Atsushi Sasakawa1, Yasuhiro Maeda2, Chikara Hirase2, Akihisa Kanamaru2
1Department of Hematology, Kinki University School of Medicine, Osaka-Sayama, Japan;
2Dept. of Hematology, Kinki Univ. School of Med., Osakasayama, Japan
Tóm tắt
Tóm tắt
Các bệnh lymphoma không Hodgkin (NHL) đã được biết đến là một biến chứng lớn ở những bệnh nhân nhiễm virus suy giảm miễn dịch ở người (HIV), và là nguyên nhân chính gây tử vong ở những bệnh nhân nhiễm HIV. Gần đây, các nghiên cứu đã báo cáo rằng liệu pháp kháng retrovirus tích cực (HAART) làm giảm tỷ lệ mắc lymphoma liên quan đến HIV. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã cố gắng tạo mô hình in vitro của lymphoma liên quan đến HIV qua sự biến đổi của virus Epstein-Barr, và để kiểm tra các đặc điểm tế bào và phân tử của các tế bào lymphoma liên quan đến HIV thu được từ bệnh nhân nhiễm HIV. Các tế bào PBMC từ 10 bệnh nhân nhiễm HIV và 10 cá nhân bình thường âm tính với HIV đã được thu thập thông qua kỹ thuật ly tâm gradient mật độ Ficoll-Paque (Amersham Biosciences Corp. NJ). Các dòng tế bào lymphoblastoid (LCL) đã được thu nhận từ mỗi bệnh nhân thông qua sự biến đổi bằng virus Epstein-Barr (B95-8). Các tế bào được nuôi cấy trong môi trường RPMI 1640 (GIBCO, Grand Island, NY) bổ sung với 10% huyết thanh bê thai (FCS) (JRH Biosciences, Inc. Lenexa, Kansas), kháng sinh và L-glutamine và duy trì ở 37°C trong môi trường có 5% CO2. Phân tích FACS cho thấy các tế bào là CD3−, CD4−, CD8−, CD5−, CD19+, CD20+, HLA-class I+, -class II+. Sau khi thiết lập các LCL, để thu được quần thể tinh khiết cao, các LCL CD19+ đã được phân loại trên máy FACS Vantage SE (Becton Dickinson, San Jose, CA). Độ tinh khiết của mỗi quần thể LCL CD19+ được đánh giá bằng phân tích FACS luôn cao hơn 98%. Sau khi có lợi thế sinh trưởng của các LCL, khả năng phát triển của các LCL từ bệnh nhân HIV được kiểm tra bằng thử nghiệm MTT. Kết quả cho thấy không có sự khác biệt đáng kể về khả năng phát triển giữa các LCL thu được từ bệnh nhân HIV và từ các cá nhân bình thường. Hơn nữa, sự biểu hiện của các phân tử bám dính tế bào (CD11a, CD11b, CD18, CD50 và CD54) của các LCL được quan sát bằng FACS. Kết quả cho thấy sự biểu hiện của CD18 trên các LCL thuobt từ bệnh nhân HIV đã được tăng cường đáng kể so với các LCL bình thường. Hiện tượng này dường như nhất quán với sự phát triển của lymphoma hệ thần kinh trung ương (CNS) nguyên phát. Hơn nữa, các tác động của thuốc kháng retrovirus tới sự biểu hiện của các phân tử bám dính được kiểm tra. Sự đột biến siêu cấp của gen chuỗi nặng biến thể immunoglobulin (IGHV) đã được phát hiện trên 90% lymphoma liên quan đến HIV. Các tác động của HAART đối với sự đột biến siêu cấp của IGHV của LCL thu được từ bệnh nhân HIV cũng sẽ được đề cập.
