrero C, Fernandez-Medarde A, Rojas JM, Font de Mora J, Esteban LM, Santos E: Transformation suppressor activity of C3G is independent of its CDC25-homology domain. Oncogene 1998, 16: 613–24. 10.1038/sj.onc.1201569

Guerrero C, Martin-Encabo S, Fernandez-Medarde A, Santos E: C3G-mediated suppression of oncogene-induced focus formation in fibroblasts involves inhibition of ERK activation, cyclin A expression and alterations of anchorage-independent growth. Oncogene 2004, 23: 4885–93. 10.1038/sj.onc.1207622

Cho YJ, Hemmeryckx B, Groffen J, Heisterkamp N: Interaction of Bcr/Abl with C3G, an exchange factor for the small GTPase Rap1, through the adapter protein Crkl. Biochem Biophys Res Commun 2005, 333: 1276–83. 10.1016/j.bbrc.2005.06.030

Ahuja HS, Szanto A, Nagy L, Davies PJ: The retinoid × receptor and its ligands: versatile regulators of metabolic function, cell differentiation and cell death. J Biol Regul Homeost Agents 2003, 17: 29–45.

Taschner S, Koesters C, Platzer B, Jorgl A, Ellmeier W, Benesch T, Strobl H: Down-regulation of RXRalpha expression is essential for neutrophil development from granulocyte/monocyte progenitors. Blood 2007, 109: 971–9. 10.1182/blood-2006-04-020552

Zhu J, Nasr R, Peres L, Riaucoux-Lormiere F, Honore N, Berthier C, Kamashev D, Zhou J, Vitoux D, Lavau C, de The H: RXR is an essential component of the oncogenic PML/RARA complex in vivo. Cancer Cell 2007, 12: 23–35. 10.1016/j.ccr.2007.06.004

Zeisig BB, Kwok C, Zelent A, Shankaranarayanan P, Gronemeyer H, Dong S, So CW: Recruitment of RXR by homotetrameric RARalpha fusion proteins is essential for transformation. Cancer Cell 2007, 12: 36–51. 10.1016/j.ccr.2007.06.006

Sinclair PB, Nacheva EP, Leversha M, Telford N, Chang J, Reid A, Bench A, Champion K, Huntly B, Green AR: Large deletions at the t(9;22) breakpoint are common and may identify a poor-prognosis subgroup of patients with chronic myeloid leukemia. Blood 2000, 95: 738–43.

Huntly BJ, Reid AG, Bench AJ, Campbell LJ, Telford N, Shepherd P, Szer J, Prince HM, Turner P, Grace C, Nacheva EP, Green AR: Deletions of the derivative chromosome 9 occur at the time of the Philadelphia translocation and provide a powerful and independent prognostic indicator in chronic myeloid leukemia. Blood 2001, 98: 1732–8. 10.1182/blood.V98.6.1732

Huntly BJ, Guilhot F, Reid AG, Vassiliou G, Hennig E, Franke C, Byrne J, Brizard A, Niederwieser D, Freeman-Edward J, Cuthbert G, Bown N, Clark RE, Nacheva EP, Green AR, Deininger MW: Imatinib improves but may not fully reverse the poor prognosis of patients with CML with derivative chromosome 9 deletions. Blood 2003, 102: 2205–12. 10.1182/blood-2002-09-2763

Quintas-Cardama A, Kantarjian H, Talpaz M, O'Brien S, Garcia-Manero G, Verstovsek S, Rios MB, Hayes K, Glassman A, Bekele BN, Zhou X, Cortes J: Imatinib mesylate therapy may overcome the poor prognostic significance of deletions of derivative chromosome 9 in patients with chronic myelogenous leukemia. Blood 2005, 105: 2281–6. 10.1182/blood-2004-06-2208

Kreil S, Pfirrmann M, Haferlach C, Waghorn K, Chase A, Hehlmann R, Reiter A, Hochhaus A, Cross NC: Heterogeneous prognostic impact of derivative chromosome 9 deletions in chronic myelogenous leukemia. Blood 2007, 110: 1283–90. 10.1182/blood-2007-02-074252

Batista DA, Hawkins A, Murphy KM, Griffin CA: BCR/ABL rearrangement in two cases of Philadelphia chromosome negative chronic myeloid leukemia: deletion on the derivative chromosome 9 may or not be present. Cancer Genet Cytogenet 2005, 163: 164–7. 10.1016/j.cancergencyto.2005.04.021

Costa D, Espinet B, Queralt R, Carrio A, Sole F, Colomer D, Cervantes F, Hernandez JA, Besses C, Campo E: Chimeric BCR/ABL gene detected by fluorescence in situ hybridization in three new cases of Philadelphia chromosome-negative chronic myelocytic leukemia. Cancer Genet Cytogenet 2003, 141: 114–9. 10.1016/S0165-4608(02)00662-3

Dufva IH, Karle H, Brondum-Nielsen K, Andersen MK, Madsen HO, Johnsen HE: Chronic myeloid leukaemia with BCR-ABL fusion genes located to both chromosomes 9, cyclic leukocytosis and nodal T-lymphoblastic transformation–durable complete remission following imatinib therapy. Leukemia 2005, 19: 671–3.

Fugazza G, Garuti A, Marchelli S, Miglino M, Bruzzone R, Gatti AM, Castello S, Sessarego M: Masked Philadelphia chromosome due to atypical BCR/ABL localization on the 9q34 band and duplication of the der(9) in a case of chronic myelogenous leukemia. Cancer Genet Cytogenet 2005, 163: 173–5. 10.1016/j.cancergencyto.2005.05.010

Thông tin
Thông tin xuất bản

Molecular Cytogenetics

Tập 1 Số 1

Thông tin tác giả