Sự phân rã do pha loãng của vi ống: Mối quan hệ với tính không ổn định động và mũ GTP
Tóm tắt
Các vi ống đã được lắp ráp từ tubulin tinh khiết trong dung dịch đệm được sử dụng để nghiên cứu sự không ổn định động (100 mM PIPES, 2 mM EGTA, 1 mM magie, 0.2 mM GTP) và sau đó được pha loãng trong cùng một dung dịch đệm để nghiên cứu tốc độ phân rã. Sau khi pha loãng gấp 15 lần, polymer vi ống giảm tuyến tính còn khoảng 20% so với giá trị ban đầu trong 15 giây. Chúng tôi đã xác định phân bố chiều dài của các vi ống trước khi pha loãng và chuẩn bị các mô phỏng máy tính về sự mất polymer với các tốc độ phân rã giả định khác nhau. Dữ liệu thí nghiệm của chúng tôi nhất quán với tốc độ phân rã trên mỗi vi ống là 60 μm/phút. Đây là tổng tốc độ phân hủy của các vi ống trong giai đoạn rút ngắn nhanh, được xác định bằng kính hiển vi ánh sáng của các vi ống đơn lẻ (Walker et al.:
Từ khóa
Tài liệu tham khảo
Bayley P., 1990, Microtubule dynamic instability: numerical simulation of microtubule transition properties using a lateral cap model, J. Cell Sci., 95, 33, 10.1242/jcs.95.1.33
Caplow M., 1985, Concerning the anomalous kinetic behavior of microtubules, J. Biol. Chem., 260, 12675, 10.1016/S0021-9258(17)38925-1
Caplow M., 1988, Temperature‐jump studies of microtubule dynamic instability, J. Biol. Chem., 263, 10344, 10.1016/S0021-9258(19)81522-3
Caplow M., 1990, Mechanism for oscillatory assembly of microtubules, J. Biol. Chem., 265, 1414, 10.1016/S0021-9258(19)40030-6
Hitt A. L., 1990, Microtubule solutions display nematic liquid crystalline structure, J. Biol. Chem., 265, 1639, 10.1016/S0021-9258(19)40064-1
Karr T. L., 1980, Mechanism of microtubule depolymerization: correlation of rapid induced disassembly experiments with a kinetic model for endwise depo‐lymerization, J. Biol. Chem., 255, 8560, 10.1016/S0021-9258(18)43534-X
Voter W. A., 1984, The kinetics of microtubule assembly. Evidence for a two‐stage nucleation mechanism, J. Biol. Chem., 259, 10430, 10.1016/S0021-9258(18)90982-8
Walker R. A., 1989, Dilution of individual microtubules observed in real time in vitro: determination of the delay preceding the onset of rapid shortening, J. Cell Biol., 109, 342a