Đánh giá yêu cầu ion kim loại của hydroxylase deoxyhypusine người từ tế bào HeLa bằng cách sử dụng thử nghiệm enzyme mới

FEBS Letters - Tập 380 - Trang 209-214 - 1996
Robert Csonga1, Peter Ettmayer1, Manfred Auer1, Christoph Eckerskorn2, Jörg Eder1, Hannelore Klier1,2
1Sandoz Research Institute, Department of Immunodermatology, Brunner Strasse 59, A-1235 Vienna, Austria
2Max-Planck-Institute for Biochemistry, Am Klopferspitz 18A, D-82152 Martinsried, Germany

Tóm tắt

Tổng hợp hypusine trong yếu tố khởi đầu eukaryote 5A là một quá trình sửa đổi sau dịch mã độc đáo gồm hai giai đoạn. Sau khi deoxyhypusine được tạo ra bởi enzyme tổng hợp deoxyhypusine, hydroxylase deoxyhypusine (EC 1.14.99.29) xúc tác cho sự hình thành hypusine trưởng thành. Một phương pháp thử nghiệm nhanh để theo dõi hoạt động hydroxylase deoxyhypusine đã được thiết lập, sử dụng sự phân giải ôxy hóa của dư lượng hypusyl và việc chiết xuất aldehyde được tạo ra. Do các tác nhân chelat ion kim loại đã được báo cáo là ức chế hydroxylase deoxyhypusine, cơ chế ức chế này và tác động của các ion kim loại chuyển tiếp lên hoạt động enzyme đã được điều tra. Một ion sắt dường như cần thiết cho hoạt động enzym, và sự ức chế của nó hoàn toàn bị quy cho khả năng gắn kết ion kim loại của các tác nhân chelat.

Từ khóa

#deoxyhypusine #hydroxylase #enzyme assay #metal ion chelator #HeLa cells

Tài liệu tham khảo

10.1128/MCB.11.6.3105 10.1007/BF00284682 10.1007/BF00282755 Park M.H., 1993, BioFactors, 4, 95 10.1074/jbc.270.1.383 Wolff E.C., 1995, FASEB J., 9, 1434 10.1021/bi00045a010 10.1074/jbc.270.31.18408 10.1074/jbc.270.38.22386 10.1016/0014-5793(95)01456-X 10.1016/S0021-9258(18)34559-9 10.1016/0167-4838(91)90053-3 10.1016/0167-4838(89)90195-7 10.1016/0167-4889(94)90003-5 10.1016/0014-5793(95)00493-S 10.1172/JCI117684 10.1016/S0021-9258(17)35750-2 10.1016/0304-4165(71)90069-9 10.1016/0006-2952(84)90462-3 Kivirikko K.I., 1982, Methods in Enzymology Lohaus G., 1981, Drug Res., 31, 1311 10.1021/bi00045a011 10.1016/0014-5793(95)00394-O 10.1006/jmbi.1995.0549 10.1016/0003-2697(86)90044-8 10.1016/0014-5793(93)80229-N Feldman S., 1994, Cancer Res., 54, 494 10.1006/viro.1994.1636 10.1074/jbc.270.16.9597